王正祥
- 作品数：279 被引量：1,214H指数：18
- 供职机构：天津科技大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程文化科学更多>>
- 在GPD1中整合表达bglⅡ基因改善酒精发酵被引量：2
- 2006年
- 依据同源重组的原理将来源于里氏木霉的β-葡萄糖苷酶基因bglⅡ整合到工业酿酒酵母染色体上的3-磷酸甘油脱氢酶基因GPD1中,通过G418抗性筛选得到重组子。实验数据表明,重组子Saccharomyces cerevisiaeCG1利用纤维二糖的能力显著提高,产甘油能力下降。引入外源基因后酵母性状与亲代相比没有显著差异,但生长时具自絮凝能力。当S·cerevisiaeCG1以玉米粉为原料进行浓醪酒精发酵,与亲代工业酿酒酵母比较,发酵液乙醇浓度得到提高,甘油含量降低,纤维二糖含量显著减少。
- 张梁洪剑辉章克昌王正祥石贵阳
- 关键词：纤维二糖Β-葡萄糖苷酶
- 一种具葡糖淀粉酶活性乳酸单体生产菌及其应用
- 本发明属于微生物、基因工程领域，涉及一种具葡糖淀粉酶活性乳酸单体生产菌种及其构建方法与应用。本发明建立了一种产葡糖淀粉酶乳酸生产菌株的构建方法，并结合该重组菌产葡糖淀粉酶的属性和乳酸单体的合成特征以淀粉液化液为原料建立了...
- 田康明牛丹丹王正祥路福平
- 文献传递
- 一种产酶菌株及其构建方法与应用
- 本发明属于基因工程和发酵工程领域，具体涉及一种产酶菌株及其构建方法与应用。所述方法是在表达载体非编码区克隆入温度诱导启动子λpL pR控制下的核酸酶抑制剂编码基因，将待表达的酶编码基因克隆入表达载体中获得酶重组表达质粒，...
- 牛丹丹王正祥申培立
- 一种15α‑羟化酶及其制备方法和应用
- 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种15α‑羟化酶及其制备方法和应用。所述突变体是借助易错PCR和定点突变的方法对目标基因进行突变，筛选获得的，突变体K<Sub>cat</Sub>值为原始15α‑羟化酶的2.5倍...
- 刘晓光路福平王正祥田康明郭凯
- 文献传递
- 理性设计和构建过量合成莽草酸的大肠杆菌代谢工程菌被引量：4
- 2013年
- 利用代谢工程手段理性改造野生大肠杆菌的莽草酸(Shikimic acid,SA)合成途径及相关代谢节点,以构建高产莽草酸的工程菌株。根据细胞代谢网络分析,利用Red-Xer重组系统连续删除了野生型大肠杆菌CICIM B0013的莽草酸激酶基因(aroL、aroK),葡萄糖磷酸转移酶系统(PTS)的关键组分EIICBglc的编码基因(ptsG)以及奎宁酸/莽草酸脱氢酶基因(ydiB)并系统评价了基因删除对细胞的生长、葡萄糖代谢和莽草酸积累的影响。aroL、aroK的删除阻断了莽草酸进一步转化成为莽草酸-3-磷酸,初步提高莽草酸的累积。删除ptsG基因使大肠杆菌PTS系统部分缺失,细胞通过GalP-glk(半乳糖透性酶-葡萄糖激酶)途径,利用ATP将葡萄糖磷酸化后进入细胞。利用该途径运输葡萄糖能够减少PEP的消耗,使得更多的碳代谢流进入莽草酸合成途径,从而显著提高了莽草酸的产量。在此基础上删除ydiB基因,阻止了莽草酸合成的前体物质3-脱氢奎宁酸转化为副产物奎宁酸(Quinic acid,QA),进一步提高了莽草酸的累积。初步发酵显示4个基因缺失的大肠杆菌代谢工程菌生产莽草酸的能力比原始菌提高了90多倍。
- 李明明陈献忠周丽沈微樊游王正祥
- 关键词：大肠杆菌基因删除莽草酸代谢工程
- 一种普鲁兰酶及其应用
- 本发明属于酶工技术程领域，具体涉及普鲁兰酶酶分子的组合定点突变、突变体的筛选与表达制备。本发明以SEQ ID NO.2所示氨基酸的长野芽胞杆菌普鲁兰酶(PulA)为基础，通过定向分子进化，获得最适作用温度得到提高或降低、...
- 王正祥牛丹丹田康明
- 重组过氧化氢酶与一种商品过氧化氢酶的性质比较被引量：2
- 2002年
- 将重组过氧化氢酶和市售一种商品过氧化氢酶的性质进行了比较 .重组酶的最适温度为70℃ ,某商品过氧化氢酶的最适温度为 4 0℃ ;与这种商品过氧化氢酶相比 ,重组酶的热稳定性更好 .重组过氧化氢酶和这种商品过氧化氢酶的最适 pH都是 7.0 ;重组酶和这种商品过氧化氢酶在pH 3～ 8的范围内均较为稳定 ;重组酶在室温放置 1个月后酶活力基本保持不变 ,而此种商品过氧化氢酶活力损失约 70 % ;金属离子对重组酶和这种商品过氧化氢酶都有抑制作用 ,抑制程度有所不同 ;EDTA抑制这种商品过氧化氢酶的活性 。
- 王凡强王正祥刘吉泉诸葛健
- 关键词：过氧化氢酶重组酶热稳定性
- 一种低聚半乳糖生产专用酶及其制备与应用
- 本发明属于酶工程技术领域，具体涉及生成低聚半乳糖的乳糖酶及其制备和应用。本发明以两种来源的乳糖酶(来源于环状芽胞杆菌B2301的BglD305和来源于环状芽胞杆菌ATCC 31382的BglD)分子为基础进行分子进化，获...
- 王正祥牛丹丹田康明
- 文献传递
- 有效利用木糖的肠道细菌的筛选及转化被引量：2
- 2003年
- 以木糖为惟一碳源筛选得到了 32株能利用木糖快速生长的肠道细菌 ,初步鉴定结果表明 ,有效利用木糖的菌株多为肺炎克雷伯氏杆菌 ,其次是大肠杆菌 .选择合适的质粒对其中的 94 7菌株、15 6 9菌株及E .coliJM 10 9进行转化 ,检验转化子中的质粒在无选择压力条件下的传代稳定性 ,结果野生型菌株的转化率均明显低于E .coliJM 10 9,质粒 pET 2 8a在所试验的几株菌中稳定性相对较差 ,pKK2 2 3 3能在 94 7菌株中稳定存在 .
- 孙金凤诸葛健王正祥
- 关键词：木糖肠道细菌质粒稳定性酒精发酵生产
- 一种乳糖酶突变体及其应用
- 本发明属于酶工程技术领域，具体涉及一种乳糖酶突变体及其应用。本发明以两种来源的乳糖酶(来源于环状芽胞杆菌B2301的BglD305和来源于环状芽胞杆菌ATCC 31382的BglD)分子为基础进行分子进化，获得合成低聚半...
- 牛丹丹王正祥田康明
