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杨磊: 作品数：11 被引量：28H指数：4; 供职机构：山西农业大学信息科学与工程学院更多>>; 发文基金：山西省科技攻关计划项目公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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POMC在不同毛色绵羊皮肤中的表达与定位被引量：7: 2015年; 【目的】对不同毛色绵羊皮肤中的阿黑皮素原(proopiomelanocortin,POMC)进行定位和表达差异分析,确定POMC与毛色形成的关系,进一步丰富有关哺乳动物毛色形成机制的理论知识。【方法】选取年龄相近的雄性黑色和白色成年绵羊各3只,用取皮器分别在臀部采集皮肤组织3块,对其中一块制作石蜡切片后采用免疫组织化学法确定POMC在不同绵羊皮肤中的定位,另两块置于液氮中冻存后分别提取皮肤总RNA和总蛋白,总RNA经反转录成c DNA后,经NCBI分析比对后设计POMC特异性PCR引物,采用QRT-PCR方法检测POMC基因在m RNA水平的表达差异;总蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳后,采用Western blotting方法加入POMC多克隆抗体检测POMC在蛋白水平的表达差异,得出的数据用SPSS19.0软件进行差异显著性分析,探讨POMC对毛色形成机制的调控作用。【结果】免疫组织化学结果显示POMC在黑色和白色绵羊皮肤中均有表达,且表达部位都位于毛囊根鞘周围和表皮的皮肤角质形成层细胞内;QRT-PCR结果显示POMC在黑色绵羊皮肤中m RNA的相对表达量为2.5004±0.2577**,而在白色绵羊皮肤中POMC的m RNA的相对表达量为1.0032±0.0350,黑色绵羊皮肤中POMC的m RNA的相对表达量为白色绵羊皮肤的2.5倍,二者表达差异极显著(P<0.01);Western boltting结果显示黑色绵羊皮肤POMC蛋白水平相对表达量为1.5253±0.0426*,而白色皮肤中POMC蛋白水平相对表达量为1.0005±0.0180,黑色皮肤POMC蛋白表达量是白色皮肤的1.55倍(P<0.05),两者差异显著。【结论】试验表明POMC可在黑色和白色绵羊皮肤中正常表达,且其表达位置一致,但POMC在不同毛色绵羊皮肤组织中m RNA和蛋白的表达水平存在一定的差异,表明POMC的表达量变化会在一定程度上影响毛色的生成。; 马淑慧李亚楠赫晓燕王海东杨磊董常生; 关键词：绵羊 POMC WESTERN BLOTTING

小鼠出生后背部毛囊发育与Lef-1表达的研究被引量：4: 2012年; 旨在研究Lef-1在小鼠背部毛囊生长周期中的表达规律及其与毛囊生长更替的关系。本试验采用石蜡切片HE染色、Western blotting以及免疫组织化学方法,研究小鼠毛囊的周期性变化,检测Lef-1在小鼠毛囊生长的不同时期皮肤组织中的蛋白表达水平,并对其进行组织定位。结果,昆明系小鼠毛囊生长呈周期性变化,处于不同生长时期的毛囊具有各期的特殊结构;Western blotting结果显示,在各阶段皮肤组织中存在Lef-1蛋白的表达,其在毛囊生长初期的表达量显著高于中期和末期;免疫组织化学结果显示,Lef-1在不同毛囊生长时期的皮脂腺、根鞘和真皮乳头均有不同程度的表达。Lef-1的表达与毛囊的周期性变化存在相关性。; 王海东杨磊王祎于秀菊董彦君赫晓燕马淑慧董常生; 关键词：WESTERN BLOTTING 免疫组织化学小鼠

小鼠卵细胞体外成熟培养及孤雌激活被引量：2: 2011年; [目的]利用小鼠卵母细胞体外成熟培养及3种激活方法(乙醇激活、氯化锶激活、乙醇—氯化锶激活)对小鼠卵母细胞进行了孤雌激活研究。[方法]小鼠经注射孕马血清促性腺激素(PMSG)48h后,摘取卵巢获得3级未成熟卵母细胞,在成熟培养液(M199100mL+丙酮酸钠2.2mg+双抗100IU/mL+LH2IU/mL+FCS10%)中对小鼠未成熟卵细胞进行体外成熟培养,获得的成熟卵母细胞分别在乙醇、氯化锶、乙醇—氯化锶不同激活剂中激活。[结果]A级卵母细胞成熟率为79%,B级卵母细胞成熟率为70%,C级卵母细胞成熟率为55%。A级卵母细胞使用氯化锶激活率可达80.0%,为最佳方法。[结论]A级卵母细胞成熟培养效果最好。孤雌激活氯化锶激活效果高于乙醇。; 王海东薛霖莉杨磊董彦君; 关键词：卵母细胞体外成熟孤雌激活

猪繁殖与呼吸综合征的诊治与防控: 2012年; 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,简写PRRS)亦猪蓝耳病是目前对我国乃至世界养猪生产困扰最大的原发性疾病,这是由于该病毒不断变异造成的。因此,研究猪繁殖与呼吸综合征对于促进养猪业的发展和保障人类健康具有重要的意义。对天津市武清区崔黄口镇某猪场进行调查发现,该猪场连续发生猪繁殖与呼吸综合征,并有死亡病例。在做记录的同时,调查了该镇其余养猪场,对猪繁殖与呼吸综合征有了更详细的了解,本文就对猪繁殖与呼吸综合征的流行病学调查以及防制进行讨论。; 宋瑞超杨磊马淑慧; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征

Lef-1基因在棕色和白色羊驼皮肤差异表达: 本实验旨在研究Lef-1在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色间的关系.采用实时荧光定量PCR、Western blotting以及免疫组织化学方法,研究白色和棕色羊驼皮肤中的mRNA、蛋白表达水平和定位.实时荧...; 杨磊王海东王祎于秀菊董彦君董常生; 关键词：羊驼实时荧光定量PCR 蛋白质印迹免疫组织化学

POMC在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位分析被引量：1: 2015年; 旨在研究POMC基因对黑色素细胞的形成、发育以及色素生成方面的重要作用。本研究通过qRT-PCR方法比较不同毛色羊驼皮肤中POMC mRNA的表达水平,采用免疫组织化学技术对POMC蛋白的定位和表达进行蛋白水平分析。结果显示:POMC在棕色和白色羊驼皮肤组织中均有表达,且棕色羊驼皮肤中的POMC mRNA相对表达量为白色羊驼皮肤的23倍(P<0.01),POMC蛋白表达部位主要在表皮层和毛囊的毛根鞘周围的角质形成细胞内,且POMC在两部分的表达显示棕色羊驼中的表达量高于白色羊驼(P<0.05),表明POMC可能参与羊驼毛色的形成。; 王海东马淑慧李亚楠赫晓燕杨磊董常生; 关键词：羊驼毛色 POMC 实时荧光定量PCR 免疫组织化学

Lef-1基因在棕色和白色羊驼皮肤差异表达被引量：9: 2011年; 本实验旨在研究淋巴增强因子-1(Lef-1)在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色间的关系.采用实时荧光定量PCR、Western印迹以及免疫组织化学方法,研究白色和棕色羊驼皮肤中的mRNA、蛋白表达水平和定位.定量实时荧光PCR结果显示,Lef-1在棕色羊驼皮肤组织相对基因表达量是3.372 7±0.198 9,在白色羊驼皮肤组织是1.000 3±0.022 7;Western印迹结果显示,在羊驼皮肤组织总蛋白中存在分子量约44 kD与兔抗Lef-1多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带,棕色羊驼平均蛋白表达量显著高于白色羊驼;免疫组织化学结果显示,在棕色羊驼皮肤组织中多表达在毛球部,表皮也有分布,在白色羊驼皮肤组织中多表达在表皮,在棕色和白色羊驼皮肤组织中外根鞘都有较强表达.结果显示,Lef-1在棕色和白色羊驼皮肤的定位和含量存在差异,提示Lef-1可能影响了羊驼被毛颜色的形成.; 杨磊王海东王祎于秀菊董彦君董常生; 关键词：羊驼蛋白质印迹免疫组织化学

不同浓度血清对肝细胞原代培养的影响被引量：5: 2009年; 肝细胞具有多种功能，代谢旺盛。肝细胞的原代培养是一种研究肝组织和肝细胞的良好方法，也是毒理学、免疫学、细胞毒理实验、临床医学及生物技术等各方面研究的基础。在进行肝细胞的培养中，需要使用到牛血清。但牛血清最容易被外界的杂菌所污染，造成实验的失败，同时也是一种较贵的材料。如果合理有效地使用牛血清，既能较好完成实验，又能降低实验的成本，节约实验经费。实验通过使用不同浓度的牛血清对肝细胞进行培养，以获取适合肝细胞原代培养的最佳血清浓度。; 王祎杨磊王海东王勇; 关键词：原代培养血清浓度肝细胞牛血清毒理实验生物技术

异地饲养羊驼血清生化指标的测定: 2008年; 为探讨地域变迁对羊驼血清学的影响，对12月龄以上成年公母羊驼和2～12月龄幼羊驼血清主要生化指标进行测定。结果表明：成年公母羊驼间血清钠、氯化物和二氧化碳结合力的含量有显著差异（P〈0．05）；成幼羊驼间血清钠、总蛋白、球蛋白、无机磷含量有显著差异（P〈0．05）；与澳大利亚羊驼比较，血清尿素、肌肝和磷值变化较大，而总蛋白、白蛋白和球蛋白含量都在已报道值范围的下限值左右，而白球比较大。说明不同地域环境对羊驼血清学影响较大。; 张楠杨磊李鹏宇乔竹琴王祎王海东; 关键词：羊驼血清生化指标

Lef-1基因在棕色和白色羊驼皮肤差异表达: 本实验旨在研究Lef-1在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色间的关系.采用实时荧光定量PCR、Western blotting以及免疫组织化学方法,研究白色和棕色羊驼皮肤中的mRNA、蛋白表达水平和定位.实时荧...; 杨磊王海东王祎于秀菊董彦君董常生; 关键词：羊驼实时荧光定量PCR 蛋白质印迹免疫组织化学; 文献传递

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