李建波
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
- 供职机构：西南民族大学青藏高原研究院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家科技支撑计划四川省科技创新产业链示范工程更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 藏绵羊乳腺溶菌酶基因的克隆、原核表达及抗菌活性研究被引量：3
- 2013年
- 克隆了藏绵羊溶菌酶(LZM,EC 3.2.1.17)基因cDNA序列,构建重组质粒pET-32a-LZM,并在大肠杆菌BL21中成功表达,重组LZM有一定的抗金黄色葡萄球菌活性。系统进化树分析表明,藏绵羊乳腺LZM与山羊LZM的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果表明,藏绵羊乳腺LZM在乳腺中表达量最大。此结果对LZM的应用有一定价值。
- 李建波江明锋王永
- 关键词：藏绵羊原核表达抗菌活性
- 藏绵羊肾溶菌酶基因的克隆、表达、纯化和酶学特性研究被引量：2
- 2014年
- 实验旨在研究重组藏绵羊肾溶菌酶的酶学特性,并将其应用于畜牧生产。本实验克隆了藏绵羊肾溶菌酶基因,构建表达载体,获得重组菌株并成功表达。结果表明:纯化后的重组溶菌酶的最适反应pH为6.0,最适反应温度为45℃,比活力为2 654 U/mg,其热稳定性40℃和50℃比60℃稍好,70℃处理30 min活性即为零;抑菌实验显示重组溶菌酶对金黄色葡萄球菌有良好的抑菌效果。
- 李建波江明锋王永
- 关键词：酶学特性藏绵羊
- 藏绵羊胃溶菌酶基因的克隆、定量分析及其蛋白性质和结构的预测被引量：1
- 2013年
- 本实验旨在研究藏绵羊溶菌酶组织基因组成、分布情况和蛋白质结构。通过RT-PCR方法克隆测序得到藏绵羊溶菌酶基因核苷酸序列,并对氨基酸的组成和功能活性位点如53-谷氨酸和71-天冬氨酸等进行统计;运用生物信息学软件对藏绵羊溶菌酶的等电点、信号肽序列等性质进行分析,并构建系统进化树;运用荧光定量PCR方法对藏绵羊的瘤胃、瓣胃、皱胃、肾脏、气管和肝脏分别进行检测溶菌酶基因的部分组织分布情况及其mRNA的表达水平。结果表明:此绵羊溶菌酶基因核苷酸序列为447 bp,编码148个氨基酸残基;其mRNA的表达水平在藏绵羊的瘤胃和瓣胃相对较高,与其他4种组织比较差异显著(P<0.05);皱胃与肾脏也有显著性差异(P<0.05)。
- 朱莲莲江明锋张鹏骆美蓉李建波任洪辉王永
- 关键词：溶菌酶克隆MRNA表达藏绵羊
- 藏系绵羊复胃差异表达基因的筛选及功能分析被引量：1
- 2017年
- 为阐明藏绵羊瘤胃、网胃、瓣胃与皱胃功能差异的分子机理,试验以藏绵羊为研究对象,采用抑制消减杂交法筛选藏绵羊瘤胃、网胃、瓣胃与皱胃差异表达基因并进行生物信息学分析。结果表明:成功构建了6个藏绵羊瘤胃、网胃、瓣胃与皱胃差异表达的正反向消减c DNA文库;得到了皱胃特异表达的30个EST片段,瘤胃、网胃、瓣胃特异表达的10个EST片段。经Blast X对比发现5个EST片段与已知基因具有较高的序列相似性,且都在皱胃中特异表达。其中胃蛋白酶A、Napsin-A参与蛋白质水解;胃溶菌酶参与菌体蛋白的消化过程;胃饥饿激素调节食欲且促进相关消化酶分泌;锌指蛋白调节胃酸分泌。说明皱胃具有真正的消化功能,而瘤胃、网胃、瓣胃不能分泌消化酶。瘤胃能利用微生物将摄入的饲草发酵分解成小颗粒物质,网胃、瓣胃起筛滤作用。
- 蔡正飞王永李建波卢晓虹林赤王誉江明锋
- 关键词：藏绵羊复胃差异表达基因
- 麦洼牦牛全泌乳期乳中矿物质元素变化规律研究被引量：15
- 2014年
- 为阐明牦牛乳中矿物质元素含量在全泌乳期的变化规律，试验采集了四川省龙日种畜场麦洼牦牛产犊当天到180d（即0～180d）内共12个时间点的乳样。采用微波消解法处理乳样，用电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP—OES）测定牦牛乳中14种矿物质元素，分别为4种大量元素（钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）、磷（P））和10种微量元素（硼（B）、钡（Ba）、镉（Cd）、钴（Co）、铜（Cu）、钼（Mo）、镍（Ni）、钛（Ti）、锌（Zn）、锰（Mn）），并以牦牛产犊后30d采集的乳样数据为基准进行统计分析。结果显示，麦洼牦牛初乳中K、Ca、Mg、P4种大量元素含量较高。与30d的常乳含量相比，K的含量在0d时差异极显著（P〈0．01），在120d时差异显著（P〈0．05）；Ca的含量在5d时差异显著（P〈0．05）；Mg的含量在180d时差异显著（P〈0．05）；P的含量变化差异不显著（P〉0．05）。在0～180d泌乳期内微量元素随泌乳期的变化也较明显，与30d的常乳含量相比，Ba的含量在0和1d时差异极显著（P〈0．01），在2、3、4、5和180d时差异显著（P〈0．05）；Mo、Ni、Zn的含量在180d时差异显著（P〈0．05）；B、Cd、Cu、Ti、Mn的含量随泌乳期变化差异均不显著（P〉0．05）。综上所述，牦牛乳中K、Ca、Mg、Ba、Mo、Ni、Zn的含量随泌乳期的变化差异显著（P〈0．05），P、B、Cd、Cu、Ti、Mn的含量变化不显著（P〉0．05）；整体上看，K、Mg、P、Ba、Zn的含量变化呈先降低后增加的趋势，而Ca的含量呈现出先增加后降低的趋势。
- 刘益丽江明锋江伟华林忠荔蔡自建张林朱小翌任洪辉李建波
- 关键词：牦牛乳矿物质元素
- 藏绵羊乳腺乳铁蛋白的克隆及序列分析被引量：1
- 2013年
- 本研究以四川若尔盖县藏系绵羊为材料,利用RT-PCR方法扩增并克隆了藏绵羊乳铁蛋白(lactoferrin,LF)序列,运用生物信息学软件对其核苷酸序列和编码蛋白质的结构进行预测和分析。结果表明,克隆的LF基因全长2127 bp,共编码708个氨基酸,N端有19个氨基酸组成的信号肽,该蛋白质等电点为8.4,预测分子质量为77.2 ku;半定量RT-PCR分析结果表明,LF在乳腺、气管、淋巴、肝脏、泪腺和脾脏中都有表达,在肺脏中不表达。本试验克隆了藏绵羊LF cDNA全序列,并对LF和乳铁蛋白肽(lfcin,Lfc)核苷酸和蛋白质进行了分析,为进一步研究其生物学活性奠定基础。
- 李建波江明锋王永
- 关键词：藏绵羊乳铁蛋白基因乳铁蛋白肽
