王颖 作品数:37 被引量:74 H指数:5 供职机构: 广州军区广州总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体的制备 被引量:3 2006年 目的:用不同的方法制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,探索Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗可行的应用途径。方法:采用冻融法、逆相蒸发法、钙融合法分别制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,在透射电镜下观察脂质体颗粒的大小,应用紫外分光光度计检测蛋白疫苗的包封率,并用ELISA法对Hsp70-HSV-2gD抗原活性进行测定。结果:逆相蒸发法制备的Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体包封率最大,达到(53±2.0)%,所制备的脂质体粒圆形,直径大小较一致,约600 nm,具有抗原活性。结论:成功制备了Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,逆相蒸发法为制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体的最好方法。 樊建勇 杨慧兰 王捷 关蕾 王颖 成桂明 仕瑶慧关键词:单纯疱疹病毒 阳离子脂质体 蛋白疫苗 人源性单纯疱疹病毒Ⅱ型抗gD蛋白噬菌体单链抗体库的构建 目的 利用HSV-2病毒IgG、IgM抗体阳性的生殖器疱疹患者外周血淋巴细胞,构建人源单链抗体库.方法:取患者外周血淋巴细胞提取总RNA,逆转录成cDNA,以其为模板,分别扩增抗体重链及轻链可变区基因,将重链、轻链可变区... 王颖 杨慧兰 樊建勇pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体的制备 被引量:1 2006年 目的 制备pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体,为基因免疫和基因治疗寻找一种简单、经济、有效的DNA投递系统。方法 采用逆向蒸发法,用卵磷脂、胆固醇、十八胺制备成阳离子脂质体包封pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗,在透射电镜下观察脂质体颗粒的大小,应用紫外分光光度计检测DNA疫苗的包封率,免疫组化检测其转染真核细胞的效果。结果 制备的脂质体呈圆形、粒径大小较一致,平均粒径为580nm,DNA疫苗脂质体包封率达到50%~55%,能有效转染真核细胞。结论 成功制备了pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体。该方法作为提高基因免疫效果的简单、经济、有效的手段之一,为其进一步的研究打下了基础。 樊建勇 杨慧兰 关蕾 王颖 仕瑶慧关键词:单纯疱疹病毒 阳离子脂质体 包封率 DNA疫苗 HSV-2 LAT过表达vero细胞中microRNA的表达谱变化 被引量:3 2012年 目的分析过表达疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)潜伏相关转录子LAT后vero细胞microRNA表达谱的表达变化。方法通过化学合成的方法获得LAT基因的全长序列。构建HSV-2 LAT逆转录病毒表达载体pRetroQ-AcGFP1-C1,包装获得HSV-2 LAT基因过表达的逆转录病毒。利用microRNA芯片技术,分析感染逆转录病毒HSV-2 LAT后vero细胞microRNA表达谱的变化,得到因LAT基因过表达而产生变化的microRNA。结果通过microRNA芯片分析,逆转录病毒HSV-2 LAT感染vero细胞后,可引起hsa-miR-23a*、kshv-miR-K12-3、hsa-miR-943、hsa-miR-634、hsa-miR-1270 5种microRNA2倍以上上调;使hsa-miR-181a-2*、hsa-miR-450b-5p、hsa-miR-31、hsa-miR-24、kshv-miR-K12-12*5种microRNA2倍以上下调。结论 LAT基因过表达后可引起vero细胞microRNA表达谱的变化。 王颖 樊建勇 杨慧兰 陈剑云关键词:LAT MICRORNA 逆转录病毒 儿童线状IgA大疱性皮病1例 被引量:1 2010年 患儿男,2岁9个月。面颊、背部、双下肢泛发红斑、水疱伴疼痛15天。皮肤科情况:双侧面颊、耳廓可见红斑、糜烂,部分结痂。双下肢遍布黄豆大水疱,疱壁紧张,疱液清亮,尼氏征(-)。皮损组织病理示表皮下水疱形成,疱内可见浆液、中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞。免疫荧光IgA(+),基底膜可见线状沉积。诊断:儿童线状IgA大疱性皮病。 王颖 樊建勇 杨慧兰关键词:线状IGA大疱性皮病 儿童 HSV-2LATORF1在Vero细胞中的表达特性及其对细胞活性的影响 2013年 目的:研究单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)潜伏相关转录体(LAT)开放读码框1(ORF1)的表达特点及其对Vero细胞活性的影响。方法:双酶切和测序验证本实验室构建的HSV-2 LAT ORF1真核表达载体pEGFP-ORF1,并以转染试剂盒Xfect介导其转染至Vero细胞,通过RT-PCR和绿色荧光蛋白检验其在细胞中的表达,用MTT法进行细胞活性分析。结果:重组质粒表达的融合蛋白主要集中细胞核,而空质粒表达的绿色荧光蛋白在细胞核和细胞质中分布均匀;重组质粒对Vero细胞没有损伤作用。结论:HSV-2 LAT ORF1影响了绿色荧光蛋白的分布,可降低空质粒对细胞的损伤作用;其作用位点可能主要定位在细胞核中,为阐明HSV-2 LAT ORF1在潜伏复发中的功能奠定了实验基础。 吕芳彪 杨慧兰 樊建勇 刘艳华 张丽 王颖关键词:LAT 转染 绿色荧光蛋白 HSV-2 LATs对宿细胞miRNAs调控机制的生物信息学分析 王颖 樊建勇 杨慧兰CpG DNA诱导抗生殖器疱疹保护性免疫的应用前景 2005年 天然免疫是人体抵抗生殖器疱疹的第一道防线,在急性感染早期限制病毒复制并促进获得性免疫。最近发现,哺乳动物的天然免疫系统,通过TLR特异识别保守分子细菌DNA;阴道局部使用人工合成的细菌DNA(即CpG ODN),在疾病动物模型中证实能诱导强大的抗生殖器疱疹的免疫保护作用。这为临床上制定抗生殖器疱疹的新策略提供了科学依据。本文旨在概述CpG DNA诱导抗生殖器疱疹免疫的新进展和发展趋势。 成桂明 曹春来 关蕾 王颖 杨慧兰关键词:生殖器疱疹 天然免疫 保护性免疫 天然免疫系统 疾病动物模型 人疱疹病毒2型LAT对Has-mir-634下调细胞周期蛋白1表达的研究 王颖 樊建勇 杨慧兰HSV-2型2.2kb潜伏相关转录子细胞生物学效应 目的 研究人单纯疱疹病毒2型(herpes simple virus type 2,HSV-2)2.2kb潜伏相关转录体(latency associated transcript,LAT)对体外培养Hela细胞的生物学... 毕建军 杨慧兰 樊建勇 王颖 李翠华 梁洁