李亮
- 作品数：28 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 包载达沙替尼的仿生外泌体治疗肺癌的研究
- 2025年
- 目的制备包载达沙替尼的仿生外泌体,并对其进行表征和抗肺癌活性考察。方法利用人肺癌H460细胞外泌体与载药脂质体的各自特点,通过膜融合后自组装,制备包载达沙替尼的仿生外泌体。采用动态光散射法测定其粒径与zeta电位。通过蛋白免疫印迹和荧光共振能量转移(FRET)法验证外泌体-脂质体融合效果。利用荧光探针成像技术定量分析肿瘤细胞对仿生外泌体的摄取能力。MTS法检测体外细胞杀伤活性,并通过皮下荷瘤小鼠模型的活体荧光成像和药效学实验评价其体内肿瘤靶向性、抑瘤效果及安全性。结果达沙替尼仿生外泌体的粒径为(111.3±0.1)nm,电位(-30.1±0.3)mV。蛋白免疫印迹实验证实了仿生外泌体上外泌体特异性标志蛋白CD9、CD81、OXER1的表达。荧光共振能量转移法检测到外泌体与脂质体的膜融合指数为2.171±0.044,提示外泌体与载药脂质体的融合较高。荧光成像显示,同源肺癌细胞对仿生外泌体的摄取显著高于脂质体(P<0.05),而异源胰腺癌细胞对两者的摄取无差异。与游离达沙替尼及脂质体制剂相比,仿生外泌体的体外细胞毒性显著增强。体内动物模型评价结果显示其在荷瘤小鼠体内的肿瘤组织中更易富集,具有较好的归巢能力,显著的体内抑瘤作用(抑瘤率达75.0%),且给药期间未观察到小鼠体重的显著下降。结论达沙替尼仿生外泌体纳米制剂具有显著的抗肺癌活性和良好的安全性,为后续非小细胞肺癌的治疗提供了科学依据和前期基础。
- 史雨宸张立山刘晓红张丽袁陈雨赵业霖罗廖欣秦烨何钟姚红娟李亮
- 关键词：达沙替尼脂质体
- 治疗结肠癌等消化道肿瘤的抗IV型胶原酶单抗3D6与力达霉素的免疫偶联物
- 本发明涉及的抗IV型胶原酶单抗3D6,以2－亚胺基四氢噻吩(2－IT)和N－羟基琥珀酰亚胺基－间－(N－马来酰亚胺基)苯甲酸酯(MBS)或其它交联剂分子作为中介体,与力达霉素(LDM)偶联,获得了单抗3D6－LDM的偶联...
- 甄永苏王风强李亮刘秀均尚伯杨
- ARHGAP9基因用于视网膜母细胞瘤预后及耐药性诊断的用途
- 本发明涉及肿瘤学领域。具体而言，本发明涉及预测视网膜母细胞瘤的预后及耐药性的生物标志物，以及使用所述生物标志物预测视网膜母细胞瘤的预后和耐药性的方法。
- 李亮宋文凭赵军阳张诚玥邵荣光姚红娟周晓菲李睿张燕
- 力达霉素与单克隆抗体及其Fab'片段的偶联物以及在结肠癌等肿瘤靶向治疗中的应用
- 本发明涉及力达霉素与单克隆抗体及其Fab′片段的偶联物以及在结肠癌等肿瘤靶向治疗中的应用，抗IV型胶原酶单抗3G11及其Fab′片段，以2-亚胺基四氢噻吩(2-IT)和N-羟基琥珀酰亚胺基-间-(N-马来酰亚胺基)苯甲酸...
- 甄永苏王风强李亮刘秀均尚伯杨戴垚
- 双靶向配体化力达霉素在大鼠体内药动学及组织分布和排泄
- 2019年
- 目的研究双靶向配体化力达霉素(DTLL)在大鼠体内的药动学特征及组织分布和排泄。方法单次iv给予Wistar大鼠[125I]DTLL,给药剂量为2625 kBq·0.05 mg-1·kg-1。分别收集0~6 h内组织样本、0~24 h内血清样本以及0~168 h内尿液、粪便和胆汁样本,用液体闪烁仪分别检测样品放射性浓度,用WinNonlin软件和非房室模型统计矩法计算药动学参数,并分析[125I]DTLL在体内的分布和排泄。结果DTLL原型药物的曲线下面积(AUC0-∞)为(184±33)h·μg·L-1,半衰期(t1/2)为(3.98±0.75)h,清除率(Cl)为(278±41)mL·h-1·kg-1。[125I]DTLL iv给予大鼠后,广泛分布于全身各组织中,在主要脏器中均未发现蓄积现象;给药后0~168 h,粪便和尿液累积排泄分数分别为(10.4±6.6)%和(82.5±2.6)%,经粪尿总排泄量可达给药剂量的(92.9±7.4)%。结论DTLL iv给予健康Wistar大鼠后可迅速分布于全身,可能不能通过血脑屏障,DTLL主要通过粪尿途径排泄。
- 叶程曹睿宋文凭张玉民樊慧蓉刘鉴峰李亮邵荣光
- 关键词：同位素药动学
- 具有抑制血管生成及抗肿瘤作用的强化融合蛋白Fv－LDP－AE
- 本发明涉及一种具有抗肿瘤作用的强化融合蛋白Fv－LDP－AE，主要通过融合蛋白的基因工程构建和分子强化两条技术路线制备而成，融合蛋白Fv－LDP的基因全长1119bp，编码372个氨基酸，分子量为38.7kDa，它对肿瘤...
- 李亮甄永苏苗庆芳尚伯杨刘秀均江敏
- 抗明胶酶单链抗体联合Endostar显示协同抗肿瘤作用
- 高瑞娟李亮尚伯杨赵春燕盛唯瑾李电东甄永苏
- 抗明胶酶单链抗体联合Endostar显示协同抗肿瘤作用
- <正>目的探讨新型抗明胶酶单链抗体与力达霉素辅基蛋白融合蛋白Fv-LDP联合血管生成抑制剂Endostar的抗肿瘤作用。方法采用基因工程方法构建并表达抗明胶酶单链抗体融合蛋白Fv-LDP,通过固定化金属螯合层析和透析复性...
- 高瑞娟李亮尚伯杨赵春燕盛唯瑾李电东甄永苏
- 关键词：明胶酶单链抗体抗肿瘤作用ENDOSTAR
- 双靶向配体化力达霉素DTLL的制备优化和稳定性研究被引量：2
- 2018年
- 目的通过对具有高效抗肿瘤活性的类抗体偶联药物—--双靶向配体化力达霉素(DTLL)制备过程的优化,获得纯度高和活性强的DTLL产品;探讨影响DTLL稳定性的主要因素,为临床申报和工业化生产提供依据。方法分别对DTLL前体(DTLP)蛋白表达载体、宿主菌株、表达温度、诱导剂终浓度、菌体密度和诱导时间进行优化。以高压破碎法提取可溶性目的蛋白,采用Ni+亲和与分子筛层析两步纯化,得到高纯度DTLP,再与力达霉素发色团组装获得DTLL。采用HPLC、MTS、ELISA法进行稳定性试验,分别监测DTLL冻干样品的蛋白纯度、发色团含量、细胞毒和亲和力活性的变化。结果经过发酵提取工艺优化,每升发酵液所得DTLP蛋白约为22 mg,是优化前每升9 mg的2.4倍,其蛋白纯度达到99.7%;DTLL组装效率达到68%;稳定性试验结果显示,DTLL冻干样品对光照敏感,在–80℃低温避光环境下可稳定保存。结论成功优化了双靶向配体化力达霉素DTLL的制备工艺,提升了产品纯度和产率,为其后续生产和临床申报提供了实验基础,也为其他抗体偶联药物的制备提供了较成熟完善的技术平台。
- 叶程曹睿宋文凭李良李毅赵春燕李亮邵荣光
- 关键词：重组融合蛋白质类蛋白质稳定性
- 具有抑制血管生成及抗肿瘤作用的强化融合蛋白Fv－LDP－AE
- 本发明涉及一种具有抗肿瘤作用的强化融合蛋白Fv-LDP-AE，主要通过融合蛋白的基因工程构建和分子强化两条技术路线制备而成，融合蛋白Fv-LDP的基因全长1119bp，编码372个氨基酸，分子量为38.7kDa，它对肿瘤...
- 李亮甄永苏苗庆芳尚伯杨刘秀均江敏
