李如君
- 作品数：8 被引量：21H指数：2
- 供职机构：扬州大学第二临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛋白质氧连糖基化修饰对肿瘤坏死因子α诱导的小鼠心肌成纤维细胞增殖的影响被引量：1
- 2017年
- 目的采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导心肌成纤维细胞(CF)增殖,探讨快速提高细胞内氧连糖基化(O-GlcNAc)水平对CF功能及P65、核因子κB信号通路负向调控因子TNFAIP3蛋白表达的影响。方法胰酶联合Ⅳ型胶原酶消化成年小鼠心脏组织培养CF,差速贴壁法分离纯化原代CF,波形蛋白免疫荧光染色鉴定细胞类型。将CF分为空白对照组;TNF-α(10μg/L)组;Thiamet-G(150μmol/L)预处理+空白对照组;Thiamet-G(150μmol/L)预处理+TNF-α(10μg/L)组。活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测CF增殖,细胞划痕实验评价迁移能力,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测TNF-α靶基因血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)mRNA表达,Western blot检测磷酸化P65(p-P65)、总P65(t-P65)、TNFAIP3蛋白水平。结果原代培养的心脏细胞经波形蛋白免疫荧光染色鉴定为CF,纯度>95%。Thiamet-G预处理CF 2h即可观察到全细胞蛋白O-GlcNAc水平显著升高(3.22±0.32比1.00±0.22,P<0.05);与空白对照组相比,TNF-α处理组可激活核因子κB通路(p-P65增高:3.13±0.27比1.00±0.13,P<0.05),诱导靶基因VCAM-1、MCP-1mRNA表达(4.21±0.37比1.00±0.21,11.26±0.98比1.00±0.32,均P<0.05),明显提高CF增殖及迁移能力(1.74±0.21比0.48±0.11,P<0.05);与TNF-α处理组相比,Thiamet-G预处理后TNF-α诱导的CF增殖及迁移被抑制(1.04±0.07比1.74±0.21,P<0.05),靶基因VCAM-1、MCP-1mRNA表达减少(2.09±0.13比4.21±0.37,3.13±0.85比11.26±0.98,均P<0.05),P65蛋白总水平在12h无明显变化(1.08±0.13比1.00±0.24,P>0.05),但p-P65水平下降(1.82±0.08比3.13±0.21,P<0.05),TNFAIP3蛋白表达显著上调(5.86±0.61比2.95±0.33,P<0.05)。结论快速提高细胞内O-GlcNAc水平对TNF-α诱导的成年小鼠CF增殖和迁移具有抑制作用,其作用机制可能与上调TNFAIP3的表达有关。
- 李如君龚开政张振刚
- 关键词：心肌成纤维细胞核因子ΚB肿瘤坏死因子Α
- 去泛素化酶BRCC36功能的研究进展被引量：3
- 2014年
- 去泛素化酶是自然界中广泛存在于真核细胞内的一种生物活性酶,它与泛素化酶的作用相反,可将泛素或泛素链从底物上去除。BRCC36（BRCA1-BRCA2-containing complex subunit 36）是2003年发现的去泛素化酶家族新成员,属于JAMM（Jab1/MPN/Mov34 metalloenzyme）/MPN＋（Mpr1/Pad1 Nterminal）亚类,参于DNA损伤修复、细胞信号转导及细胞周期控制等多种细胞活动，在肿瘤发生、血管生成、抗心肌损伤过程中均发挥重要作用。
- 李如君龚开政张振刚
- 关键词：泛素化DNA损伤修复肿瘤心脏疾病
- 成年小鼠心脏成纤维细胞的分离、纯化和原代培养被引量：13
- 2017年
- 目的探讨并建立成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养方法。方法采用0.8 g/LⅣ型胶原蛋白酶和1 g/L胰蛋白酶为消化液,以多次短时间水浴振荡的方式消化成年小鼠心脏组织,差速贴壁法分离纯化心脏成纤维细胞。波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴定细胞类型及纯度;倒置相差显微镜观察细胞生长情况,绘制细胞生长曲线;CCK-8法测定细胞增殖能力、Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后细胞SMAD家族成员2/3(Smad2/3)蛋白及磷酸化水平。结果差速贴壁后在相差显微镜下可见大量球形贴壁细胞;3 d后细胞逐渐由圆形伸展为长梭形并迅速增殖,分裂象多见;5 d后细胞数量显著增多,完全汇合无空隙;细胞生长曲线近似"S"形。波形蛋白阳性率可达95%。CCK-8法显示在第3~5天细胞增殖能力最显著,给予第2代心脏成纤维细胞TGF-β1刺激显示Smad2/3蛋白磷酸化水平明显增加。结论建立了一种快速、经济、有效获取成年小鼠心脏成纤维细胞的方法。
- 李如君龚开政张振刚
- 关键词：成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养细胞鉴定
- 反式载脂蛋白A-I模拟肽R-D4F抑制小鼠颈动脉结扎后新生内膜形成
- 目的:体内、外研究显示载脂蛋白A-I模拟肽D-4F具有强烈的抗炎及抗动脉粥样硬化作用。本研究旨在研究它的反式结构R-D4F对动脉损伤后内膜增生的抑制效应。方法:42只8周龄成年雄性小鼠被随机给予安慰剂、D-4F(1 mg...
- 杜林曲新凯郑海霞李如君王军陈明星赵培张振刚龚开政
- 关键词：新生内膜形成A-I模拟肽
- smad蛋白在心血管疾病中作用的研究进展被引量：2
- 2013年
- smad（smallmotheragainstdecapentaplegic）蛋白是转化生长因子（TGF）信号通路中重要的细胞内作用底物，目前共发现8个亚型，人类smad2／4／7定位在18号染色体长臂2区1带，smad3／6定位在15号染色体长臂2区，smadl定位在4号染色体长臂3区1带，smad5定位在5号染色体长臂3区1带，smad8定位在13号染色体长臂12区。TGF是一组包含50多个成员的超家族，包括转化生长因子β（TGF—β）、骨成形蛋白（BMP）和活化素（activin）3类。业已证实TGF／smad信号通路在细胞的分化、生长、增殖、凋亡、迁移、黏附，免疫应答，以及炎症反应中均发挥着重要作用。
- 李如君龚开政张振刚
- 关键词：SMAD蛋白心血管疾病SMAD信号通路SMAD2SMAD3SMAD5
- 反式载脂蛋白A-I模拟肽R-D4F对血管损伤诱导的新生内膜形成的抑制作用
- 目的 载脂蛋白A1作为高密度脂蛋白(HDL)的主要蛋白成分,是发挥抗动脉粥样的关键成分.近年来体内、外研究显示,人工合成载脂蛋白A-I模拟肽D-4F具有良好的抗动脉粥样硬化作用.本研究旨在观察反式结构的D-4F(R-D4...
- 龚开政杜林郑海霞李如君王军陈明星赵培张振刚
- 骨形态发生蛋白2型受体基因在肺动脉高压发病机制中的研究进展被引量：2
- 2017年
- 肺动脉高压（pulmonaryarterialhypertension，PAH）是一种罕见的以肺末梢小动脉进行性重构、肺动脉内压力异常升高为特征的临床疾病。
- 李如君龚开政张振刚
- 关键词：肺动脉高压骨形态发生蛋白发病机制受体基因临床疾病
- 增加细胞内O-GlcNAc修饰水平对A20生物活性的调节机制
- 陈明星李如君姚丹贺艳红朱华江杜林赵培张振刚龚开政
