朱闻斐
- 作品数:30 被引量:263H指数:9
- 供职机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家自然科学基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 流感病毒A/PR/8/34重配母本株高免疫原性HA蛋白制备及鉴定
- 2016年
- 制备流感病毒经典重配过程中所需的A/PR/8/34母本株血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)抗血清。A/PR/8/34流感病毒灭活纯化后经菠萝蛋白酶消化。5%~20%蔗糖连续密度梯度离心法纯化HA蛋白。单向免疫扩散法(Single Radial Immunodiffusion,SRID)筛选目的蛋白。SDS-PAGE法鉴定目的蛋白。纯化的A/PR/8/34 HA蛋白免疫兔子制备抗血清,血凝抑制试验(Hemoglutination Inhibition Assay,HI)测定HA抗血清效价,经SRID法鉴定HA抗血清纯度。成功制备了高免疫原性A/PR/8/34HA蛋白;兔抗血清HI滴度可达10240,SRID法鉴定为高纯度HA抗血清。制备了流感病毒经典重配中关键试剂,摸索成功整套技术方法,为我国自主研发季节性流感疫苗株奠定了基础。
- 唐静辛丽郭俊峰朱闻斐张贺源郎绍辉王大燕舒跃龙
- 关键词:流感病毒HA蛋白
- 乙型流感病毒致病力相关分子标记研究进展被引量:12
- 2020年
- 乙型流感对人类公共卫生安全的威胁非常严重,全球每年流感相关疾病负担的三分之一由乙型流感导致。了解乙型流感病毒致病力相关关键分子标记,有助于更高效、准确地评估乙型流感病毒致病力,预测病毒的流行潜能。本文对乙型流感病毒致病力相关分子标记的研究进展进行综述,旨在为乙型流感病毒的监测、防控及新型疫苗与抗病毒药物的研发提供理论依据。
- 周丽娟朱闻斐舒跃龙
- 关键词:乙型流感病毒致病力分子标记
- 中国职业暴露人群感染H9N2禽流感病毒血清学调查被引量:22
- 2015年
- 目的评估我国职业暴露人群感染H9N2禽流感病毒的风险因素。方法利用2009 2011年间在我国22个省(直辖市、自治区)采集的职业暴露人群血清13 715份,筛选了在我国主要流行的G9系毒株A/Chicken/AK4/Anhui/2011作为检测抗原,使用血凝抑制方法初筛和微量中和方法复核两种血清抗体检测方法,在我国大陆地区开展系统的H9N2禽流感病毒血清学研究。结果 H9N2禽流感病毒在中国职业暴露人群的中和抗体血清阳性率为0.41%(63份阳性血清标本)。所有家禽职业暴露人群均有阳性血清标本检出,活禽市场暴露人群感染H9N2禽流感病毒风险显著高于其他职业暴露人群。结论活禽市场是人感染禽流感病毒的重要暴露风险因素。加强H9N2禽流感病毒在我国职业暴露人群的监测,对于有效评估和防控禽流感对人类的危害具有重要的意义。
- 辛丽白天周剑芳唐静陈永坤陈涛史景红李晓丹李燕朱闻斐高荣保王大燕舒跃龙
- 关键词:禽流感H9N2职业暴露人群血清学调查
- H7亚型禽流感病毒概述被引量:67
- 2013年
- 自2002年以来,全球报道的人感染H7亚型禽流感病毒病例超过100人,波及荷兰、意大利、加拿大、美国以及英国等国家。人感染H7亚型禽流感病毒的临床表现由结膜炎至轻微的上呼吸道疾病,甚至是肺炎。2013年3月31日,中国报道了上海市和安徽省两地共3例H7N9亚型禽流感病毒(AIVs)感染死亡病例。由于从家禽中分离到的H7亚型流感病毒不断增加,而且H7亚型AIVs感染人所导致的严重的临床症状,因此该亚型流感病毒对人类健康造成严重威胁,所以我们必须提高对H7亚型AIVs的认识,并要加强人群和动物中流感病毒的持续监测以及疫苗和药物的研究,以应对可能由于H7亚型AIVs引起的流感大流行。
- 朱闻斐高荣保王大燕杨磊朱云舒跃龙
- 关键词:H7亚型禽流感病毒
- 神经氨酸酶E119D、R152K突变对人感染高致病性H7N9禽流感病毒药物敏感性的影响被引量:2
- 2020年
- 2016年底出现的高致病性禽流感(Highly pathogenic avian influenza,HPAI)H7N9病毒是H7N9禽流感病毒的变异体,HPAI H7N9病毒中耐药株比例较高且其在哺乳动物细胞中适应性强。为进一步研究HPAI H7N9病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)耐药位点,本研究以HPAI H7N9病毒A/Guangdong/17SF006/2017株为骨架,利用反向遗传学技术分别制备NA E119D、NA R152K突变HPAI H7N9重配病毒,并分别命名为rg006-NA119D和rg006-NA152K。NA抑制试验结果显示,奥司他韦对rg006-NA119D(平均IC50(nM)±SD,7.87±0.20;升高5.50倍)和rg006-NA152K(平均IC50(nM)±SD,1.57±0.01;升高1.10倍)正常抑制。扎那米韦对rg006-NA152K(平均IC50(nM)±SD,10.54±0.15;升高6.13倍)正常抑制,但对rg006-NA119D抑制程度高度降低(平均IC50(nM)±SD,1068±3.00;升高620.93倍)。rg006-NA119D和rg006-NA152K病毒在MDCK细胞中均复制良好,其前期(18h、24h)复制水平与其对应的敏感株相当。在扎那米韦存在的条件下,HPAI H7N9敏感株基本不能复制,rg006-NA119D和rg006-NA152K病毒复制水平有所下降,但rg006-NA119D在后期(48h、72 h)复制水平较高,表明rg006-NA119D对扎那米韦耐药。本研究结果对于HPAI H7N9等人感染禽流感病毒的临床用药、风险评估具有一定的参考价值。
- 唐静张曙霞张靖邹淑梅辛丽朱闻斐李希妍黄维娟王大燕
- 关键词:反向遗传学
- 新型H7N9禽流感病毒的病原学研究进展被引量:31
- 2015年
- 2013年初在中国长三角地区首次发现一种新的H7N9禽流感病毒可导致人的感染和死亡。该病毒是由H7、N9以及H9N2禽流感病毒重配而成,病毒传播到其他地区之后仍与当地的H9N2病毒不断重配,产生不同的基因型。H7N9禽流感病毒特殊的双受体结合特性是其突破种属屏障感染人的重要机制,也是该病毒比H5N1禽流感病毒更容易感染人的原因,这种受体特性的分子基础主要与病毒HA蛋白的Q226L和G186V突变有关。H7N9病毒对禽类不致病,但人感染后的病死率超过30%。人群没有免疫力、病毒感染所导致的免疫病理以及病毒在肺部组织的高效复制是导致人感染H7N9病毒后高病死率的重要原因。雪貂动物模型研究也表明该病毒能够在雪貂中有效复制和接触传播。因此,H7N9禽流感病毒导致流感大流行的风险不容忽视,对动物和人群中H7N9禽流感病毒的监测不容松懈。
- 朱闻斐舒跃龙
- 关键词:致病力传播力
- 猪流感病毒概述被引量:23
- 2013年
- 猪流感(Swine influenza,SI)是由甲型流感病毒引起的猪急性呼吸道传染病,不仅给养猪业带来了极大的危害,还严重危害人类健康,因此引起全球公共卫生的关注。猪对哺乳动物流感病毒和禽流感病毒都易感,被认为是二者之间进行基因重配和跨种传播的重要中间宿主,也是产生引起人类流感大流行毒株的重要来源。目前全球猪群中流行的流感病毒以H1N1、H3N2以及H1N2亚型为主,但各地流行的猪流感病毒(Swine influenza viruses,SIVs)谱系或基因节段的来源均有差异。北美地区近期暴发的猪流感三源重配H3N2/H1N2亚型变异株感染人的事件再次提醒我们要密切关注SIV对公共卫生的威胁。因此,监测和研究甲型流感病毒在全球猪群中的流行动态对于大流行应对是非常重要的。
- 杨帅朱闻斐舒跃龙
- 关键词:猪流感病毒进化
- 利用CRISPR/Cas9基因敲除技术研究Importin-α7对流感病毒生长特性的影响被引量:1
- 2017年
- 流感病毒的跨种传播是一个包含病毒和宿主因子之间大量相互作用的复杂过程。除了转换细胞表面受体结合特异性,禽流感病毒还要克服核膜形成的另一个重要屏障–核输入机制来进入细胞核进行有效转录和复制。本文主要研究人源importin-α7对不同来源、不同亚型流感病毒生长的影响。根据CRISPR/Cas9靶点设计原则分别在人importin-α7功能域第5和第6个外显子设计一对小向导RNA(sgRNAs)并克隆入pX459载体,重组质粒共转染A549细胞,构建A549-importin-α7-KO细胞系;再分别用不同来源(人源、猪源和禽源)、不同亚型的甲型流感病毒与乙型流感病毒感染A549-importin-α7-KO细胞和野生型A549细胞,研究importin-α7对流感病毒生长特性的影响。经测序和Western blotting验证,成功构建A549-importin-α7-KO细胞系;激光共聚焦观察结果显示,importin-α7敲除后vRNPs入核减少;同时Importin-α7敲除后流感病毒的生长均受到抑制,其中importin-α7对人流感病毒A/California/04/2009(H1N1)和B/Brisbane/60/2008、禽流感病毒A/Quail/Hong Kong/G1/1997(H9N2)、猪流感病毒A/Hunan/42443/2015(H1N1)和A/Jiangsu/1/2011(H1N1)的生长影响显著,而人流感病毒A/Hong Kong/4801/2014(H3N2)和禽流感病毒A/Guangzhou/333/99(H9N2)在两种细胞中的生长差异不明显。不同流感病毒结合importin-α的特异性不同,提示流感病毒可能已经进化出不同机制来利用importin-α亚型进行核输入,这对于流感病毒的宿主适应性和致病力研究具有重要意义。
- 刘素丽朱闻斐舒跃龙
- 关键词:流感病毒致病力
- 欧亚类禽猪流感病毒病原学研究进展被引量:6
- 2022年
- 欧亚类禽猪流感病毒被认为是引起下次流感大流行可能性最大的动物流感病毒之一。1979年,第一次在猪群中分离到欧亚类禽猪流感病毒,该病毒随后在欧洲流行。欧亚类禽猪流感病毒从2005年起在我国猪群中广泛存在,偶尔可突破种属屏障感染人;在江苏、河北和湖南等地区已出现人感染欧亚类禽猪流感病毒,由此对公共卫生和生猪养殖业均有一定的威胁和影响。本文综述了欧亚类禽猪流感病毒的流行情况、病原学特征及其相关致病分子机制研究进展,旨在为欧亚类禽猪流感病毒的风险评估提供科学依据。
- 冯兆民朱闻斐舒跃龙
- 关键词:病原学致病机制
- 新甲型H1N1流感病毒小鼠致死模型的建立被引量:2
- 2011年
- 建立新甲型H1N1流感病毒小鼠致死模型,为研究致病性、宿主适应性以及疫苗保护性提供动物模型,并寻找病毒在适应宿主过程中影响毒力和适应性的关键位点。将新甲型H1N1流感病毒A/四川/SWL1/2009 H1N1在小鼠中连续传15代,各代次毒株均在MDCK细胞上增殖后进行测序,根据序列分析结果选择6个传代毒株感染小鼠,连续监测14 d体重和死亡情况;并对第14代和15代病毒在噬斑实验纯化后克隆和测序分析。原代病毒不致死BABL/C小鼠,经动物体内连续传代适应宿主动物后,其毒力增强,具体表现为所选的6个传代毒株中第7、11、15代毒株可以100%致死试验小鼠;分析这6个传代毒株的全基因组表明这些毒株的部分氨基酸位点发生突变。新甲型H1N1流感病毒经小鼠体内连续传代后,建立了小鼠致死模型,病毒毒力增强可能与某些氨基酸位点的改变有关。
- 朱云刘丽琦周剑芳朱闻斐秦堃于在江王大燕赵翔李希妍蓝雨舒跃龙
- 关键词:全基因组分析