李桂清
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金王宝恩肝纤维化研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 脐带组织来源基质干细胞的肝细胞相关标志物分析被引量：1
- 2009年
- 目的研究脐带组织来源基质干细胞(umbilical cord-matrix stem cells,UCMSCs)具备的部分肝细胞生物学特性。方法观察分离脐带基质干细胞细胞形态和免疫表型,利用免疫组化检测脐带基质干细胞的CK-18、AFP、ALB和肝细胞抗原(hepatocyte paraf-fin 1,HepPar1)的表达,通过RT-PCR方法评价脐带基质干细胞的多种肝细胞特异性基因表达的稳定性。结果从脐带组织内分离出类成纤维细胞样的脐带基质干细胞,CD105表达阳性,CD45表达阴性;第4代脐带基质干细胞表达CK-18、AFP、ALB等蛋白,而不表达HepPar1;RT-PCR结果表明10代内脐带基质干细胞持续稳定表达ALB、CK-19、CPS-1、CYP1A1,而不表达CYP3A4。结论脐带基质干细胞是一种本身表达一定肝细胞标志物的间充质干细胞,可能更有利于向肝细胞分化或在移植后发挥更好的治疗作用。
- 张世昌王英杰刘涛李桂清
- 关键词：脐带基质干细胞
- 胚胎干细胞用于肝组织工程研究的初步评价
- 2009年
- 目的在生物材料上进行胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESc)的三维培养和肝细胞定向诱导分化,评价其用于构建肝组织工程的可行性。方法胰酶消化生物反应器悬浮旋转培养5天的拟胚体(embryoid bodies,EBs),将细胞悬液与细胞外基质Matrigel 1∶1混合接种于聚乳酸(poly-L-lactic acid,PLLA)和聚乙醇酸(polyglycolic acid,PGA)共聚合三维支架内,用系列诱导剂定向诱导肝细胞分化。镜下动态观察ES细胞的培育和生长情况,并用HE染色、糖原染色、免疫荧光染色检测组织结构形态、肝细胞功能及其肝细胞标志物白蛋白(ALB)的表达。结果显微镜和扫描电镜见ESc可在聚合支架材料上三维立体状态生长,随培养时间不断增殖,交织成网状。HE染色提示形成了致密的类肝组织样结构。糖原染色和免疫荧光染色结果提示形成的类肝组织表达Alb,并有大量糖原存在。结论可在PLLA/PGA三维支架材料及Matrigel上培养ESc和定向肝细胞诱导分化,长时间培养后可形成类肝样组织。
- 刘涛王英杰张世昌陈霞李桂清
- 关键词：胚胎干细胞肝组织细胞分化生物材料
- 聚醚砜绒毛膜培养L02细胞的初步研究
- 2010年
- 目的初步观察一种聚醚砜(polyethersulfone,PES)绒毛膜对人肝细胞系L02细胞培养的支持作用,以探讨该种PES膜材料用于生物人工肝的可行性。方法 PES绒毛膜材料利用非对称性冷却成型技术制备而成。将L02细胞以7.0×104的密度接种于该膜上,分别用悬浮细胞计数法、MTT法、激光共聚焦显微镜、扫描电镜和RT-PCR法来观察L02细胞在该材料上的贴壁率、细胞活性、生长特性及AFP和CYP1A1的基因表达,并以无绒毛型平板膜材料和普通培养板做为对照。结果①PES绒毛膜上L02细胞生长良好,在10h内贴壁率由57.7%增高到91.7%,优于平板膜,与培养板相似;细胞活性8d内增长4至5倍,优于平板膜和培养板。②激光共聚焦显微镜下观察L02细胞在绒毛膜上粘附呈多细胞聚集生长,保持活性;扫描电镜证实了该结果,且逐渐融合形成紧密连接,并见部分细胞呈三维立体生长。③培养于PES绒毛膜上的L02细胞AFP和CYP1A1的表达优于平板膜,与培养板一致。结论 PES绒毛膜能够有效的支持L02细胞在其表面粘附、生长、增殖和AFP及CYP1A1基因的表达,可成为生物人工肝支持系统的膜材料。
- 范熠王英杰陈树林李桂清张世昌刘涛余献国
- 关键词：聚醚砜绒毛膜材料细胞培养生物人工肝
