王伟涛
- 作品数：9 被引量：37H指数：5
- 供职机构：海南大学食品学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程更多>>
- 木瓜蛋白酶在亲和双水相系统中的分配行为及机制研究进展被引量：8
- 2013年
- 本文查阅相关文献,对木瓜蛋白酶传统提取方法(超滤法、盐析法、有机溶剂法、亲和层析法)及一些新兴的提取方法如双水相萃取法、亲和双水相法作了简要综述。利用金属螯合亲和双水相分配系统,能有效获得高纯度木瓜蛋白酶,但木瓜蛋白酶与亲和成相剂的相互作用及其分配行为与机制尚不清楚。研究木瓜蛋白酶与不同金属离子亲和成相剂之间的相互作用和吸附动力学模型;对酶的亲和结合物进行物理表征和分子模拟。阐明木瓜蛋白酶与不同金属离子亲和成相剂之间的亲和作用原理。将双水相萃取技术和亲和分配技术相融合,提出基于木瓜蛋白酶的金属螯合亲和双水相分配技术,该技术有望大力推动木瓜蛋白酶工业化高效制备的发展。
- 张海德王伟涛蒋欣欣
- 关键词：木瓜蛋白酶
- 槟榔油急性毒理试验及其自微乳特性研究被引量：1
- 2014年
- 研究槟榔油的毒理安全性及微乳化特性,研制出槟榔油自乳化传递系统,以便提高槟榔油的生物利用度。通过槟榔籽油对SD大鼠灌胃给药急性毒性试验,研究其安全性;通过溶解度试验、浊点测试、三相图的绘制和星点设计-效应面法的优化等试验,以自微乳乳化前后表征、微乳液粒径,Zeta电位为指标,优化筛选出各组分的最佳组合和最适配比。结果表明,进行毒性试验的动物均未见明显的毒性症状,体重未见明显影响,各主要生命器官剖检均未见异常;槟榔油自微乳的最佳配方为:槟榔油(19.56%)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(54.31%)、乙二醇单乙基醚(26.13%),平均粒径为54.34 nm,zeta电位为-33.82 mV。槟榔油安全范围大,无毒副作用,制备槟榔油自微乳稳定性好。
- 蒋欣欣张海德王伟涛廖芸
- 关键词：槟榔油毒理试验自乳化星点设计
- 木瓜蛋白酶的双水相萃取研究
- 木瓜蛋白酶由于其水解蛋白的能力较强,且具有较宽的pH和温度适应性,所以在食品、药品、日化等行业有较广泛的应用。因此对木瓜蛋白酶的分离纯化技术进行深入研究,提取高品质的木瓜蛋白酶具有重要的应用价值。而传统提取木瓜蛋白酶的方...
- 王伟涛
- 关键词：双水相木瓜蛋白酶PEG离子液体
- 文献传递
- 木瓜蛋白酶在离子液体双水相中的分配行为被引量：8
- 2015年
- 采用离子液体双水相提取木瓜蛋白酶。首先考察不同浓度、p H、温度的离子液体对木瓜蛋白酶活性的影响,其次考察不同离子液体双水相体系、离子液体侧烷基链长度及浓度、酶添加量、p H、温度对木瓜蛋白酶分配行为的影响。结果表明:[C4mim]Cl和[C4mim]Br体系萃取木瓜蛋白酶的效果比[C4mim]BF4体系好;高温(≥60℃)对离子液体双水相体系萃取木瓜蛋白酶不利。离子液体双水相萃取木瓜蛋白酶的最佳工艺条件:0.25 g·ml-1的[C4mim]Cl,0.35 g·ml-1的K2HPO4,p H 8.0,酶添加量2.0 mg·ml-1,30℃。此条件下木瓜蛋白酶的酶活性回收率达到95.16%,纯化因子达到1.5。为今后进一步研究该体系的放大实验或规模化生产奠定了基础。
- 王伟涛蒋志国张海德彭健许英豪董安华杨雪芳蒋欣欣
- 关键词：离子液体双水相木瓜蛋白酶萃取
- PEG/(NH_4)_2SO_4双水相相平衡数据的关联及木瓜蛋白酶在该体系中分配模型的建立被引量：4
- 2014年
- 为了研究木瓜蛋白酶在双水相中的分配行为,用浊点法测定了聚乙二醇(2000、4000、6000)/硫酸铵双水相体系在298.15K下的双节线和液液相平衡数据,采用Merchuk方程、Othmer-Tobisa方程和Bancroft方程对双节线数据、液液相平衡数据进行了关联,并建立了木瓜蛋白酶在PEG/(NH4)2SO4双水相体系中的分配模型。通过相关系数考察双水相各组分浓度与分配系数的相关度,得到分配系数的对数与上下相组分的浓度差相关度较高,提出了木瓜蛋白酶分配系数与双水相成相组分浓度差的经验关系式,木瓜蛋白酶分配系数的计算值与实验值之间的相对偏差小于10%且小于其他同类模型,表明实验建立的模型对木瓜蛋白酶在聚乙二醇(2000、4000、6000)/硫酸铵双水相体系中关联效果较好,可用于木瓜蛋白酶分配系数的计算,为双水相体系中木瓜蛋白酶酶活分配系数的工程计算和双水相萃取过程的设计提供参考。
- 董安华彭健许英豪王伟涛蒋欣欣张海德
- 关键词：双水相液液相平衡木瓜蛋白酶
- 木瓜蛋白酶在金属螯合亲和双水相中分配行为的研究被引量：4
- 2016年
- 利用金属螯合双水相亲和分配技术对木瓜蛋白酶的萃取进行了研究。考察了不同无机盐和浓度、PEG的分子量和浓度、亲和配基的加入量、pH、酶添加量对木瓜蛋白酶分配的影响,对不含亲和配基的双水相和含亲和配基的双水相萃取木瓜蛋白酶的效果进行比较。优化的分配条件为:质量分数17%PEG 4 000,1%PEG-IDA-Cu^(2+),18%Na_2SO_4,pH 7.0,酶添加量为2 mg/g,在此条件下,木瓜蛋白酶的酶活性回收率可达到90%左右,蛋白分配比达到5.11。结果表明,PEG 4 000/Na_2SO_4系统比PEG 4 000/(NH_4)_2SO_4系统更有利于木瓜蛋白酶亲和分配;无机盐的浓度和亲和配基的加入量是影响木瓜蛋白酶分配的关键因素;与不含亲和配基的双水相系统相比,亲和配基的加入可以提高木瓜蛋白酶在PEG相的分配,酶活性回收率和蛋白分配比可分别提高10%和2.0左右,表明金属鳌合双水相分配技术分离木瓜蛋白酶是可行的,为该体系的放大试验或规模化生产奠定了相应的试验基础。
- 蒋志国王伟涛张海德王燕华
- 关键词：双水相木瓜蛋白酶
- 木瓜蛋白酶在PEG-IDA-Fe^(3+)/(NH_4)_2SO_4双水相体系中亲和分配行为研究
- 2015年
- 目的:研究木瓜蛋白酶在PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO4亲和双水相体系中分配行为。方法:采用浊点法,构建双水相相图,考察各成相剂对木瓜蛋白酶活性的影响;研究不同PEG4000和(NH4)2SO4的质量分数、不同PEG-IDA-Fe3+的取代量时,木瓜蛋白酶在两相体系中分配行为的变化;用响应面法优化亲和双水相萃取木瓜蛋白酶的最佳分离条件;同时对木瓜蛋白酶在萃取体系中的结构进行表征。结果:当两相体系中p H6.9,PEG4000质量分数16%,(NH4)2SO4质量分数20%,PEG-IDA-Fe3+为3%时,木瓜蛋白酶的上相酶活性回收率达90.5%,蛋白分配系数达1.85,而其在PEG/(NH4)2SO4中的酶活回收率及蛋白分配系数都低于PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO4亲和双水相体系。结论:PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO亲和双水相系统能有效提高木瓜蛋白酶的分配效果,采用Fe3+螯合PEG成相剂的双水相萃取木瓜蛋白酶条件温和,不影响酶的特征结构。
- 彭健张海德董安华许英豪蔡涛王伟涛刘长玲
- 关键词：木瓜蛋白酶
- 离子液体双水相提取木瓜蛋白酶及条件优化被引量：9
- 2014年
- 采用[C4mim]Br/K2HPO4双水相体系提取木瓜蛋白酶。首先考察各成相试剂对木瓜蛋白酶活性的影响,其次考察了离子液体侧烷基链长度、离子液体浓度、酶添加量、pH、温度对木瓜蛋白酶分配行为的影响;并采用响应面法(CCD)优化[C4mim]Br/K2HPO4双水相萃取木瓜蛋白酶的条件。结果表明:离子液体对木瓜蛋白酶的活性影响较小,低浓度时还能促进酶活性,而无机盐对木瓜蛋白酶活性的影响较大;高温不利于离子液体双水相萃取木瓜蛋白酶;各因素对木瓜蛋白酶萃取的影响从大到小依次为K2HPO4的浓度、[C4mim]Br的浓度、酶添加量、pH。响应面优化得到的最佳萃取条件:0.30 g/mL的[C4mim]Br,0.30 g/mL的K2HPO4,pH 6.0,酶添加量3.0 mg/mL,温度30℃。在此条件下木瓜蛋白酶的酶活性回收率达到91.20%,纯化因子可以达到1.73。为该体系的放大实验或规模化生产提供理论指导。
- 王伟涛张海德蒋志国许英豪董安华彭健杨雪芳
- 关键词：离子液体双水相木瓜蛋白酶萃取
- PEG/Na_2SO_4双水相萃取木瓜蛋白酶的研究被引量：6
- 2014年
- 采用聚乙二醇(PEG)/硫酸钠(Na2SO4)双水相体系对木瓜蛋白酶进行分离提取。考察各成相试剂及pH对木瓜蛋白酶活性的影响,研究体系中不同相对分子量PEG、硫酸钠和PEG的质量分数、pH、酶添加量等因素对木瓜蛋白酶在两相体系中分配行为的影响,采用响应面法优化双水相萃取木瓜蛋白酶的最佳分离条件,并进行了实验室规模的放大。结果表明:Na2SO4的质量分数对分配行为的影响极显著,其次是PEG的质量分数,pH对分配行为的影响不显著。当两相体系中PEG的相对分子量为6000,质量分数为16.0%、Na2SO4质量分数为18.0%、pH7.0、酶添加量为1.0mg/g时,木瓜蛋白酶在两相体系中的分配系数最高可达3.1,可获得木瓜蛋白酶活性回收率82.6%。实验证明:响应面法优化双水相萃取木瓜蛋白酶的条件是可行的,可用于实际预测。
- 王伟涛张海德蒋志国董安华许英豪彭健王斐
- 关键词：木瓜蛋白酶双水相
