李德卫 作品数:85 被引量:323 H指数:9 供职机构: 重庆医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 重庆市科委基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
联合转染反义PDGF寡核苷酸和tPA基因抑制血管内膜增生的实验研究 被引量:1 2005年 目的:观察血管局部联合转染血小板源性生长因子(PDGF)反义寡核苷酸(AODN)和组织型纤溶酶原激活物(tPA)基因对自体移植动脉内膜增生的影响,并探讨其可能机制。方法:选100只新西兰雄性白兔,随机分为4组(每组25只):A组(对照组)、B组(PDGF-AODN转染组)、C组(tPA基因转染组)、D组(PDGF-AODN和tPA基因联合转染组)。将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0cm)对换移植,移植血管分别用PDGF-AODN和pBudCE4.1/tPA液浸泡,血管吻合口用上述液体浸泡过的缝线吻合。每组按实验终点(术后3d、1w、2w、4w和8w)分为5个亚组,术后各实验终点取移植血管标本,用于病理学检测、电镜观察、发色底物检测tPA活性实验3、H-TdR掺入实验和免疫组织化学染色检测。结果:术后各时间点D组移植血管的内膜面积、管腔狭窄程度、3H-TdR掺入量和PDGF阳性细胞数均显著低于A组(P<0.01),而且亦明显低于B和C组(P<0.05)。扫描电镜观察显示C组和D组血管壁只见少量血小板附着,未见血栓形成,而A组和B组血管壁可见大量血小板附着,且有血栓形成。术后3d、1w、2w、4w时C组与D组的tPA基因表达产物活性明显高于A组(P<0.01)。结论:血管局部联合转染PDGF-AODN和tPA基因能有效抑制VSMC增殖,阻止内膜增生,防止移植血管狭窄。 吴忠均 时德 李德卫 郑树森关键词:寡核苷酸类 组织型纤溶酶原激活物 三氧化二砷对腺样囊性癌ACC-2细胞MDM2基因表达的影响 被引量:1 2015年 目的:研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)中ACC-2细胞增殖、凋亡的影响,并从基因和蛋白水平分析其对ACC-2细胞中MDM2基因表达的影响,从而探讨As2O3诱导ACC-2细胞凋亡的具体机制。方法:体外培养ACC-2细胞,分为实验组和对照组,向培养至指数生长期的ACC-2细胞加入不同浓度(2、4、6、8μmol/L)的含As2O3的细胞培养液作为实验组,对照组给予等量的细胞培养液,加入As2O3后分别培养不同时间。倒置显微镜下密切观察各时间点不同浓度As2O3对ACC-2细胞的生长抑制作用和细胞凋亡的形态变化,应用荧光定量RT-PCR和免疫细胞化学技术检测MDM2基因(24、48h)和蛋白(24、48、72h)的表达变化。结果:经As2O3处理后ACC-2细胞体积缩小变圆,核质固缩,悬浮凋亡细胞增多,存活细胞数量明显减少。RTPCR及免疫细胞化学结果一致显示,ACC-2细胞随着药物浓度的增加及作用时间的延长,MDM2表达明显减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),不同浓度不同时间各组两两比较差异有统计学意义(P<0.05),MDM2蛋白表达量与浓度及时间呈显著负相关性(r<-0.7,P<0.05),即呈浓度和时间依赖性。结论:As2O3对ACC-2细胞具有生长抑制和诱导凋亡的作用,且As2O3能够下调腺样囊性癌ACC-2细胞中癌基因MDM2 mRNA及蛋白的表达,可能是其诱导腺样囊性癌ACC-2细胞凋亡的机制。 王双双 姜涛 李德卫 仝晓燕 王晓川 张玉关键词:三氧化二砷 腺样囊性癌 MDM2 凋亡 加速康复外科在腹腔镜胰十二指肠切除术围手术期中的应用体会 被引量:5 2020年 加速康复外科(enhanceed recovery after surgery,ERAS)是基于循证医学证据的一系列围手术期优化处理措施的整合.由于胰腺外科的特殊性,ERAS在胰腺外科中的开展相对缓慢,本中心结合具体临床病例分享ERAS在腹腔镜胰十二指肠切除围手术期中应用的经验体会,并对其中几个热点问题进行探讨. 唐浩 蒋世铭 杨杰 李德卫 黄平 杜成友 陈勇关键词:加速康复外科 胰十二指肠切除 胰腺外科 循证医学证据 围手术期 肝移植术后胆道并发症的病因与诊治 被引量:1 2012年 自第1例肝移植手术成功以来,历经40余年发展,肝移植已成为治疗终末期肝病的有效手段。胆道并发症是肝移植术后主要的并发症,发病率约为11%~38%,术后与胆道并发症相关的病死率约为6.0%~12.5%[1-2],严重影响了肝移植患者术后的生活质量和生存率。 章光锋 李德卫关键词:肝移植 胆道并发症 病因 诊治 核因子-кB靶向性寡核苷酸“圈套”策略对创伤性炎症大鼠肝脏TNF-α的作用 被引量:6 2004年 目的 探讨NF кB靶向性寡核苷酸 (ODN)“圈套”策略对创伤性炎症大鼠肝脏TNF α的作用。方法 Wistar大鼠 96只 ,随机分成对照组、创伤性炎症组、“圈套”ODN组和变异“圈套”ODN组。运用凝胶阻滞实验检测创伤性炎症术后肝脏组织NF кB的活性及合成“圈套”ODN的体外竞争抑制试验 ,用RT PCR检测大鼠肝脏组织TNF αmRNA水平 ,ELISA检测大鼠肝脏组织TNF α的蛋白水平。结果 大鼠创伤性炎症术后 3h肝脏NF кB的活性开始升高 ,术后 12h达高峰。肝脏组织TNF αmRNA水平和蛋白水平也明显上升 ,与NF кB的活性改变一致 ,“圈套”ODN在体外能有效地抑制NF кB活性。“圈套”ODN治疗后大鼠肝脏组织TNF α的表达明显下降 ,肝脏功能明显好转 ,而变异“圈套”ODN没有效果。结论 NF кB靶向性“圈套”ODN通过特异性抑制NF кB活性 ,可以有效地抑制创伤性炎症大鼠肝脏炎症介质TNF α的释放 ,从而改善肝脏功能。 杨文军 梁华平 徐祥 时德 郝天智 国华 李德卫关键词:创伤性炎症 肝脏 超声测量静脉管径及截面积准确性的实验研究 2006年 目的探讨超声测量受压静脉管径及横截面积的准确性。方法24只健康新西兰兔随机分为3组,第1组为对照组,2、3组为实验组,通过手术分别使实验组兔下腔静脉(IVC)管径压缩20%、40%,术后2周用高频超声测量受压处IVC的管径及横截面积,以及对照组兔肾静脉开口下0.5cm处IVC管径及横截面积,将超声测值与实测值进行对比分析。结果对照组及管径压缩20%组,所测血管管径及横截面积的超声测值与实测值相比无显著差异(P>0.05),管径压缩40%组,管径的超声测值大于实测值,且有显著差异(P<0.05),而横截面积测值二者间无显著差异(P>0.05)。结论静脉在未受压及轻度受压(管径压缩小于20%)时,超声可较准确测量受压静脉的管径及横截面积;当静脉管径压缩大于40%时,超声测量管径误差较大,但横截面积测量仍较准确。 黄晓玲 李德卫关键词:超声检查 下腔静脉 髂静脉受压综合征的诊治 被引量:10 2002年 髂静脉受压综合征的发生有其解剖学因素 ,症状及体征无特征性。诊断主要靠静脉造影、静脉压力测定、血管内超声检查、多谱勒超声检查、磁共振静脉成像及CT等检查。在急性髂股静脉血栓形成前 ,主要采用保守治疗以防止血栓形成。手术治疗主要以解除梗阻 ,使髂静脉血流通畅为目的 ;腔内血管重建有取代外科手术的趋势。髂静脉受压综合征如在发生髂股静脉血栓之前及时诊断 ,了解髂静脉狭窄程度、血液流变学及血流动力学特点 ,并适时地纠正和治疗 。 李德卫 赵渝 时德关键词:髂静脉受压综合征 解剖学 组织学 葡萄糖-6-磷酸酶是一种潜在类风湿关节炎新自身抗原 被引量:4 2016年 目的检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)早期和晚期患者血清中葡萄糖-6-磷酸酶水平,探讨葡萄糖-6-磷酸酶与RA的相关性及其诊断意义。方法患者血清和正常人血清采用二维凝胶电泳免疫印迹的比较寻找差异蛋白点,质谱测序和Western bolt证明患者血清葡萄糖-6-磷酸酶在患者高表达在正常人则检测不到。在此基础上,分别对早期、晚期、非RA患者(其它自身免疫性疾病)和正常人20例、40例、30例、40例血清通过ELISA的方法检测葡萄糖-6-磷酸酶水平,分析血清葡萄糖-6-磷酸酶水平与RA的相关性。结果 RA血清中的葡萄糖-6-磷酸酶水平明显高于正常人(P<0.001)和其它自身免疫病患者(P<0.001);进一步比较与RA现有诊断指标的相关性,发现葡萄糖-6-磷酸酶血清水平与ESR、CCP、DAS28评分具有显著相关性(P<0.05)而与RF无显著相关(P>0.05);与临床皮质激素治疗治疗呈负相关。结论提示葡萄糖-6-磷酸酶是RA相关抗原,其血清水平对RA可能具有早期诊断价值;与激素治疗负相关说明该指标反映了疾病活动度;其在RA疾病发生及进展中的作用机理有待于进一步研究。 吴乔 李德卫 王洪林 杜成友 吴玉章关键词:类风湿性关节炎 葡萄糖-6-磷酸酶 肌成纤维细胞促进小鼠胚胎肝干细胞的增殖和分化 2014年 移植细胞的增殖和分化需要微环境支持。作为最重要的微环境成分,肌成纤维细胞在肿瘤的生长过程中发挥着重要作用。该实验Hepa1-6肿瘤细胞上清液在体外激活成纤维细胞分化为肌成纤维细胞,探讨肌成纤维细胞上清对小鼠胚胎肝干细胞(embryonic hepatic stem cells,EHSCs)HP14.5增殖和分化的影响。实验将EHSCs HP14.5分为三组:DMEM培养液处理组(DMEM组)、成纤维细胞上清液处理组(CMFb组)及肌成纤维细胞上清液处理组(CMAFb组)。MTT法绘制三组HP14.5细胞生长曲线图,免疫荧光法及Real-time PCR法检分别测白蛋白(albumin,ALB)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)的蛋白及mRNA表达情况,PAS染色法检测糖原合成状况。MTT法检测显示,CMAFb组胚胎肝干细胞增殖明显速度较其他两组快。免疫荧光染色及Real-time PCR结果显示,HP14.5培养5 d后,CMAFb组ALB和CK18的蛋白及mRNA表达水平以及糖原合成水平显著高于CMFb组及DMEM组,而AFP蛋白和mRNA表达水平明显降低。该实验表明,Hepa1-6激活的成纤维细胞能促进胚胎干肝细胞的增殖以及分化为有功能的成熟肝细胞。 谢言 杜文俊 李德卫关键词:肌成纤维细胞 白蛋白 细胞角蛋白18 甲胎蛋白 基于问题教学法联合讨论会模式在肝胆外科规培生临床能力培养中的应用研究 被引量:42 2019年 肝胆外科专业技能要求高,与多个学科存在广泛知识交叉。随着学科的飞速发展,学科复杂性的逐步提高,以及近年来住院医师规范化培训的广泛开展,寻求一种更加高效的且能增强规培生综合素质的教学模式成为教学重点。本研究在临床教学模式的探索中进行创新,提出了基于问题教学法(PBL)及讨论会(Seminar)相结合的教学模式,较以往传统的基于单个病例(CBL)的教学方式,充分尊重了学生在教学活动中的地位,培养学生主动学习、主动思考、查阅文献及分析总结的能力,现将探索结果报道如下。 文韬 邵月 汪克建 李德卫关键词:临床能力培养 问题教学法 肝胆外科 教学模式 住院医师 教学重点