徐扬
- 作品数:3 被引量:19H指数:2
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- 硅化超顺磁氧化铁纳米颗粒标记人羊膜间充质细胞的效率及其对细胞增殖的影响被引量:4
- 2010年
- 旨在探讨一种新型硅化超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记人羊膜间充质细胞的最佳方法,并检测其对细胞增殖的影响.用不同浓度的Si-SPIO和多聚赖氨酸混合制备PLL-Si-SPIO复合物,标记体外培养的hAMCs.利用普鲁士蓝染色和透射电子显微镜等方法对Si-SPIO的标记情况进行分析鉴定.分析Si-SPIO标记后1~4周铁颗粒在细胞内的维持与稳定.应用MTS分析法探讨经Si-SPIO标记后hAMCs的增殖活性.Si-SPIO标记后的hAMCs移植到小鼠纹状体内1周,鉴定Si-SPIO阳性细胞的存活与分布.观察发现,hAMCs经Si-SPIO标记后细胞内可检测到大量铁颗粒,铁颗粒能在细胞内维持4周以上.Si-SPIO标记具有浓度依赖性,最适浓度为20μg/mL;较低浓度的Si-SPIO对细胞增殖活力没有显著影响.移植到小鼠脑内1周后可见Si-SPIO阳性细胞.结果可知,浓度为20μg/mL的Si-SPIO标记hAMCs可获得良好的标记效果,并且不影响细胞的增殖活力.
- 张可华郭丽丽蔡哲潘琳程立明舒峻李荣旗陈瀛欧华黄小杰张向利张红霞刘佳新左和鸣徐扬高艳崔晓惠
- 关键词:细胞标记
- 人羊膜间充质细胞向成骨细胞诱导分化的实验研究
- 2011年
- 目的 观察人羊膜间充质细胞(humanamnionmesenchymalcells,hAMCs)体外诱导向成骨细胞分化,为骨组织工程提供种子细胞。方法从剖宫产后废弃的人羊膜组织分离培养hAMCs,经成骨细胞诱导条件培养基诱导后,对细胞形态特征、碱性磷酸酶、骨桥素、骨钙素表达以及I型胶原分泌进行观察和检测。结果原代培养的hAMCs形态呈长梭形或不规则形,呈均匀分布生长,传代后细胞体积略变大,约5~7d传代1次。经成骨细胞诱导培养15d后,hAMCs碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥素的表达呈阳性,并且检测有I型胶原分泌。结论hAMCs易于体外分离培养及扩增,体外成骨细胞定向诱导的hAMCs具有典型的成骨细胞的形态和功能性特征,是良好的骨组织工程种子细胞。
- 舒峻郭丽丽张可华蔡哲程立明李荣旗陈瀛潘琳欧华黄小杰张向利徐扬高艳崔晓惠张红霞刘佳新
- 关键词:成骨细胞
- CCK-8和MTS法检测人羊膜上皮细胞增殖的比较被引量:15
- 2012年
- 目的探讨CCK-8、MTS两种不同的四唑盐试剂在羊膜上皮细胞增殖检测中的最适实验条件,并比较两者细胞毒性。方法取体外培养对数生长期羊膜上皮细胞,用完全培养基(DMEM/F12+10%胎牛血清)配制成不同浓度的细胞悬液加入96孔板中培养24 h,分别加入CCK-8、MTS后于450 nm、492 nm波长处测定光密度(OD)。在同一细胞浓度下,根据同一波长不同时间检测的OD确定CCK-8的最佳孵育时间。取体外培养的对数生长期羊膜上皮细胞分别用DMSO、CCK-8、MTS处理1 h、2 h、3 h和4 h后,继续培养24 h,在450 nm处以CCK-8检测细胞增殖,并通过台盼蓝染色计数活细胞数。结果 CCK-8法的最佳波长为450 nm,MTS法的最佳波长为492 nm。CCK-8法灵敏度稍低于MTS法。1~4 h内,CCK-8试剂与待检测细胞最佳孵育时间为4 h。CCK-8法对细胞增殖影响及细胞毒性均小于MTS法。结论 CCK-8法是一种更为方便、细胞毒性作用较小的试剂。
- 刘艳秋张可华王运良舒峻来薛吴立群曹善霞李鸿徐扬高艳崔晓惠左和鸣蔡哲
- 关键词:MTSCCK-8羊膜上皮细胞细胞增殖细胞毒性