王红军
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 胰腺早期发育及终末分化细胞重编程为胰岛β细胞的研究进展被引量：5
- 2014年
- 1型糖尿病是一种由于自体免疫细胞破坏分泌胰岛素的?细胞而引起胰岛素绝对缺乏的自体免疫病。疾病患者需要依靠外源性途径来补给胰岛素,但胰岛素注射治疗不能根治病症,也不能有效地预防糖尿病并发症。多能性干细胞以及体细胞重编程产生胰岛素分泌细胞为根治1型糖尿病提供了可能。编程性的细胞能被用来进行移植治疗和药物筛选,为1型糖尿病的治疗带来了新的希望。当前,通过相关转录调节因子重编程终末分化细胞为胰岛?细胞已经取得了很大进展。文章对胰腺早期发育、胰腺相关转录调控因子及目前利用终末分化细胞重编程产生胰岛?细胞的研究内容进行了综述。
- 曹明君董焕生潘庆杰王红军董晓
- 关键词：胰岛Β细胞重编程
- 胚胎干细胞显微注射对小鼠和猪胚胎发育影响的研究被引量：1
- 2015年
- 旨在为小鼠和猪多能性干细胞嵌合体制作提供参考,探讨胚胎干细胞(Embryonic stem cells或Embryonic germ cells,ES/EG)显微注射及受体胚胎发育时期等对胚胎发育的影响。对小鼠ES细胞和猪EG细胞分别进行研究:(1)将小鼠ES细胞分别注入小鼠桑椹胚和囊胚,比较不同发育时期受体胚胎体外培养的发育率和孵化率,以及注射胚胎和未注射胚胎体外培养的发育率和孵化率。结果表明,显微注射后的桑椹胚体外培养发育率和孵化率分别为94.7%和70.2%,囊胚率分别为84.6%和80.8%,注射后桑椹胚体外培养发育率极显著高于囊胚(P<0.01),但注射后囊胚体外培养孵化率极显著高于桑椹胚(P<0.01);未注射胚胎(注射胚胎)的体外培养发育率和孵化率分别为96.6%(89.9%)和67.8%(75.2%),未注射胚胎发育率极显著高于注射胚胎(P<0.01),但注射胚胎孵化率极显著高于未注射胚胎(P<0.01)。(2)将猪EG细胞分别注入猪桑椹胚、早囊、囊胚及孵化囊胚,比较不同发育时期受体胚胎移植后妊娠率以及注射胚胎和未注射胚胎体外培养的孵化率,并对猪EG细胞显微注射针和固定针的规格进行了探讨。结果表明,显微注射的桑椹胚、早囊及囊胚移植后妊娠率为67%,而显微注射的孵化囊胚移植妊娠率为0,桑椹胚、早囊及囊胚移植后受体母猪妊娠率极显著高于孵化囊胚(P<0.01),由桑椹胚、早囊及囊胚注射后移植获得了两头嵌合体仔猪;显微注射和未显微注射的猪胚胎其孵化率分别为47.54%和72.97%,未注射胚胎孵化率极显著高于注射胚胎(P<0.01)。确定猪EG嵌合体制作过程中,注射针外径约为30μm,内径约为25μm;固定针外直径约为130~150μm,内径约为40μm。嵌合体制作时,胚龄宜早不宜迟,桑椹胚显微注射更易操作,而且导入的时期较早,ES/EG细胞在嵌合体组织中可以有很高的贡献率,故选择桑椹胚进行注射。在本试验条件下,显微注射对小鼠胚胎发育�
- 董晓冯书堂王红军
- 关键词：胚胎干细胞嵌合体显微注射
- 昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养
- 2019年
- 胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG)是来源于原始生殖细胞(primordial germ cells,PGC)的多潜能干细胞。本研究旨在优化昆明白小鼠EG细胞的培养条件。以昆明白小鼠10.5dpc胚胎PGC为材料,以丝裂霉素C处理的小鼠成纤维细胞(mouse embryonic germcells,MEF)为饲养层,培养小鼠EG细胞,以对影响小鼠EG细胞传代的因素进行探讨。用ELISA试剂盒定量检测MEF自身分泌生长因子SCF、bFGF、LIF的浓度;以培养液是否添加生长因子,观察PGC/EG的培养效果;比较了机械分割法、胰酶消化法和胶原酶Ⅳ消化法对EG传代培养的影响;对获得的EG进行多能性鉴定。结果表明,培养3d的饲养层上清液中含75.7ng/LSCF、125.7ng/LbFGF、196.6ng/LLIF,培养5d的饲养层上清液中含76.2ng/LSCF、136.2ng/LbFGF、214.2ng/LLIF;培养液添加生长因子显著提高了EG的克隆数、传代数(P<0.05);机械分割法与酶消化法对EG传代差异显著(P<0.05),而两种酶法对EG传代无显著影响(P>0.05);所分离的EG细胞显示AKP染色强阳性;EG体外培养时会自分化为神经样细胞、上皮样细胞;EG细胞呈Oct4、SSEA-1的免疫荧光检测阳性。结果提示,饲养层自身能分泌少量生长因子,但培养液中添加生长因子可显著改善昆明白小鼠EG培养效果,酶消化法更适合于昆明白小鼠EG的传代培养。
- 赵向远李洋刘延玲董焕声王红军董晓
- 关键词：胚胎生殖细胞饲养层分化
- 遗传背景和胎儿日龄对猪类胚胎生殖细胞培养的影响
- 2013年
- 本试验研究了遗传背景和胎儿日龄对猪类胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG)培养的影响,分别利用五指山猪(WZSP)和微型白猪胎儿为试验材料,比较了2种猪胎儿在EG培养方面的异同。试验结果表明,在相同条件下,2种猪均得到了可以传代的EG细胞集落,得到的EG集落AP染色呈阳性,体外培养能形成类胚体,类胚体继续培养能分化成多种细胞。试验比较了5个指标:平均第1次出现EG集落时间(T1)、第1次出现大批EG集落时间(T2)、第1次传代时间(T3)、平均传代间隔(T4)及传代情况(P),结果显示,WZSP和微型白猪2个品系差异不显著(P>0.05),表明WZSP和微型白猪都可以用来作为猪EG细胞建系的材料;分别采集第26、27、28天胎儿比较日龄对EG培养的影响。试验测量了不同日龄胎儿中肾大小,比较以上5个指标,观察胎儿日龄对建立猪EG细胞系方面的影响,结果表明第26、27、28天胎儿在EG培养方面差异不显著(P>0.05)。
- 董晓冯书堂王红军
- 关键词：胚胎干细胞
- 食源性肥胖小鼠胰岛素抵抗模型的建立被引量：5
- 2014年
- 本试验通过改良的高糖高脂饲料饮食诱导建立肥胖和胰岛素抵抗动物模型。我们将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为肥胖诱导组(DIO组)和正常对照组(CHOW组),分别喂以高糖高脂饲料和基础饲料4个月后,观察它们的体重和血糖情况,发现两组小鼠无论在体重还是血糖水平上差异都极其显著;对两组小鼠做葡萄糖耐量试验和胰岛素耐受试验,发现DIO组小鼠表现出明显的糖耐量异常和胰岛素抵抗现象;最后检测血清胰岛素水平发现,DIO组小鼠与CHOW组比较出现了明显的高胰岛素症状。故改良的高糖高脂饲料饮食诱导是一种经济实用、快速的肥胖和胰岛素抵抗动物模型建立的方法。
- 刘金凤董焕生潘庆杰王红军董晓
- 关键词：胰岛素耐受小鼠模型
- TLR4封闭多肽促进移植后胰岛细胞的存活及功能
- 目的在小鼠同种异体胰岛移植的模型中,有效地阻断TLR4信号传导,能够延长移植后胰岛细胞的存活时间,促进胰岛细胞的功能。本研究的目的旨在开发和利用TLR4封闭多肽来阻断TLR4的信号传导,以期在胰岛移植的临床中延长和改善移...
- 王红军董焕声董晓潘庆杰
- 文献传递
- 小鼠脂肪干细胞在不同培养基中生长状态及其细胞因子分泌
- 2015年
- 为筛选适合小鼠脂肪干细胞生长的体外培养基,本试验设计配制四种不同成份的培养基,分别为DMEM低糖培养基（1g/L）、DMEM高糖培养基（4.5g/L）、α-MEM培养基和DMEM F12 1∶1培养基并加入10%的优质胎牛血清（FBS）和1%的双抗（青霉素/链霉素P/S）,将相同来源的P3代小鼠脂肪干细胞按培养基成份不同分为四组,在体外培养扩增后显微镜下观察培养3d和4d后的细胞生长状态,利用酶联免疫检测技术检测不同条件培养基培养对干细胞因子、白细胞抑制因子、碱性成纤维生长因子分泌量的影响。结果表明,小鼠脂肪干细胞在四种不同成份培养基中培养3～4d后观察细胞形态及数量无明显差异,酶联免疫检测技术检测不同成份培养基对干细胞因子和碱性成纤维生长因子的分泌量有明显影响,DMEM高糖培养基更有利于干细胞细胞因子的分泌。
- 宋丽丽朱丰龙潘庆杰王红军董晓
- 关键词：脂肪干细胞细胞培养细胞因子
