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红景天甙生物合成途径:酪醇合成的起始反应及其糖基化被引量：16: 2012年; 红景天甙(Salidroside)生源途径分子机制的解析是利用基因工程、代谢工程技术合成目标化合物的基础。糖基化是红景天甙生物合成的最后一步反应。在前期工作中,本课题组率先报道了与红景天甙生物合成相关的3个尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(UGTs)基因,在体外酶学性质研究的基础上,利用根癌农杆菌和发根农杆菌介导分别建立了相关转基因体系,鉴别了红景天甙生物合成最适UGT及植物和毛状根生物反应器系统合成红景天甙的效率差异;酪醇(Tyrosol)是红景天甙糖基化反应的甙元底物分子,其具体的代谢通路及其调控机制仍不明确。针对酪醇生物合成来源主要存在两种观点:一是酪醇可能来自于苯丙烷代谢途径产生的4-香豆酸,该途径起源于苯丙氨酸;二是生物碱代谢途径的中间产物酪胺可能是酪醇生物合成的前体,该途径则起源于酪氨酸。在后续工作中,否定了酪醇来源于苯丙烷代谢途径的可能性,进一步的工作证实酪氨酸脱羧酶(TyrDC)在酪醇生物合成的起始反应中担负着重要功能,酪醇作为一种苯乙烷类化合物衍生物,其生物合成来源于生物碱代谢途径。; 马兰青柳春梅于寒松张继星高东尧李彦舫王有年; 关键词：红景天甙酪醇分子调控红景天

红景天提取物及其制备方法与应用: 本发明公开了红景天提取物及其制备方法与应用。本发明所提供的红景天提取物，其制备方法包括：用95%乙醇水溶液提取红景天根，收集提取液并除去所述提取液中的乙醇，得到红景天95%乙醇提取物，所述红景天95%乙醇提取物为红景天提...; 柳春梅马兰青赵晓萌王树芳冯静郭辉力杨亚东; 文献传递

8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物及其制备方法与应用: 本发明公开了8‑甲氧基补骨脂素的结构修饰物及其制备方法与应用。本发明所提供的8‑甲氧基补骨脂素的结构修饰物为式1所示的化合物B20或式2所示的化合物A10。化合物B2...; 柳春梅赵莹李兵王赛朱慧泽孙雨; 文献传递

融合蛋白Nt4CL5aPcSTS及其制备方法与应用: 本发明公开了融合蛋白Nt4CL5aPcSTS及其制备方法与应用。本发明所提供的融合蛋白Nt4CL5aPcSTS，是由蛋白质Nt4CL和蛋白质PcSTS融合得到的融合蛋白：所述蛋白质Nt4CL是氨基酸序列是SEQ ID N...; 郭辉力马兰青赵晓萌柳春梅隗浩然杨亚东罗在柒刘文彬张红冯静马雅迪刘欢; 文献传递

植物尿苷二磷酸糖基转移酶超家族晶体结构被引量：8: 2014年; 糖基转移酶(Glycosyltransferases,GTs)催化的糖基化反应几乎是植物中最为重要的反应。GTs家族1中的植物UGTs(UDP-dependent glycosyltransferases)成员主要运用尿苷二磷酸活化的糖作为糖基供体,因其成员众多、生物功能多样,仅仅通过序列比较和进化分析不能够精确预测其复杂的底物专一性和特有的催化机制,需要后续生化实验的进一步验证。文中主要总结了目前在蛋白结构数据库(Protein Data Bank,PDB)中报道的5种植物UGTs的晶体三维结构和定点突变功能研究进展。详细介绍了植物UGTs整体结构的特点以及蛋白与底物相互作用的细节,为更有效地生化定性UGTs以便深入理解底物专一性提供了有力的工具,从而为植物UGTs在酶工程和基因工程中的应用奠定基础。; 吕鹤书薛飞燕柳春梅杨明峰马兰青; 关键词：晶体结构底物专一性

辣蓼不同种间植物次生代谢产物种类及差异被引量：5: 2012年; 辣蓼是一种广泛分布于我国的传统中草药,通常指水辣蓼(Polygonum hydropiper)和旱辣蓼(Polygonumflaccidum)的干燥全草,具有健脾化湿、除湿化滞、止痢止痛、解毒化瘀等功效。近几年两种辣蓼植物提取物在兽药、植物源农药方面进行了较为深入研究,结果表明,水辣蓼和旱辣蓼的作用机制、功效及应用方向存在明显差别。本文对上述两种植物的次生代谢产物种类及其差异进行了综述和对比分析,为辣蓼植物活性成分功能研究与深化利用提供依据。; 柳春梅吕鹤书师光禄马兰青王有年; 关键词：次生代谢产物

毛大丁草提取物及其制备方法与应用: 本发明公开了毛大丁草提取物及其制备方法与应用。本发明所提供的毛大丁草提取物及其制备方法与应用中，所述毛大丁草提取物为下述A1)-A7)中的任一种：A1)毛大丁草95％乙醇提取物；A2)毛大丁草石油醚萃取物；A3)毛大丁草...; 柳春梅赵晓萌马兰青吕鹤书王树芳高立东; 文献传递

红景天提取物在抑制番茄灰霉病菌和白菜黑斑病菌中的应用: 本发明公开了红景天提取物在抑制番茄灰霉病菌和白菜黑斑病菌中的应用。本发明所提供的红景天提取物，其制备方法包括：用95％乙醇水溶液提取红景天根，收集提取液并除去所述提取液中的乙醇，得到红景天95％乙醇提取物，所述红景天95...; 柳春梅马兰青赵晓萌王树芳冯静郭辉力杨亚东; 文献传递

高山红景天UGT72B14-2基因克隆及其原核表达被引量：5: 2016年; 【目的】旨在构建UGT72B14-2的原核表达体系,为进一步研究其功能与应用奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术从高山红景天茎叶中分离获取UGT72B14-2基因,在大肠杆菌中表达后,经Ni 2+亲和柱纯化、PD-10柱脱盐处理,利用SDS-PAGE检测目标蛋白。【结果】测序结果表明UGT72B14-2基因长度为1 422bp,预测其编码473个氨基酸,蛋白质相对分子量(Mr)为51.49kDa,等电点(pI)为6.30;SDS-PAGE检测结果表明当初始菌液OD600约0.6时,诱导4h后目标蛋白即可大量表达,纯化、脱盐和浓缩处理后可获得较高纯度的重组蛋白。【结论】UGT72B14-2属于UDP-葡萄糖基转移酶家族的一员,能够在大肠杆菌中表达。; 胡滢滢薛飞燕杨明峰吕鹤书柳春梅马兰青; 关键词：高山红景天原核表达

虎杖苯亚甲基丙酮合酶PcPKS2的表达纯化和晶体生长: 2016年; 植物类型Ⅲ聚酮合酶超家族(PKSs),又称查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS)超家族,催化合成多种植物次生代谢产物的分子骨架。苯亚甲基丙酮合酶(Benzalacetone synthase,BAS)催化4-香豆酰辅酶A与丙二酰辅酶A通过一步脱羧缩合反应生成苯亚甲基丙酮,是一系列具有重要生物学活性苯丁烷类化合物及其衍生物的前体化合物。前期工作从虎杖中分离出苯亚甲基丙酮合酶BAS(PcPKS2)和1个具有CHS和BAS活性的双功能酶(PcPKS1)。两者与超家族其他成员序列经比较,在包括门卫氨基酸Phe215和Phe265在内的重要氨基酸序列存在一定差异。已有蛋白晶体学研究结果表明,PKSs家族不同成员的功能多样性来自于酶催化位点的非常微小的构象变化。为了能够从结构上比较PcPKS2和Pc PKS1双功能酶活性差异可能产生的机制,以确定其高效BAS活性的分子机理,研究利用了大肠杆菌原核表达系统过量表达了C-端融合有His6标签的重组蛋白,经纯化得到了高纯度蛋白。经过对其晶体生长条件进行摸索和优化,得到了能用于X-射线衍射的单晶,为其结构解析、催化机理研究、了解虎杖聚酮类化合物生物合成机制和该类酶在基因工程中的应用提供了基础。; 马文瑞柳春梅杨明峰薛飞燕陈青马兰青吕鹤书; 关键词：虎杖晶体生长

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柳春梅

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