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基于CTC-流式细胞仪的病原菌快速检测技术研究: 本研究利用氧化还原型染料CTC与活性病原菌特异性反应,并利用流式细胞仪检测,建立了一种快速检测水中具有呼吸代谢活性病原菌的方法。通过对CTC的浓度及孵育时间等检测条件进行优化，建立CTC-流式细胞仪检测方法,实验结果表明...; 李丹杨天林怡雯何苗; 关键词：病原菌流式细胞仪; 文献传递

基于CTC-流式细胞仪活性细菌总数的快速检测技术研究被引量：11: 2013年; 以大肠杆菌作为研究对象,建立一种5-cyano-2,3-ditolyl tetrazolium chloride(CTC)染色结合流式细胞仪(CTC-FCM)的方法,以选择性检测水环境中具有代谢活性的细菌总数.该方法的原理是细菌与具有氧化还原性的染料CTC发生反应,形成红色荧光物质,被流式细胞仪特异性识别进而可选择性检测活性菌.研究结果表明,CTC染色的最佳反应条件为:CTC浓度为2mmol·L-1、37℃避光孵育3h.该方法最低检测限为103个·mL-1.通过比较培养法和CTC-FCM方法检测热灭活后的大肠杆菌,结果表明CTC-FCM方法可准确区分活性菌和灭活菌,且与培养法之间具有较好的线性关系(R2=0.9465).应用CTC-FCM方法检测实际样品,结果显示该方法与培养法之间有较好的线性关系(R2=0.8121).本研究建立的CTC-FCM方法可满足饮用水水质标准需求,且检测时间比平板培养法缩短20～40h,可以用于环境水样中活性细菌总数检测.; 林怡雯杨天李丹何苗; 关键词：TETRAZOLIUM 流式细胞仪

基于PMA-定量PCR选择性检测技术的病原菌消毒特性研究被引量：12: 2011年; 建立了一种核酸染料propidium monoazide(PMA)与定量PCR技术联合选择性检测活性病原菌的技术(PMA-qPCR),以大肠杆菌作为模式菌,研究了氯和一氯胺消毒对病原菌的灭活特性.结果表明,PMA染料能够分别去除99.94%和99.99%的来自非活性大肠杆菌和沙门氏菌的DNA,PMA-qPCR技术能够有效区分活性菌与非活性菌;PMA-qPCR技术得到的氯和一氯胺消毒对大肠杆菌的灭活曲线符合一级动力学方程,灭活速率常数分别为2.24 L.(mg.min)-1和0.017 5 L.(mg.min)-1,低于平板培养法得到的灭活速率常数;当大肠杆菌的去除率达到99%时,采用PMA-qPCR技术检测需要的ct值相比于平板培养法从0.6 mg.L-1.min上升到0.9 mg.L-1.min(氯消毒)和从20 mg.L-1.min上升到超过100 mg.L-1.min(一氯胺消毒);随着ct值的升高,常规qPCR的检测结果基本不变,因此常规qPCR不能够反映氯和一氯胺消毒对病原菌的灭活效果.作为一种新的表征消毒特性的检测技术,PMA-qPCR技术有助于更为准确地评价氯和一氯胺消毒对病原菌的灭活效果.; 仝铁铮吴舒旭李丹何苗杨天施汉昌; 关键词：定量PCR 氯消毒

基于RT-qPCR选择性检测水中活性病原菌被引量：8: 2012年; 以大肠杆菌和粪肠球菌作为研究对象,研究建立了一种逆转录定量PCR(reverse transcription q quantitative PCR,RT-qPCR)方法,以选择性检测水中活性病原菌.研究结果表明,细菌体内的RNA经过RT-PCR逆转录成cDNA后利用qPCR可定量目的基因拷贝数,对处于稳定生长期的大肠杆菌(培养6～18 h)和粪肠球菌(培养10～38 h)体内的RNA含量进行检测分别为1 copies.CFU-1和7.98×102copies.CFU-1,以此作为细菌定量的依据,达到准确定量检测水体中目的基因RNA拷贝数而确定活性细菌含量的目的.通过3种方法(培养法、qPCR、RT-qPCR)检测热灭活后的大肠杆菌和粪肠球菌,结果表明与qPCR相比,RT-qPCR能够区分1.43 lg copy(大肠杆菌)与2.5 lg copy(粪肠球菌)的非活性菌,进而选择性检测活性病原菌.实际水样底物基质对RT-qPCR方法的影响不大,RT-qPCR与培养法之间有较好的线性相关性(大肠杆菌,R2=0.930,粪肠球菌,R2=0.948),本研究建立的方法可以用于实际水样活性病原菌的检测.; 林怡雯李丹吴舒旭何苗杨天; 关键词：RNA 大肠杆菌粪肠球菌

一种过氧化甲乙酮的连续合成方法及系统: 本发明涉及一种过氧化甲乙酮的连续合成方法及系统，基于微反应器技术高效的微尺度混合特性、良好的传质和传热性能和本质安全的特点，实现过氧化甲乙酮的连续化生产，在此基础上引入无机盐的水溶液实现高效快速的在线分相，大幅提高了生产...; 徐建鸿陈卓杨天

一种过氧化甲乙酮的连续合成方法及系统: 本发明涉及一种过氧化甲乙酮的连续合成方法及系统，基于微反应器技术高效的微尺度混合特性、良好的传质和传热性能和本质安全的特点，实现过氧化甲乙酮的连续化生产，在此基础上引入无机盐的水溶液实现高效快速的在线分相，大幅提高了生产...; 徐建鸿陈卓杨天; 文献传递

一种检测活性细菌含量的方法: 本发明公开了一种检测活性细菌含量的方法，特别涉及一种通过联合使用CTC染料染色和流式细胞仪来检测活性细菌含量的方法（简称CTC-流式细胞仪法或CTC-FCM法）。本发明提供的第一种检测活性细菌含量的方法，是将CTC染料与...; 何苗李丹林怡雯杨天; 文献传递

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杨天