徐焕洲
- 作品数：3 被引量：23H指数：2
- 供职机构：潍坊医学院基础医学院形态学实验室更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用DPO引物技术同时检测5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法被引量：20
- 2012年
- 目的应用双启动寡核苷酸引物(Dual Priming Oligonucleotide,DPO)技术建立同时检测日本脑炎病毒(JapaneseEncephalitisVirus,JEV)、黄热病毒(YellowFeverVirus,YFV)、西尼罗病毒(WestNileVirus,WNV)、圣路易斯脑炎病毒(St.Louis encephalitis virus,SLEV)和登革病毒(Dengue virus,DV)5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法。方法利用Primer Premier5.0软件设计5种病毒的特异性DPO引物,对引物浓度、Mg2+浓度和退火温度进行优化,测定多重RT-PCR反应的特异性和敏感性。结果应用DPO引物技术建立的多重RT-PCR方法可特异性扩增JEV、YFV、WNV、SLEV和DV的142 bp、293 bp、377 bp、630 bp和521 bp基因片段,灵敏度分别为5 000 PFU/ml、4 500 PFU/ml、2.3×105copies/μl、2.6×104copies/μl和1.37×104copies/μl,蚊虫模拟添加实验未发生非特异反应。结论应用DPO引物技术建立的针对5种蚊媒病毒的多重RT-PCR检测方法有良好的敏感性和特异性,可以同时对JEV、YFV、WNV、SLEV和DV进行检测。
- 徐焕洲平芮巾季汝武王琳杨鹏飞张丽萍岳启安胡孔新
- 关键词：多重RT-PCR日本脑炎病毒黄热病毒西尼罗病毒
- 老年肺感染患者痰液中类香菌新种的分离与鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的对分离自呼吸道感染患者痰液的1株革兰阴性杆状细菌进行鉴定,探讨其种系发生及分类学特征。方法分别从形态、生理、生化特性等表型性状对分离菌做出初步鉴定,并通过细菌16SrRNA基因测序及序列比对明确其种系来源。结果分离菌株为革兰阴性小杆菌,生化反应极不活泼,对多数常用抗生素和化学疗剂不敏感;Blast序列比对显示该分离菌和海洋类香菌的相似度为96.2%。结论根据表型性状和种系分析发生结果证实该菌株为类香菌属的一个新菌种。
- 管福来严书林苏芬尤敏赵乃昕徐焕洲岳启安
- 关键词：呼吸道分泌物
- 普马拉病毒实时荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：1
- 2013年
- 目的建立一种适应国境口岸地区特定鼠种中普马拉病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法。方法利用Beacon Designer7.0软件设计引物和探针,以人工合成普马拉病毒S基因的片段作为模板,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并验证该方法的灵敏度及特异性。结果模板的Ct值与模板稀释浓度的对数存在良好的线性关系,标准曲线y=-3.122x+38.605,R2=0.995,PCR扩增效率为109.1%,其最低检出限为31.6copies/μl。结论建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,适合于普马拉病毒的快速检测。
- 杨鹏飞燕清丽张丽萍徐焕洲王玉春甄维胡孔新
- 关键词：普马拉病毒实时荧光RT-PCR
