申旭光
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：华中科技大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家高技术研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 基于BP神经网络的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶发酵软测量建模被引量：2
- 2010年
- 为建立洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)脂肪酶发酵过程的软测量模型,运用BP神经网络对洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的发酵过程进行软测量建模,并利用遗传算法对神经网络的初始权值和阈值进行优化,实现模型加快收敛速度,达到全局最优解效果。该模型能够比较精确地模拟菌体生长、底物消耗以及发酵产酶的过程动态,具有良好的泛化能力,说明BP神经网络结合遗传算法在洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶发酵过程的模拟与预测中是一种高效快速的方法。
- 汪小锋付强申旭光杨江科闫云君
- 关键词：BP神经网络遗传算法发酵
- 毕赤酵母中FLD1启动子调控解脂耶氏酵母脂肪酶LIP2表达的研究
- 解脂耶氏酵母脂肪酶LIP2 (YlLIP2)是一种高活力的脂肪酶，具有重要的工业应用前景。本文克隆了甲醛脱氢酶启动子 (PFLD1)基因，并以pPICZαA质粒为基础构建了带有PFLD1启动子和YlLIP2基因的重组质粒...
- 申旭光
- 关键词：脂肪酶解脂耶氏酵母毕赤酵母启动子
- 带His-tag的解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2在毕赤酵母中的表达及纯化被引量：5
- 2011年
- 将去自身信号肽并且N-端带6×His标签的YlLip2基因克隆至表达载体pPIC9K中,电转化GS115获得高效表达脂肪酶His6-YlLip2的基因工程菌。筛选到的阳性克隆子摇瓶发酵脂肪酶活力最高为400U/ml。对重组毕赤酵母在10 L发酵罐中表达His6-YlLip2的分批补料发酵工艺进行了初步优化,探讨了培养基、pH、温度对生物量和重组蛋白表达量的影响。结果表明:采用FM22培养基,诱导温度为25℃,pH 5.0,甲醇诱导114 h后His6-YlLip2的最高酶活力达到3160U/ml。SDS-PAGE分析表明,蛋白的分子量大约为38kDa。重组的His6-YlLip2经镍柱一步纯化后的纯度达到95.43%,比酶活达到4250U/mg。
- 汪小锋申旭光赵鹤云孙永川纪昌涛闫云君
- 关键词：毕赤酵母解脂耶氏酵母组氨酸标签高密度发酵脂肪酶
- 毕赤酵母中表达透明颤菌血红蛋白提高重组脂肪酶的表达被引量：7
- 2011年
- 解脂耶氏酵母胞外脂肪酶Lip2(YlLip2)是一种具有广泛应用前景的工业酶。为了改善高密度发酵生产YlLip2过程中的溶氧限制,提高YlLip2的表达量,将YlLip2基因lip2和透明颤菌血红蛋白(VHb)基因vgb分别置于AOX1启动子和PsADH2启动子的调控之下,进行YlLip2和VHb在毕赤酵母中的共表达。PsADH2启动子来源于树干毕赤酵母Pichia stipitis,在低氧条件下能被激活。SDS-PAGE和CO-差式光谱分析表明,YlLip2和VHb在重组菌中成功实现了共表达。在氧限制性条件下,VHb表达的细胞(VHb+,GS115/9Klip2-pZPVT)与对照细胞(VHb?,GS115/9Klip2)相比,摇瓶和10 L发酵罐中YlLip2表达量分别提高了25%和83%。此外,在低氧条件下,VHb+细胞在10 L发酵罐中的生物量也比VHb?细胞高。文中也获得了一株表达了VHb的并携带有多个lip2基因拷贝的克隆子GS115/9Klip2-pZPVTlip2 49#,在低氧条件下,该克隆子在10 L发酵罐中的最高脂肪酶水解活力达33 900 U/mL。因此,在毕赤酵母中用PsADH2启动子表达VHb,同时增加lip2基因的拷贝数是提高YlLip2表达量的一种有效策略。
- 汪小锋孙永川申旭光柯锋徐莉刘云闫云君
- 关键词：脂肪酶透明颤菌血红蛋白解脂耶氏酵母毕赤酵母
