目的探讨影响原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)观察双微体(double minute chromosomes,DMs)的各种因素,包括原子力显微镜成像模式的选择,以及样品制备过程中各种条件的优化。方法培养耐氨甲喋呤(MTX)300μmol/L的小鼠成纤维细胞系3T3R500,收获中期染色体后制片,胃蛋白酶消化标本,梯度酒精脱水,最后用原子力显微镜观察染色体中期分裂相。结果优化条件后,在原子力显微镜下很容易找到分裂相。图像扫描显示,染色体在分散程度和清晰度上都有很大提高,双微体的成像质量也有极大的改善。结论优化染色体制片条件及选择恰当的原子力显微镜成像模式可获得高质量的DMs图片。