彭娟 作品数:32 被引量:64 H指数:6 供职机构: 福建出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 福建出入境检验检疫局科技计划项目 国家质检总局科技计划项目 转基因生物新品种培育专项 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 农业科学 自动化与计算机技术 更多>>
一种利用超声波处理提取河豚鱼DNA的方法 本发明涉及一种利用超声波处理提取河豚鱼DNA的方法,所述方法为:1)合成引物对;2)河豚鱼DNA样品中加入CTAB裂解缓冲液,在功率100%的超声波清洗器中65℃恒温温浴处理,处理时间为5-25 min,各处理重复3次;... 陈文炳 翁国柱 邵碧英 缪婷玉 江树勋 彭娟文献传递 河豚毒素DNA适配子的筛选与结构分析 被引量:9 2012年 人工合成113个碱基的随机ssDNA文库,以河豚毒素为靶物质,采用SELEX技术进行12轮筛选,测定各轮富集文库与河豚毒素的亲和力,其中第10轮富集文库与河豚毒素的亲和力最高。将第10轮富集文库进行克隆、测序,用DNAMAN软件分析克隆子的一级和二级结构,并测定克隆子与河豚毒素的亲和力。结果表明:与河豚毒素结合力高的DNA适配子经过10轮筛选后得到富集,成功筛选到最高亲和力的DNA适配子G10。 邵碧英 高兴 杨方 陈文炳 缪婷玉 彭娟关键词:河豚毒素 适配子 SELEX 水稻种子样品前处理对转基因成分荧光PCR检测的影响 被引量:3 2015年 以转基因水稻科丰6号不同含量的水稻种子为样品,对影响检测结果的主要前处理措施,包括样品研磨颗粒细度与DNA提取过程中样品CTAB裂解缓冲液温育时间等,进行分析筛选.结果表明,样品颗粒细度与CTAB缓冲液温育时间的不同处理组合对提取的DNA含量影响极显著,其中,样品颗粒细度>100目与CTAB缓冲液温育时间>8 h(过夜)处理的样品DNA提取效果与荧光PCR检测结果均最佳.采用最佳前处理组合,样品的主要转基因成分(Ca MV 35S、NOS、Cry1Ab)检出限从通常的转基因含量质量分数0.01%降到0.001%,使得水稻种子转基因成分荧光PCR检测灵敏度提高10倍,大幅度提高了检测结果的准确性. 王志纯 张冰 邵碧英 江树勋 缪婷玉 彭娟 陈文炳关键词:水稻种子 转基因成分 实时荧光PCR 基于DNA条形码的鳗鱼物种鉴别方法 本发明涉及一种基于DNA条形码的鳗鱼物种鉴别方法,更具体涉及一种基于DNA条形码的日本鳗、美洲鳗和欧洲鳗的物种鉴别方法。该方法通过鳗鱼DNA提取,然后利用DNA条形码引物进行PCR扩增,扩增出244?bp的产物,所述DN... 陈文炳 邵碧英 缪婷玉 彭娟文献传递 限制性内切酶酶切确证河豚鱼成分PCR检测结果 被引量:6 2014年 动植物成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测往往出现假阳性结果,为了有效排除河豚鱼成分检测中出现的假阳性现象,提高检测结果的准确性,应用河豚鱼PCR检测引物进行河豚鱼成分的PCR检测与限制性内切酶NmeAⅢ酶切确证实验。18个供试样品中3个样品无PCR扩增产物,判为阴性结果,15个样品初步判为疑似阳性。应用限制性内切酶NmeAⅢ对疑似阳性样品的PCR产物进行酶切与电泳分析,电泳图谱与河豚鱼阳性对照不同的2个样品,判定为假阳性结果,电泳图谱与阳性对照相同的4个未知学名的河豚鱼加工样品,确证为阳性结果,即检出河豚鱼成分,PCR产物序列经GenBank同源性序列查询比对(BLAST)予以验证,建立了简便的河豚鱼成分PCR检测结果确证方法。 曲良苗 陈文炳 缪婷玉 邵碧英 彭娟 江树勋关键词:河豚鱼 PCR检测 限制性内切酶 DNA测序 河豚毒素DNA适配子核心区域的识别 被引量:2 2017年 用DNA folding form在线软件分析河豚毒素DNA适配子A3、G10的二级结构,根据二级结构,分别合成适配子A3、G10的各4个区域的5’端地高辛标记的序列。用丙烯酸-环氧乙烷珠子固定河豚毒素,测定抗地高辛碱性磷酸酶的适宜稀释倍数,用地高辛-抗地高辛碱性磷酸酶系统检测各区域与河豚毒素的亲和力,识别出适配子的核心区域。结果表明,抗地高辛碱性磷酸酶的适宜工作浓度为2×104倍稀释;合成的适配子A3的4个区域中,A3-2区域与河豚毒素的亲和力最强,即适配子A3的核心区域为A3-2区域,实际上含有47个核苷酸;合成的适配子G10的4个区域中,G10-4区域与河豚毒素的亲和力最强,即适配子G10的核心区域为G10-4区域,实际上含有56个核苷酸。 邵碧英 陈文炳 刘正才 缪婷玉 彭娟 杨方关键词:河豚毒素 适配子 转基因玉米GA21品系的LAMP检测引物及方法 本发明提供了一种转基因玉米GA21品系的LAMP检测引物及方法。所述LAMP检测引物如SEQ ID NO:1-6,利用所述的LAMP检测引物,以<I>Bst</I>DNA聚合酶大片段启动环介导等温扩增,通过观察浊度,或加... 邵碧英 陈文炳 曾莹 缪婷玉 彭娟文献传递 沙门氏菌核酸检测试剂盒的评价 被引量:2 2015年 采用室内技术参数验证和协同实验的方式对商品化沙门氏菌核酸检测试剂盒在食品中沙门氏菌核酸检测上的包容性、排他性、灵敏度、特异性、准确度、检测限、耐变性、批间变异进行评价。评价结果表明,试剂盒检测结果与国家标准方法检测结果总体上无显著差异,能满足食品样品的检测要求;但对蔬菜制品的灵敏度较其他食品低,与国家标准方法有显著差异,因此该商品化试剂盒不适用于蔬菜制品中沙门氏菌核酸的检测。 邵碧英 董建 陈彬 陈文炳 黄晓蓉 郑晶 缪婷玉 彭娟关键词:沙门氏菌 环介导等温扩增 样品前处理对大米及米制品转基因成分荧光PCR检测结果的影响 被引量:1 2013年 [目的]通过分析样品前处理对大米及米制品转基因成分荧光PCR检测结果(Ct值)准确性的影响,建立优化的前处理方法。[方法]样品DNA提取采用CTAB法,设置3种样品颗粒细度与3种样品DNA提取温育时间的组合共9种处理,应用双因素方差分析的F检验分析处理间Ct值的差异显著性,根据t检验结果,筛选出DNA提取与荧光PCR检测效果最佳的前处理样品细度与CTAB温浴时间组合。[结果]F检验结果:在9种处理组合中,处理组合之间的大米及米制品DNA提取浓度都存在极显著差异;不同处理对大米内源基因GOS与外源CaMV 35S基因的Ct值影响极显著;对于米制品白粿干与米粉干,CTAB温浴时间对内源基因GOS与CaMV35S基因Ct值的影响达到显著或极显著水准,而样品颗粒大小仅对白粿干的CaMV 35S基因Ct值有显著影响,对米粉干的GOS与CaMV 35S基因及白粿干GOS的Ct值的影响都不显著。t检验结果表明最佳处理组合为:大米颗粒细度>100目,CTAB缓冲液温浴时间>8h;白粿干样品颗粒细度>50目,CTAB缓冲液浸泡温浴时间≥4h;米粉干颗粒细度>50目,CTAB缓冲液浸泡温浴时间>8h。 陈文炳 张冰 王志纯 邵碧英 缪婷玉 彭娟 江树勋关键词:样品前处理 转基因成分 荧光PCR检测 转基因玉米GA21品系LAMP检测引物的筛选及方法的建立 被引量:7 2014年 根据转基因玉米GA21品系的特异序列设计了3套环介导等温扩增(LAMP)引物。通过反应温度优化、特异性测定,筛选到1套特异性好的LAMP引物,包括内引物、外引物和环引物各1对。在LAMP反应体系中加入SYBR Green I荧光染料,在实时荧光定量PCR仪上进行实时监测,对筛选到的LAMP引物进行反应条件、反应体系的优化,建立了转基因玉米GA21品系LAMP检测方法。对该方法的特异性、灵敏度、稳定性进行评价,结果表明建立的LAMP检测方法能特异、灵敏、稳定地检测转基因玉米GA21品系,检测限达到0.05%。将建立的LAMP检测方法应用于玉米及其制品中GA21品系的检测,检测结果与实时荧光PCR法的结果完全一致。 邵碧英 陈文炳 曾莹 陈彬 郑晶 缪婷玉 彭娟关键词:环介导等温扩增 特异性检测