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SIRT1在NAD保护神经轴突作用中的表达变化被引量：1: 2009年; 目的探讨沉默信号调控因子(SIRT1)在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)保护神经轴突中的作用。方法应用长春新碱毁损法制备背根神经节轴突变性细胞模型,应用透射电镜、RT-PCR、Western blot方法,观察正常背根神经节培养组、长春新碱毁损组、NAD保护组神经轴突的生长变化、超微结构变化和SIRT1 mRNA及SIRT1蛋白的表达变化。结果NAD保护组毁损8h后轴突远端始发生轻微肿胀,断离。透射电镜结果显示,长春新碱毁损组轴突肿胀,大量髓样小体出现,微丝微管排列紊乱,聚集,溶解,被絮状沉淀物和膜性结构所代替。NAD保护组可见较多平行排列的微丝微管,轴突肿胀较轻。RT-PCR结果显示,NAD保护组的SIRT1基因表达较毁损组上调。Western blot结果显示,损伤组可见其蛋白表达量明显降低,NAD保护组中SIRT1蛋白表达较毁损组上调。结论SIRT1参与NAD对轴突变性的保护作用。; 綦晓霞李振华张静房卢静杨淑华孙晋浩; 关键词：NAD

神经上皮干细胞粘附壳聚糖纤维生长分化的实验研究: 2010年; 目的检测神经上皮干细胞与壳聚糖纤维的生物相容性,并探讨其在壳聚糖纤维材料上的生长、分化情况。方法从胚胎神经管取材神经上皮干细胞,并与壳聚糖纤维进行体外共培养。采用MTT法检测细胞在壳聚糖纤维上的活性,采用光镜和扫描电镜技术观察细胞在壳聚糖纤维上的存活、生长状况,采用免疫细胞化学染色鉴定神经上皮干细胞的分化情况。结果神经上皮干细胞可以贴附在壳聚糖纤维表面生长,并可分化为神经元和神经胶质细胞,细胞活性与单纯神经上皮干细胞培养组没有明显差别。结论壳聚糖纤维与神经上皮干细胞有良好的生物相容性,二者在外周神经损伤的治疗中具有良好的应用前景。; 房芃李振华杨昆张静刘文静綦晓霞杨淑华孙晋浩; 关键词：干细胞壳聚糖纤维

应用神经逆行示踪及激光显微切割技术精确分离mesostriatal亚群神经元: 2011年; 目的中脑内向纹状体投射的mesostriatal多巴胺能细胞亚群是导致帕金森病的关键神经元,本实验拟寻找该亚群投射神经元的分布及有效分离方法。方法利用立体定位技术将绿色荧光逆行示踪剂注射到新生鼠纹状体内,24h后灌注取脑做冰冻切片;应用免疫荧光组织化学染色方法行酪氨酸羟化酶(TH)染色,采用激光显微切割技术将荧光示踪剂标记且呈TH染色阳性的神经元精确切割并收集。结果荧光示踪的神经元呈TH阳性者即属于mesostriatal亚群神经元,主要分布于中脑黑质,应用激光显微切割技术可精确分离这些逆行示踪且TH染色阳性的神经元。结论应用逆行荧光示踪和激光显微切割技术可精确分离mesostriatal亚群神经元。; 杨淑华高青李春晓王超张静李贵宝李振华孙晋浩; 关键词：多巴胺能神经元

EphA5介导胚胎中脑神经上皮干细胞向纹状体投射的实验研究被引量：3: 2010年; 目的探讨轴突导向分子EphA5在胚胎中脑神经上皮干细胞向靶组织纹状体特异性投射中的作用。方法自孕11d大鼠取材胚胎中脑神经上皮干细胞并进行体外培养,应用免疫细胞化学的方法检测EphA5在神经上皮干细胞中的表达情况;取材鼠脑纹状体组织,应用冰冻切片、RT-PCR及Western-blot等方法检测EphA5的配体Ephrin-A5的特异表达情况;将胚胎中脑神经上皮干细胞与新生鼠纹状体组织块联合培养,观察细胞的靶向生长情况。结果体外培养的胚胎中脑神经上皮干细胞可明显向纹状体生长并呈EphA5阳性,靶区纹状体组织中可检测到其配体Ephrin-A5高表达。结论轴突导向分子EphA5受体及其配体Ephrin-A5可介导胚胎中脑神经上皮干细胞向纹状体组织的靶向生长。; 房芃杨昆刘文静杨淑华杨洁张静李振华杨琳孙晋浩; 关键词：神经上皮干细胞纹状体

躯干神经嵴干细胞与壳聚糖纤维组织相容性的研究: 2010年; 目的探讨体外培养的躯干神经嵴干细胞与壳聚糖纤维的相容性。方法采用神经管植块法培养躯干神经嵴干细胞,并行免疫荧光细胞化学双重染色鉴定,将培养48 h的躯干神经嵴干细胞接种在壳聚糖纤维材料上,观察两者的组织相容性。结果采用神经管植块法培养的神经嵴干细胞,免疫细胞化学染色呈现nestin及P75双阳性,将其接种在壳聚糖纤维支架材料上,可见神经嵴干细胞贴附于壳聚糖纤维上生长;S-100免疫细胞化学染色显示,S-100阳性细胞突起的末端呈扁平状膨大;扫描电镜显示,壳聚糖纤维上的躯干神经嵴干细胞为梭形,呈现"端对端"、"肩并肩"排列,伸出爪形伪足贴附于壳聚糖纤维上。结论躯干神经嵴干细胞与壳聚糖纤维有良好的组织相容性,并可分化为Schwann细胞。; 杨洁孙晋浩张静卢静房芃杨淑华李振华; 关键词：干细胞细胞组织相容性壳聚糖纤维

GFP转基因骨髓间充质干细胞的定向诱导分化及脑内移植的实验研究: 帕金森病是老年人常见的神经退行性疾病,其病理学基础为中脑黑质向纹状体投射的多巴胺能神经元进行性退变,造成脑内多巴胺含量减少,从而引起震颤、肌张力增高及运动障碍等一系列临床表现。目前多采用药物治疗,但不能根治该病的发展。　...; 杨淑华; 关键词：骨髓间充质干细胞定向诱导分化细胞移植治疗脑内移植

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杨淑华