童煜
- 作品数：7 被引量：51H指数：5
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HMG-CoA还原酶基因多态性与血浆血脂的关系被引量：11
- 2003年
- 目的 探讨 3-羟 - 3甲基戊二酰辅酶 A( 3- hydroxy- 3- methylglutaryl coenzyme A,HMG-Co A)还原酶基因多态性在中国汉族人群中的分布及其与冠心病 ( coronary heartdisease,CHD)的关系。方法 用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性方法分析 HMG- Co A还原酶基因第 2内含子区 Scr F1酶切多态性。结果 Scr F1多态位点等位基因 A、a频率在 CHD组和正常对照组分别为 0 .5 19、0 .4 81和 0 .4 4 0、0 .5 6 0。基因频率分布符合 Hardy- Weinberg平衡定律。Scr F1酶切多态性基因型频率、等位基因 A、a频率在组间比较差异无显著性 ( P>0 .0 5 ) ,但是 ,基因型为 AA的冠心病患者 ,其血浆极低密度脂蛋白、胆固醇水平显著高于其他基因型患者 ( P<0 .0 5 )。中国人 Scr F1多态位点 A、a等位基因频率与欧洲白人比较差异有显著性 ( 0 .4 4 vs0 .5 5 ,0 .5 6 vs0 .4 5 ,P<0 .0 5 ) ,可能由于标本的种族来源不同所致。结论 Scr F1酶切多态性与 CHD无相关性 ( P>0 .0 5 ) ,但是 ,患者组 AA基因型与血浆极低密度脂蛋白、胆固醇水平密切相关 ( P<0 .0 5 )
- 童煜张思仲苏智广孔祥东施佳军张立张恒愉张克兰
- 关键词：HMG-COA还原酶基因多态性血浆血脂冠心病聚合酶链反应
- 卵磷脂胆固醇酰基转移酶基因单核苷酸多态性与冠心病脂代谢易感性的关联研究被引量：11
- 2003年
- 目的 检测卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (lecithincholesterolacyltransferase ,LCAT)基因 3个编码区单核苷酸多态位点在中国人群中的分布频率 ,并初步探讨它们与脂代谢和冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronaryatheroscleroticheartdisease ,CHD)易感性的关系。方法 采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性方法 ,分析 2 0 9名正常人和 2 0 3例CHD患者中 60 8C/T、911T/C和 1188C/T(参照序列 :NM 0 0 0 2 2 9) 3个位点的多态性。结果 60 8C和 60 8T等位基因频率分布符合Hardy Weinberg平衡。CHD患者组 60 8T频率显著低于正常人群 (P =0 .0 3 4)。与无 60 8TCHD患者相比 ,具有 60 8T的CHD患者的血浆高密度脂蛋白胆固醇显著升高 (P =0 .0 15 )。 911T/C和 1188C/T在两组中均未检出。结论 LCAT基因 60 8T等位基因与CHD患者较高的血浆高密度脂蛋白胆固醇水平相关联 ,可能与中国人CHD相关。 911T/C和 1188C/T在中国人群中非常罕见。
- 张克兰张思仲郑克勤贺勇张立苏智广孙岩施佳军孔祥东童煜
- 关键词：单核苷酸多态性冠心病脂代谢易感性
- 3-羟-3甲基戊二酰辅酶A还原酶及他汀类药物被引量：6
- 2003年
- 3 羟 3甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶是胆固醇合成的限速酶 ,它是胆固醇代谢的最重要的酶之一。HMG CoA还原酶的抑制剂———他汀类药物是目前广泛用于临床的降脂药 ,它不但可降低血浆胆固醇水平 ,还可防止动脉粥样硬化。
- 童煜苏智广张思仲
- 关键词：HMG-COA还原酶他汀类药物
- 血管紧张素原基因单倍型与原发性高血压的关联研究被引量：11
- 2002年
- 目的 研究中国人群中血管紧张素原 (angiotensinogen,AGT)基因多态性及单倍型与原发性高血压的关系。方法 在 335例高血压患者与 196名血压正常人中采用 PCR-限制性酶切片段长度多态性法检测血管紧张素原基因的多态性 ,同时用最大期望值方法进行两位点连锁不平衡和三位点的单倍型分析。结果 在 M2 35 T和 A- 2 0 C,M2 35 T和 A- 6 G,A- 2 0 C和 A- 6 G位点观察到了连锁不平衡 (P<10 - 4 )。病例 -对照检验显示 T2 35等位基因频率在高血压组中高于对照组 ,但所有单倍型频率分布在高血压组和正常对照组间差异无显著性。结论 受检人群中 AGT基因各单倍型与高血压未见关联 ,但 AGT基因T2 35位点可能是一种重要的高血压风险因子。
- 孔祥东张思仲杨宇霞郑克勤童煜施佳军张克兰苏智广陈炜
- 关键词：单倍型限制性片段长度多态性
- 一种单核苷酸多态性的单倍型分析技术被引量：3
- 2005年
- 运用多步PCR和测序技术,完成基因组中相距较远的单核苷酸多态位点的单倍型构建。通过设计2条等 位基因特异性引物,扩增大片段DNA(10kb左右),以此大片段DNA作为下一轮PCR反应的模板,再在该片段 中设计待检测区域的PCR引物,进行第2轮PCR。对PCR产物进行测序分析,确定其多态位点处的等位基因。 结合第1轮PCR中的等位基因特异性引物,即可确定该大片段DNA中不同单核苷酸多态性构成的单倍型。以脂 蛋白脂酶基因为例,应用其启动子区以及第4外显子区的等位基因特异性引物扩增约16kb的DNA片段,然后检 测位于该片段中第2、3外显子的多态性。在LPL基因第2内含子中发现了+13557G→A多态性。经分析确定 出-421G/+13557G/+15222A、-421A/+13557G/+15222A、-421G/+13557G/+15222G、-421G/+ 13557A/+15222A等4种单倍型。等位基因特异性PCR结合小片段测序是一种快捷高效的对相距较远的多个 SNP进行单倍型构建的新策略。
- 苏智广张思仲肖翠英童煜
- 关键词：单核苷酸多态性单倍型
- 纳豆激酶原核表达载体的构建及其活性鉴定被引量：9
- 2007年
- 利用引物搭桥的方法,经PCR扩增,获得了纳豆激酶成熟肽基因(NK),从而构建了大肠杆菌表达质粒NK/pTWIN1,NK/PET32a及NK/PML-c2x,经分别转化宿主菌ER2566,BL21和ER2566,获得了转纳豆激酶基因重组菌.结果表明,NK/pTWIN1-ER2566和NK/PET32a-BL21的纳豆激酶蛋白表达量较高.本研究选用NK/pTWIN1-ER2566作为表达菌株,对其进行发酵表达.SDS-PAGE显示,目的蛋白约占菌体总蛋白的36%,该蛋白是以包涵体形式存在的.包涵体经收集、蛋白变性及复性,并经过SP Sepharose分离纯化,得到了纯化的纳豆激酶蛋白,琼脂糖-纤维蛋白平板法测出1mg纳豆激酶干粉的溶栓活性相当于600u尿激酶.本文从基因工程角度研究纳豆激酶基因的克隆、表达及纯化,为利用基因工程菌生产纳豆激酶奠定了基础.
- 童煜陈守春张思仲
- 关键词：纳豆激酶克隆纯化活性测定
