李想韵
- 作品数：9 被引量：39H指数：4
- 供职机构：西南大学生命科学学院三峡库区生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：三峡库区生态环境教育部重点实验室开放基金重庆市科技攻关计划四川省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 非洲菊f3h基因的克隆及反义表达载体的构建被引量：4
- 2010年
- 黄烷酮3-羟化酶(F3H)是植物花青素合成代谢中早期重要关键酶之一,对花色起着重要的调控作用.根据其它物种的f3h基因设计简并引物,通过RT-PCR技术,从非洲菊中克隆到500bp的片段,经BlastN比对,证实该片段为非洲菊f3h基因保守片段.将其反向插入到高效表达载体pCAMBIA1304+CaMV35S启动子下游,通过PCR鉴定和双酶切鉴定表明成功构建高效反义表达载体pCAMBIA1304+-antif3h,并转化到根癌农杆菌LBA4404形成工程菌株,作为今后研究非洲菊花色调控机制以及培育新品种的有力工具.
- 彭江李鹏宋锋饶灿李想韵张继栋孙敏
- 关键词：非洲菊基因克隆反义表达载体
- 植物黄烷酮3-羟化酶的生物信息学分析被引量：6
- 2010年
- 研究黄烷酮3-羟化酶家族的酶学特性,为黄酮类化合物生物合成的分子机理提供理论依据。对NCBI已注册的12个植物F3H的核酸和氨基酸序列进行生物信息学方法分析,对其组成成分、理化性质、亚细胞定位、跨膜结构、分子进化、蛋白质二级结构和结构域进行预测和推断。结果得出,F3H蛋白是定位于细胞基质,无信号肽的非分泌型蛋白,α-螺旋和不规则卷曲是蛋白质二级结构中量最多的结构元件,伸展片段散布于整个蛋白质中。
- 李鹏饶灿彭江李想韵宋锋孙一铭孙敏
- 关键词：生物信息学
- 鸭肝丁酰胆碱酯酶的纯化与酶学性质研究被引量：4
- 2011年
- 目的:获得鸭肝丁酰胆碱酯酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法:采用丙酮脱脂、酸沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝丁酰胆碱酯酶;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子量测定。结果:从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的丁酰胆碱酯酶,纯化倍数为156.45倍,酶活回收率为23.60%,比活达17.21U/mg。酶相对分子量为388.85kDa,亚基相对分子量为64.70kDa。推测该酶由六个相同亚基构成。该酶最大紫外吸收为278nm。酶催化碘化硫代丁酰胆碱水解的最适pH为8.0,最适温度为35℃。该酶在pH3.0～10.0区域较稳定;在40℃以下处理1h,酶活力保持稳定。Zn2+、Mn2+和Cu2+对该酶具有显著的抑制作用。以碘化丁酰硫代胆碱为底物,测定该酶的表观Km为71.15μmol/L,没有过量底物抑制现象。结论:成功分离纯化获得丁酰胆碱酯酶,该酶具有较好的酸碱耐受性。
- 朱鸿李想韵邓玉王松付伟丽唐靓婷诰赵伟唐云明
- 关键词：鸭肝丁酰胆碱酯酶分离纯化
- 鸭肝谷氨酸脱氢酶的纯化与酶学性质研究被引量：5
- 2010年
- 目的:获得鸭肝谷氨酸脱氢酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法:采用丙酮脱脂、重金属离子沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和SephacrylS-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝谷氨酸脱氢酶,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子质量测定。结果:从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的谷氨酸脱氢酶,纯化倍数为60.93倍,酶活力回收率为11.02%,比活力达24.37U/mg。酶相对分子质量为371.41,亚基相对分子质量为61.60。推测该酶由6个相同亚基构成。该酶对NADH的Km为53.19μmol/L,最适pH值为10.0,最适反应温度为35℃。该酶在pH8.0左右较稳定;在40℃以下酶活力保持稳定。Zn2+、Li+和Cu2+对该酶具有显著的抑制作用。结论:分离纯化获得谷氨酸脱氢酶,该酶具有较高应用价值。
- 朱鸿李想韵王松付伟丽唐靓婷诰赵伟唐云明
- 关键词：鸭肝谷氨酸脱氢酶分离纯化
- 芦荟过氧化氢酶的分离纯化和性质研究被引量：9
- 2010年
- 目的:获得库拉索芦荟过氧化氢酶纯品并对其性质进行研究。方法:采用硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sepharose阴离子交换层析,CM-Sepharose阳离子交换层析和SephacrylS-200凝胶层析对酶蛋白进行分离纯化,采用SDS-PAGE鉴定酶的纯度、分子质量。结果:从芦荟中分离纯化获得电泳纯的过氧化氢酶,纯化倍数为228.05倍,酶活力回收率为14.10%,比活力达17427.30U/mg。该酶的分子质量为239.90kD,亚基分子质量为60.60kD。推测该酶由4个相同亚基构成。该酶最适温度为45℃,最适pH值为7.5,以过氧化氢为底物测定该酶的表观Km为34mmol/L。结论:成功分离纯化获得过氧化氢酶,该酶具有良好的热稳定性和酸碱耐受性。
- 朱鸿李想韵邓玉王松付伟丽唐靓婷郜赵伟唐云明
- 关键词：芦荟过氧化氢酶分离纯化
- 桑遗传转化体系的建立及槲皮素合成的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:建立桑的遗传转化体系,并对其毛状根生长特性和次生代谢产物槲皮素含量进行探索。方法:利用卸甲型根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciensC58C1侵染桑的黄化无菌苗,建立毛状根的诱导与培养体系;优化毛状根的扩大培养条件并测定其生长曲线,对桑毛状根T-DNA转化结果进行PCR检测;利用RP-HPLC检测槲皮素的含量。结果:用C58C1侵染无菌苗外植体,侵染10 min、分别预培养、共培养2 d及添加质量浓度为100 mg.L-1的乙酰丁香酮(AS)可得最高转化率;PCR检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒的rolB,rolC基因片段已整合入桑的毛状根基因组中;C58C1侵染桑黄化无菌苗茎段10 d后,茎段伤口处陆续产生毛状根,30 d后幼茎上产生毛状根的外植体达92%;在1/2MS+0.05 mg.L-1IBA液体培养基中培养50 d后,由HPLC检测结果表明,毛状根中槲皮素含量相比于原植株增加了8.5倍。结论:成功建立桑科毛状根诱导与离体培养体系,为其他木本植物毛状根培养的研究提供了参考,并进一步为槲皮素等药用活性成分的工业化生产奠定了基础。
- 李想韵朱鸿孙一铭孙敏
- 关键词：毛状根槲皮素HPLC
- 不同因素对油樟愈伤组织生长的影响被引量：5
- 2008年
- [目的]筛选油樟组培条件。[方法]以油樟带芽茎段为外植体,通过愈伤组织诱导率、污染率、褐变等指标研究无机盐、光照、抗生素等因素对愈伤组织生长影响。[结果]愈伤组织在2种培养基上均能明显增殖,且MS的培养效果好于1/2MS。由带芽茎段诱导的新生愈伤组织略带绿色。继代培养后,黑暗中诱导和培养的愈伤组织为淡黄色或白色,光照下培养的愈伤组织为褐色。愈伤组织诱导率和外植体污染率都随抗生素浓度的增加而降低,25～50mg/L的链霉素处理出愈率最高(60%～72%),污染率最低(0～15%),死亡率也最低(0)。在相同浓度下,使用链霉素外植体死亡率最低。[结论]MS培养基+25～50mg/L链霉素是油樟组培的最佳条件。
- 魏琴李想韵王丽周黎军张萍邓骛远
- 关键词：油樟组培愈伤组织
- 利用多因子正交试验建立桑的无菌快繁体系被引量：1
- 2009年
- 以桑侧枝茎段为材料,利用L9(34)正交设计探讨培养基种类和激素配比对桑茎段丛生芽诱导效率的影响,并对影响桑外植体生根的主要因子进行了研究。结果表明:A2B2C1为诱导出芽的最佳培养基与激素组合,并且可同时实现芽增殖;生根培养基为WPM+1.0 mg/L IBA。
- 李想韵朱鸿饶灿李鹏宋锋
- 关键词：正交设计不定芽诱导
- 发根农杆菌介导桑遗传转化体系的建立及槲皮素在发根中的含量测定
- 桑(Morus alba L.)是桑科(Moraceae)桑属(Morus)多年生木本双子叶植物。我国是世界上桑树资源最为丰富的国家，桑作为药用植物已有很长的历史[1]。桑树全身是宝，其果实(桑葚)、根、茎、叶及其加工副...
- 李想韵
- 关键词：槲皮素
- 文献传递
