查晴 作品数:16 被引量:70 H指数:5 供职机构: 上海交通大学医学院附属第九人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术委员会科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
卵泡抑素样蛋白1对氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量:1 2021年 目的:探讨在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)刺激下,卵泡抑素样蛋白1(follistatin like protein 1,FSTL1)在小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)表型转化过程中的作用。方法:检测小鼠血管沉积Ox-LDL的病变区域中FSTL1的表达水平,再通过体外实验进一步验证Ox-LDL对FSTL1表达量的影响。运用蛋白质印迹法检测VSMC不同状态下收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、沉默信息调节蛋白1(silencing information regulatory protein 1,SIRT1)和分泌型标志物骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达情况。通过增殖实验验证Ox-LDL和FSTL1作用下VSMC的增殖情况。结果:与对照组相比,小鼠Ox-LDL沉积的病变血管区FSTL1表达减少(0.223±0.010比0.097±0.019,t=27.381,P<0.01)。采用Ox-LDL 0、12.5、25、50 mg/L分别刺激VSMC 24 h,FSTL1表达水平分别为1.330±0.055、0.905±0.027、0.753±0.037和0.243±0.016,Ox-LDL浓度为50 mg/L时,FSTL1表达水平最低(F=260.600,P<0.0001)。在此基础上用50 mg/L Ox-LDL分别刺激VSMC 0、6、12、24 h,FSTL1的表达分别为1.383±0.033、0.782±0.047、0.381±0.022和0.230±0.017,Ox-LDL诱导时间为24 h时,FSTL1表达水平最低(F=151.000,P<0.0001)。Ox-LDL诱导下,VSMC分泌的α-SMA(1.303±0.030比0.493±0.069,P<0.01)和SIRT1(0.993±0.044比0.613±0.030,P<0.01)表达减少,但OPN表达增多(1.001±0.031比2.698±0.001,P<0.01)。在Ox-LDL刺激的基础上加入FSTL1共刺激,结果与Ox-LDL刺激组相反[OPN 2.698±0.002比1.590±0.001(P<0.05),α-SMA 0.493±0.062比0.653±0.015(P<0.05),SIRT10.613±0.030比1.231±0.011(P<0.05)]。加入SIRT1抑制剂,Ox-LDL+FSTL1的条件下出现VSMC中α-SMA(0.530±0.033比0.283±0.032,P<0.01)和SIRT1(1.056±0.020比0.207±0.021,P<0.01)表达减少,但OPN表达增多(1.643±0.047比3.533±0.100,P<0.01)。Ox-LDL刺激组细胞增殖能力上升(0.870±0.010比1.890±0.020,P<0.01),但Ox-LDL联合FSTL1组的增殖能力比Ox-LDL刺激组弱(1.890±0.021比 肖凡 查晴 刘亚 杨玲 叶佳雯 刘艳关键词:氧化低密度脂蛋白 表型转化 Α-平滑肌肌动蛋白 SIRT3与细胞代谢及心血管疾病的相关性 被引量:6 2015年 蛋白去乙酰化酶在细胞生理过程中发挥着极为重要的作用。人蛋白去乙酰化酶包括HDACⅠ、HDACⅡ、HDACⅢ和HDACIV4个家族。其中第Ⅲ类即Sir2(Silent information regulator2)家族包括7个成员——SIRT1-SIRT7,每个成员都具有不同的细胞定位,并且发挥不同的生物学功能。作为主要定位于线粒体的组蛋白去乙酰化酶,SIRT3不仅调节细胞的能量代谢,并在细胞凋亡、肿瘤生长和一些疾病中发挥作用。文章综述了SIRT3在细胞代谢中的生物学功能以及其在心血管疾病中的研究进展。 曹丽娟 刘昕訸 查晴 宋倩 杨克 刘艳关键词:组蛋白去乙酰化酶 细胞代谢 心血管疾病 卵泡抑素样蛋白1与糖尿病动脉粥样硬化的炎症反应 被引量:1 2017年 目的:探究细胞因子卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)参与调节巨噬细胞促进糖尿病动脉粥样硬化斑块形成的机制。方法:采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测动脉粥样硬化患者和糖尿病动脉粥样硬化患者血清FSTL1表达水平。构建糖尿病小鼠模型,利用免疫组织化学(组化)检测FSTL1表达阳性区域;使用氧化型低密度脂蛋白(ox LDL)和(或)FSTL1刺激人巨噬细胞后,采用ELISA方法检测其炎症因子的分泌水平,探讨FSTL1参与糖尿病动脉粥样硬化发生、发展的机制。结果:细胞因子FSTL1在糖尿病动脉粥样硬化病变中表达异常升高,糖尿病动脉粥样硬化组为(13.60±4.20)μg/L,动脉粥样硬化组为(9.90±3.50)μg/L(P<0.01),且主要表达于巨噬细胞;FSTL1可刺激巨噬细胞的炎症因子释放,触发局部炎症反应。结论:细胞因子FSTL1可能通过激活巨噬细胞炎症反应,参与糖尿病动脉粥样硬化斑块的发生、发展。 宋倩 宋倩 王燕萍 陈媛媛 曹丽娟 曹丽娟 查晴 杨克关键词:巨噬细胞 糖尿病 动脉粥样硬化 主动脉瓣膜钙化中胰高血糖素样肽-1对Notch1-Sox9信号通路的调控作用 被引量:1 2021年 目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及GLP-1受体(GLP-1R)下游信号通路对主动脉瓣膜间质细胞钙化的调控作用。方法:收集16例因主动脉瓣病变行置换术患者(瓣膜钙化组)和20例因其他原因行心脏移植但瓣膜正常患者(对照组)的主动脉瓣。苏木精-伊红染色(HE染色)和茜素红染色法检测瓣膜结构变化及钙化情况,免疫组织化学染色检测GLP-1R表达情况。培养原代小鼠瓣膜间质细胞,分为正常培养组、钙化培养组和钙化培养+GLP-1组,茜素红染色检测钙化情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Sox9 mRNA表达水平,Western blot检测GLP-1R、Sox9、Notch胞内结构域(NICD)的蛋白表达水平,免疫荧光法检测Sox9细胞定位及NICD入核情况。结果:与对照组比较,瓣膜钙化组人主动脉瓣组织茜素红染色显示阳性区增加,免疫组织化学染色显示GLP-1R表达水平下降。体外培养小鼠主动脉瓣膜间质原代细胞,与正常培养组比较,钙化培养组光镜下发现细胞出现形态改变,茜素红染色阳性区域增加,GLP-1R蛋白表达水平明显下降(P<0.05),NICD入核量减少,NICD蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。与钙化培养组比较,钙化培养+GLP-1组光镜下细胞形态基本正常,茜素红染色阳性区域减少,GLP-1R蛋白表达水平明显升高,Sox 9的mRNA及蛋白表达水平明显升高,NICD入核量增加,NICD蛋白表达水平明显升高(P均<0.05)。结论:GLP-1通过激活其受体GLP-1R调控主动脉瓣膜间质细胞中NICD入核,诱导Sox9表达升高,抑制主动脉瓣膜钙化。 查晴 肖凡 张倩茹 叶佳雯 张煜 杨玲 杨克 刘艳关键词:胰高血糖素样肽-1受体 SOX9 AOX1调控平滑肌细胞表型转换参与动脉钙化的研究 被引量:1 2023年 目的探究醛氧化酶1(aldehyde oxidase,AOX1)调控脂质诱导的动脉钙化的机制。方法运用蛋白质印迹法检测氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)不同浓度刺激下血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)表型分子的表达情况,同时通过试剂盒检测活性氧生成情况和谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比例。AOX1敲减病毒感染平滑肌细胞后,和对照组比较VSMC变化情况。此外,通过免疫组织化学方法验证AOX1在动脉钙化斑块中表达及定位情况。结果oxLDL刺激促进平滑肌细胞收缩表型分子表达减少(P<0.0001),合成表型分子表达增多(P<0.0001),活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成增多,降低谷胱甘肽(glutathione,GSH)/氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)比例,且呈剂量依赖性。而AOX1病毒敲减之后可显著抑制oxLDL诱导的平滑肌细胞表型转化,活性氧生成及GSH/GSSG比例降低。AOX1在人动脉钙化斑块组织中表达升高,并定位于平滑肌细胞。结论AOX1通过诱发平滑肌细胞内ROS-GSH失衡,导致平滑肌细胞从收缩表型向合成表型转化,从而参与动脉钙化。 张倩茹 查晴 陈辉 张煜 杨克 刘艳关键词:氧化低密度脂蛋白 平滑肌细胞 表型转换 动脉钙化 正常成人胸导联R波和S波振幅及其比值分析 被引量:1 2011年 目的:观察正常成人胸导联R波和S波振幅及其比值。方法:对900名14~96岁正常成人胸导联R波和S波振幅及其比值进行统计分析。结果:V1~V6导联R波振幅(mV)依次为0.21±0.12,0.66±0.30,1.05±0.38,1.36±0.44,1.35±0.41,1.14±0.29;S波振幅(-mV)依次为0.75±0.35,1.12±0.51,0.74±0.43,0.48±0.31,0.29±0.21,0.20±0.12;R/S比值依次为0.03±0.01,0.06±0.01,0.15±0.03,0.30±0.08,0.49±0.10,0.83±0.17,V2~V4导联R/S比值递增量依次为前一导联的2.0倍,2.5倍,2.0倍,1.6倍和1.7倍。结论:正常成人V1~V4导联R波递增,V2和V3导联递增幅度最明显,振幅以V4导联最高;V2~V6导联S波递减,V2导联S波可大于V1导联;V1~V6导联R/S比值依次递增,递增幅度均在2倍左右。 谈剑诚 张天贶 查晴关键词:心电图 胸导联 S波 成人 心房颤动患者心电图改变的性别差异 被引量:4 2011年 目的探讨心房颤动(房颤)患者心电图改变的性别差异。方法对12家社区2009年5月-2011年2月4600例房颤患者心电图改变按性别作回顾性分析。结果≥60岁占96.0%(4416/4600),男性占40.5%(1863/4600),女性占59.5%(2737/4600)(P〈0.01),男、女比为1:1.5;男性低电压5.8%(108/1863)、电轴偏移14.8%(276/1863)和束支传导阻滞25.0%(466/1863)明显多于女性的3.8%(104/2737)、6.6%(180/2737)和15.0%(410/2737)(P〈0.01);女性ST—T改变72.6%(1988/2737)、心室肥大12.5%(342/2737)和QT间期延长5.7%(155/2737)明显多于男性的51.4%(957/1836)、7.3%(136/1836)和2.7%(50/1836)(P〈0.01);心室率〉100次/分、心室率〈60次/分、起搏器、心肌梗死、三度房室阻滞、室性期前收缩和预激综合征性别差异无显著性(P〉0.05)。结论社区房颤患者以老年为主,女性多于男性,心电图改变存在各自特征性改变。 谈剑诚 张天贶 查晴 张大东关键词:心电图 心房颤动 性别 实时远程心电图会诊分析 被引量:4 2011年 目的探讨社区医院实时远程心电图会诊诊断结果频次及其临床意义。方法会诊中心连续1年对13家社区医院心电图通过实时远程会诊系统进行会诊,且对诊断结果频次汇总分析。结果共会诊40739例,正常心电图34.50%(14056/40739),异常心电图65.50%(26683/40739),异常心电图中前三项的是ST-T改变24.75%(6605/26683),期前收缩12.34%(3292/26683)和束支传导阻滞11.54%(3080/26683)。结论社区医院实时远程心电图会诊系统的应用及社区心电图医师熟悉会诊诊断结果的频次,对提高心电图诊断正确率有指导意义。 谈剑诚 张天贶 查晴 张大东 刘霞关键词:心电图 会诊 钙化性主动脉瓣膜病的生物标志物预测模型的构建 被引量:2 2022年 目的:通过分析新的血清标志物与钙化性主动脉瓣膜病(calcific aortic valve disease,CAVD)关系,建立新的生物标志物预测模型,用于预测CAVD。方法:收集446例心内科住院患者外周血及临床资料,通过SPSS20.0将患者按简单随机法分为筛查队列(n=202)和验证队列(n=244),酶联免疫吸附法检测胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)血清浓度。通过分析筛查队列中各因子及临床变量与CAVD的关系,其后在验证队列中加以验证,构建CAVD预测模型。结果:二元回归分析显示,筛查队列中多个因素与CAVD显著相关,最终确定高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、GLP-1及OPN纳入预测模型,并绘制列线图。通过C统计量[筛查队列:0.73(95%置信区间:0.66~0.80),验证队列0.70:(95%置信区间:0.64~0.77)]及Hosmer-Lemeshow检验(筛查队列:P=0.14,验证队列:P=0.23)发现在筛查和验证队列中模型的区分度和一致性均表现良好。决策曲线分析显示,生物标志物模型比临床因素模型具有更高的净效益。此外,该模型在不同性别及年龄组仍具良好鉴别性。结论:GLP-1、OPN及HDL-C水平与CAVD具明显相关性。基于此,成功构建并验证了一种CAVD预测模型,该模型鉴别能力和准确性均表现良好,为预测CAVD提供可能。 杨玲 查晴 张倩茹 叶佳雯 杨克 刘艳关键词:生物标志物 胰高血糖素样肽1 骨桥蛋白 老年动态心电图长R-R间期的临床分析 被引量:5 2010年 目的:探讨老年动态心电图(DCG)长R-R间期的临床意义。方法:伴明显胸闷、头晕、黑矇或晕厥的228例老年人为A组,同期伴同样症状146例中年人为B组,回顾性分析2组患者的临床心电图资料。结果:A组冠心病(54.8%)和病态窦房结综合征(9.7%)发生率明显高于B组(35.6%和3.4%,P<0.01,P<0.05);A组最慢心率(39.1±6.3)次/min明显低于B组(45.2±9.6次/min,P<0.01),A组心率<40次/min(57.9%)明显高于B组(25.3%,P<0.01);导致DCG长R-R间期A组持续性心房纤颤(46.9%)明显多于B组(28.8%,P<0.01);A组和B组长R-R间期均多见于4000ms以内;A组长间期活动状态时(45.6%)与休息时(54.4%)比较,差异无统计学意义(P>0.05);符合植入起搏器指征者A组(27.6%)植入永久性起搏器高于B组(17.1%,P<0.05),2组起搏器植入后在药物治疗配合下症状均改善(P>0.05)。结论:老年人DCG检测出长R-R间期以冠心病和病态窦房结综合征持续性心房纤颤最多见,时限多在4000ms以内,与活动状态无明显相关性,永久性起搏器植入是老年人有效的治疗方法。 谈剑诚 张天贶 查晴关键词:老年人 动态心电图 长R-R间期