张继领
- 作品数：25 被引量：104H指数：6
- 供职机构：中国石油中心医院更多>>
- 发文基金：河北省科技支撑计划项目河北省科学技术研究与发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养和鉴定方法学探讨被引量：8
- 2013年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞体外分离培养和鉴定方法,找到一种能在质和量上均能满足需要的体外培养条件。方法无菌条件下分离处死后取小鼠双下肢骨,低糖DMEM培养液冲出骨髓,离心5mins,用5ml含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液重悬细胞。加入等体积密度为1.073g/L percoll分离液离心30mins。取中层云雾状细胞。37℃、5%CO2培养箱中贴壁培养。取5-10代细胞培养至对数生长期后,洗涤离心。取100μl细胞悬液分别加入相应抗体,避光孵育30mins,洗涤离心。流式细胞仪检测,CELLQUEST软件收集数据。结果骨髓间充质干细胞是一类纺锤形或梭形细胞,与纤维细胞类似,顺向呈"鱼群样"排列。CD45、CD34、CD31呈阴性表达,表达率分别为0.82%,0.27%,0.97%;CD44、CD90、CD71呈阳性表达,表达率分别为99.8%,99.7%,99.36%。不同代数细胞表面分子的表达情况无明显差异(P>0.05)。结论贴壁培养法能够在质和量上满足骨髓间充质干细胞的体外培养条件。
- 银广悦陈素萍丁俊丽张继领刘继勇张龙张明
- 关键词：贴壁法骨髓间充质干细胞体外培养
- 不同温度和时间对血常规参数检测结果的影响被引量：17
- 2013年
- 目的探讨EDTA-K2抗凝静脉血在不同温度和时间对血常规参数检测结果的影响。方法运用XT-1800i全自动血细胞分析仪测定91份在不同温度下保存不同时间的血标本,其中31份血标本于4℃冷藏,并于0.5h、24h、48h、72h测定。30份血标本20℃保存,于0.5h、2h、4h、8h、24h测定;另30份血标本20℃保存,于24h、48h、72h再测定,各以0.5h测定结果为对照组,观察血常规参数检测结果变化。结果 20℃保存24h,WBC、RBC、Hb、MCH及WBC与对照组差异均无统计学意义(P>0.05),16种血常规参数差异均有统计学意义(P<0.05);20℃保存72h,WBC、RBC、Hb差异均有统计学意义(P<0.05),16种血常规参数从24h即有明显的变化,差别有统计学意义(P<0.05);4℃冷藏72h,WBC、RBC、MCH、Hb在72h内比较稳定,HCT、PLT及WBC分类在48h内比较稳定,14种血常规参数在24h有明显变化。结论血常规标本4℃冷藏,血细胞参数结果较稳定,但仍要考虑到个别参数的变化,以便于为临床提供更可信的数据。
- 龚庆辉银广悦张龙史连义王保亚张继领
- 关键词：温度血常规全自动血细胞分析仪
- 间充质干细胞向心肌细胞分化的实验进展被引量：2
- 2013年
- 间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是中胚层发育的早期细胞,具有自我更新和多向分化能力,在体外培养条件下可分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、成肌细胞及神经系统细胞等。MSCs存在于成人骨髓、脐血、羊水、胎盘等。其优点：①体外易获得、易分离培养,增殖快;②具有独特的免疫学特性：不表达MHCⅡ类分子和共刺激分子B7-l、B7-2,故不能刺激机体产生免疫反应，将MSCs输入体内之后不会被排斥，可以在宿主体内长期存活；
- 银广悦丁俊丽张继领
- 关键词：间充质干细胞心肌细胞体外培养诱导分化
- 冠心病患者血清总胆红素水平的meta分析被引量：5
- 2012年
- 目的探讨血清胆红素水平与冠心病的关系。方法检索中国知网、万方、维普数据库关于冠心病与血清总胆红素水平关系的对照研究,以此作为基础文献,数据以RevMan4.2软件进行meta分析。结果共收集到符合要求的文献26篇,漏斗图显示文献无发表偏倚,meta分析结果显示冠心病患者较非冠心病者血清总胆红素水平低(P<0.000 01),多支病变组较双支病变组及单支病变组血清总胆红素水平低(P<0.000 01),双支病变组较单支病变组血清总胆红素水平低(P=0.02)。结论冠心病患者血清总胆红素水平低于非冠心病者,冠状动脉病变越严重血清总胆红素越低。
- 史连义周志伟田雪梅张继领刘继勇杨保昌马春华
- 关键词：冠心病胆红素冠状动脉造影META分析
- 在AU2700生化分析仪上测定IgG限额参数MaxOD的设置
- 2011年
- 对基于抗原抗体反应的免疫透射比浊反应当抗原过量（出现等价带及后带反应）时,其浊度大小与抗原含量的正比关系即不存在,可能导致错误结果.现以科华公司IgG测定为例,在AU2700生化分析仪上通过设定限额参数MaxOD,来自动识别抗原过量.
- 史连义刘继勇谢卫张继领王鑫
- 关键词：限额参数IGG抗原抗体反应免疫透射比浊
- 肛周脓肿细菌感染菌群分布研究被引量：13
- 2004年
- ①目的 探讨肛周脓肿厌氧与需氧菌的菌群分布。②方法 选择 31例肛周脓肿患者 ,对其脓液中的厌氧菌和需氧菌进行培养鉴定。③结果 肛周脓肿感染患者中男 2 7例 ,女 4例 ;感染者中共分离出 51株细菌 ,其中厌氧菌 30株 ,需氧菌 2 1株。厌氧菌总检出率为 96 .8% ,需氧菌总检出率为 67.4%。单纯厌氧菌感染检出率为 32 .3 % ,单纯需氧菌检出率为 3 .2 %。厌氧和需氧菌混合感染检出率为 64 .5 %。在所分离出的 30株厌氧菌中 ,脆弱类杆菌占 80 % ,消化链球菌占 1 3 % ,普通类杆菌和产黑色素类杆菌各占 3 .3 %。 2 1株需氧菌中 ,大肠杆菌占 71 % ,肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌各占 9.5 %。④结论 肛周脓肿男性患病率高于女性 ;细菌感染菌群分布以脆弱类杆菌和大肠杆菌为主 ;
- 张继领汪阳林史连义银广悦王文红
- 关键词：肛周脓肿厌氧菌需氧菌菌群分布
- 酶联免疫吸附测定诊断试剂盒使用中出现的问题和解决方法
- 2004年
- 自从1971年Engvall等发表了酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay ELISA)用于IgG定量测定的文章后,使1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测量方法,即当今广泛使用的ELISA技术.此项技术因其具有高度的特异性和敏感性(最小测量值可达ng甚至pg水平),又无放射免疫测定的放射性危害和荧光免疫技术需要昂贵设备的不足而且可手工、半自动、自动化进行操作等优点,而在各级医院、血站、疾病控制中心等医学标本检验中得到广泛应用.但是,在实际使用中,可能出现这样那样的问题影响检验结果的准确性.下面就我们工作中遇到的问题以及防止和解决方法加以叙述,供同行借鉴.
- 张继领王文红汪阳林
- 关键词：酶联免疫吸附试验试剂盒
- 明胶-Ficoll法分离骨髓单个核细胞的方法学探讨被引量：1
- 2012年
- 目的比较直接利用Ficoll一步法和明胶-Ficoll两步法分离骨髓单个核细胞(MNCs)的效果。方法无菌条件下取人骨髓液40mL,平均分为两份。一份采用Ficoll一步法直接分离MNCs;另一份先采用明胶沉淀红细胞后,再利用Ficoll分离MNCs。比较两者的分离效率、细胞活力、CD34+和CD44+/CD71+的表达规律。结果一步法和两步法分离效率、细胞活力差异无统计学意义;两步法分离所得的MNCs表达CD34+的细胞数和CD44+/CD71+的细胞数高于一步法,差异有统计学意义。结论采用明胶-Ficoll两步法分离骨髓单个核细胞不但不会增加MNCs的损失,还可更好地保留骨髓造血干细胞和骨髓间充质干细胞。
- 银广悦陈素萍张继领孙建洁张龙
- 关键词：骨髓单个核细胞间充质干细胞
- 血清标本在不同温度与时间下储存对生化检验结果的影响被引量：5
- 2005年
- ①目的探讨血清标本在不同温度与时间储存对生化检测结果的影响.②方法将50例混合血清即刻测定11项生化指标(ALT, AST, GGT, AKP, CK, HBDH, LDH, BUN, Cr, UA, Glu),然后分别将每例分成24份,分别加盖放置在-20℃、4℃、+20℃、+35℃条件下,并于4、8、12、24、48和72小时后重测,比较其结果.③结果除在35℃放置72小时后CK测定结果超出了实验室允许范围,其余测定结果均在实验室允许范围之内.④结论血清标本放置在-20℃～35℃之间72小时内较稳定.
- 史连义张继领刘继勇杨保昌范小奎
- 关键词：血清标本温度
- 人骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞及鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的探讨5-氮胞苷作为诱导剂体外诱导人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)分化为心肌样细胞,并对其进行鉴定。方法采用密度梯度离心法与贴壁培养法相结合分离培养hMSCs,以5-氮胞苷诱导第3代hMSCs,24h后继续培养,观察细胞形态学的变化;培养4周,采用免疫细胞化学法对分化的心肌样细胞特异性蛋白结蛋白、心肌肌钙蛋白I进行鉴定。结果培养7d后hMSCs贴壁呈集落生长,有成纤维细胞样外观;5-氮胞苷诱导7d后细胞呈梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成,免疫细胞化学法检测人心肌特异性蛋白结蛋白、心肌肌钙蛋白I表达阳性,而未经诱导的相同培养时间的hMSCs中均未见表达。结论 hMSCs体外在5-氮胞苷诱导下可定向分化为心肌样细胞。
- 银广悦张继领陈素萍张龙张明
- 关键词：人骨髓间充质干细胞心肌样细胞5-氮胞苷分化
