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一种新的海洋微藻病毒丝氨酸蛋白酶基因的克隆表达及其活性分析被引量：1: 2014年; 从海洋球石藻 Emiliania huxleyi 病毒 EhV99B1的基因组中克隆了丝氨酸蛋白酶（Sp）基因（GenBank 登录号：KC161207），对该基因的开放阅读框（ORF）进行系统的生物信息学分析，并在大肠杆菌中融合表达，通过亲和层析法获得了纯化的重组 Sp。结果表明：EhV99B1-Sp 基因的 ORF 为1110 bp，编码368个氨基酸，蛋白相对分子质量为39．5 kDa；该基因片段与 GenBank 中 EhV86-Sp 的同源性很高，核苷酸及其对应的氨基酸序列同源性分别为95％和97％，而与其他物种 Sp 序列的同源性仅为28％～32％，说明其可能是丝氨酸蛋白酶家族中的一个新成员；预测的二级结构特征显示EhV99B1-Sp 的蛋白结构域中具有典型的 LTAGHC （组氨酸活性位点区域）和 AICNGDSGGPLF（丝氨酸活性位点区域）两个丝氨酸蛋白酶催化活性位点的氨基酸基序，是一个两次跨膜蛋白；将该基因在大肠杆菌中进行低温诱导表达，得到分子量为60 kDa 的重组蛋白，经鲤鱼肌肉丝氨酸蛋白酶（MB-SP）抗体检测证实为 Sp，且重组蛋白在大肠杆菌细胞中具有明显的生物学活性。本研究结果为进一步探讨 EhV99B1-Sp 在病毒与宿主相互作用过程中的调节作用及其功能与应用奠定基础。; 李丽华邱健健蔡艺钦于鹏刘静雯; 关键词：丝氨酸蛋白酶基因克隆活性分析

植物乳杆菌的发酵优化及对斜带石斑鱼益生作用的研究: 李丽华

赫氏颗石藻的培养方法及应用: 本发明公开了一种培养赫氏颗石藻的培养基组合物，包括以下组分：海水+不含Si的f/2培养基+11μM？NaFeEDTA+5mM？Serine+3mM？NaHCO<Sub>3</Sub>+1％-2.5％的赫氏颗石藻病毒裂解液...; 刘静雯李丽华

赫氏颗石藻的培养方法及应用: 本发明公开了一种培养赫氏颗石藻的培养基组合物，包括以下组分：海水+不含Si的f/2培养基+11μM NaFeEDTA+5mM Serine+3mM NaHCO<Sub>3</Sub>+1％‑2.5％的赫氏颗石藻病毒裂解液...; 刘静雯李丽华; 文献传递

培养条件对赫氏颗石藻(Emiliania huxleyi)生长及神经酰胺积累的影响: 神经酰胺(ceramide)作为鞘脂类代谢的重要中间产物，参与细胞分化、增殖、信号转导、免疫、凋亡及衰老等重要生命活动，在食品、医药和化工（特别是高档护肤品）等领域有广泛的应用前景。作为信号分子的神经酰胺，在细胞中含量通...; 李丽华; 关键词：营养方式; 文献传递

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李丽华

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