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含荧光素酶四膜虫B2086-LUC全细胞生物传感器的构建及其对重金属离子的响应被引量：4: 2013年; 为了获得可用于快速检测环境中重金属污染的全细胞生物传感器,本研究将含有HA标签的萤火虫荧光素酶(LUC)基因重组到含有四膜虫金属硫蛋白MTT1启动子和微管蛋白终止子序列的载体pBX中,获得重组质粒pBX-LUC,用基因枪粒子轰击法将pBX-LUC转化入四膜虫细胞中,通过同源重组和巴龙霉素抗性筛选,LUC基因整合到四膜虫大核基因组MTT1位点,获得含有LUC基因的细胞株B2086-LUC.B2086-LUC对重金属镉和汞的响应敏感,可检测的最低浓度为5-10ng/mL;对铜和锌的响应较弱,可检测的最低浓度为0.5-1mg/mL.因此,四膜虫B2086-LUC可作为环境中镉和汞污染快速检测的全细胞生物传感器.; 张鹏幸许静卢剑功王伟; 关键词：萤火虫荧光素酶嗜热四膜虫汞生物传感器

嗜热四膜虫两类不同金属硫蛋白的生物学功能研究: 金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸,但缺乏芳香族氨基酸的蛋白.MT具有螯合重金属离子解毒,参与调节体内必需金属元素的新陈代谢,清除体内自由基的功能.嗜热四膜虫(Tetrahym...; 卢剑功许静张鹏幸王伟; 关键词：嗜热四膜虫金属硫蛋白基因敲除

嗜热四膜虫两类不同金属硫蛋白的生物学功能研究: 金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸,但缺乏芳香族氨基酸的蛋白。MT具有螯合重金属离子解毒,参与调节体内必需金属元素的新陈代谢,清除体内自由基的功能。嗜热四膜虫(Tetrahym...; 卢剑功许静张鹏幸王伟; 关键词：嗜热四膜虫金属硫蛋白基因敲除; 文献传递

含荧光素酶嗜热四膜虫的构建及对重金属离子的响应: 金属硫蛋白(Metallothioneins，MTs)广泛存在于各种生物体中，是一类富含半胱氨酸可被镉、铜、锌、铅或汞等金属诱导表达的低分子量蛋白，同时可作为生物标记物用于环境中重金属污染的监测。根据来源，金属硫蛋白被分...; 张鹏幸; 关键词：金属硫蛋白荧光素酶嗜热四膜虫六价铬转录调控重金属离子; 文献传递

含有荧光素酶基因的四膜虫细胞株及其构建方法和应用: 含有荧光素酶基因的四膜虫细胞株及其构建方法和应用。通过PCR技术将萤火虫荧光素酶基因的N-端和C-端序列优化为四膜虫偏爱密码子，将优化后的萤火虫荧光素酶基因LUC连接到载体pBX中，获得含有该基因的重组质粒pBX-LUC...; 王伟张鹏幸许静梁爱华; 文献传递

嗜热四膜虫两类不同金属硫蛋白的功能补偿分析被引量：5: 2014年; 为了分析嗜热四膜虫两类金属硫蛋白之间的关系,研究分别构建了MTT1-MTT3和MTT2-MTT4的基因敲除载体,通过同源重组获得敲除大核MTT1-MTT3和MTT2-MTT4的两种嗜热四膜虫突变体细胞株△MTT1-MTT3和△MTT2-MTT4。两种突变体细胞株暴露在Cd2+、Cu2+和H2O2的生长表现出显著不同,△MTT1-MTT3突变体细胞对Cd2+的耐受性显著下降,而△MTT2-MTT4突变体细胞对Cu2+和H2O2的耐受性均显著下降。实时荧光定量PCR分析不同突变体中其他MTT基因的表达变化,在△MTT2-MTT4突变体细胞株中,MTT5的表达水平下调,在500μmol/L Cu2+处理后,△MTT2-MTT4突变体细胞中MTT1、MTT3和MTT5表达相对野生型分别上调6.1、9.5和8.5倍。在△MTT1-MTT3突变体细胞中,MTT2、MTT4和MTT5的表达水平下调,当5μmol/L Cd2+处理后,△MTT1-MTT3突变体细胞株MTT5表达水平相对野生型上调2.9倍,而MTT2和MTT4表达水平相对野生型分别下降了4.9倍和2.5倍。结果表明嗜热四膜虫中的金属硫蛋白MTT1、MTT3和MTT5主要参与细胞的重金属解毒功能;而MTT2和MTT4主要参与细胞内正常的新陈代谢功能,不同的金属硫蛋白基因之间的表达存在相互调控和功能补偿。; 卢剑功许静张鹏幸王伟; 关键词：嗜热四膜虫金属硫蛋白基因敲除

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张鹏幸