肖伟
- 作品数：12 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中山大学中山医学院眼科学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律经济管理更多>>
- 体外培养人视网膜微血管内皮细胞屏障功能的研究被引量：8
- 2009年
- 目的:研究原代培养的人视网膜微血管内皮细胞屏障功能。方法:对人视网膜微血管内皮细胞进行原代培养并鉴定,第4代细胞接种于Polyester(PET)膜上,不同时点对滤膜表面行显微镜观察,通过紧密连接相关蛋白occludin的表达,间接反映细胞之间紧密连接的形成,应用共聚焦免疫显微镜观察2、3、4周occludin表达的变化;跨膜电阻(TER)检测屏障的稳定性,并通过测量正常培养条件和5μg/L的血管内皮生长因子(VEGF)干预下辣根过氧化物酶(HRP)通透性的改变反映屏障特性。结果:成功培养了人视网膜微血管内皮细胞,纯度可达95.8%。细胞接种1周后融合为单层,接种后2、3、4周细胞密度无明显变化,细胞接触紧密,呈单层生长,可见occludin在细胞相邻边界规则的表达;occludin在2、3、4周,在细胞内的分布逐渐移向相邻细胞交界处;2周时视网膜微血管内皮细胞跨上皮细胞电阻达(120.62±3.97)Ω/cm2,2、3、4周差异无显著(P>0.05);单层细胞的通透性检测结果显示,HRP从滤膜上方到达下方随时间延长呈线性增加,且在VEGF的干预下,各时点通透率明显增加(P<0.05)。结论:利用体外培养的人原代视网膜微血管内皮细胞建立单层细胞具有典型的屏障功能特性,可作为体外研究血视网膜内屏障的有用模型。
- 李建桥江静波罗燕刘清云肖伟史煜马红婕唐仕波
- 关键词：血管内皮细胞细胞培养血视网膜屏障
- 微小RNA与眼底疾病被引量：3
- 2013年
- 微小RNA（miRNAs）是一类内源性的非编码小分子RNA，广泛存在于真核生物细胞中。miRNAs通过抑制mRNA翻译或降解mRNA的方式下调目的基因的表达水平，被认为是基因转录后表达调控的主要方式，参与调节细胞的增生、分化、死亡等生物学过程。近年来的研究表明，miRNAs的表达水平和／或功能的改变与糖尿病视网膜病变（DR）、年龄相关性黄斑变性（AMD）、视网膜母细胞瘤（RB）等多种严重致盲性眼底疾病的发生、发展、治疗和预后密切相关。就近年来miRNAs与眼底疾病的研究进展进行综述。
- 肖伟何明光
- 关键词：微小RNA眼底疾病基因表达调控
- 论戒毒执法中的问题及建议
- 吸毒是全世界都面临的问题，我国对待吸毒问题处理的方式主要有行政处罚、强制隔离戒毒和社区戒毒等，还有劳教所、看守所和监狱实际上也承担着戒毒任务。但这些处理方式因为各有不同的性质、功能和作用，也隶属于不同的部门管理，适用不同...
- 肖伟
- 关键词：劳动教养司法监督
- 视网膜新生血管形成时紧密连接蛋白Claudins表达的时空变化的研究
- Claudins是近年发现的一个多基因家族，至今已发现超过24个家族成员，Claudins蛋白被认为是形成紧密连接的骨架。在不同的组织和不同的病理生理状态下，Claudins家族成员的表达与分布有明显变化，屏障功能相应改...
- 肖伟
- 关键词：视网膜病变新生血管生长蛋白表达
- 文献传递
- 靶向血管内皮生长因子的RNA干扰抑制氧诱导视网膜病变小鼠视网膜新生血管生成的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨玻璃体腔注射靶向血管内皮生长因子（VEGF）的RNA干扰慢病毒抑制氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠视网膜新生血管生成的作用及其机制。方法实验研究。构建4对针对靶基冈小鼠VEGF的siRNA干扰载体，筛选并进行慢病毒包装。60只C57Bif6J小鼠分成4组（每组15只）：正常对照组．OIR模型组，OIR＋空载体组，OIR＋VEGF-RNA干扰组。OIR＋空载体组和OIR＋VEGF-RNA干扰慢病毒组的小鼠在生后第5天玻璃体腔注射相应的1μ1的7.5×10^7空载体慢病毒和VEGF-RNA干扰慢病毒。后3组小鼠在生后第7天建立OIR模型。第17天时FITC-Dextran灌注视网膜铺片观察4组小鼠视网膜血管形态及面积变化，视网膜铺片免疫荧光染色检测紧密连接蛋白Claudin-5和Occludin的分布变化．Westernblot检测VEGF、磷酸肌醇3激酶（P13K）、酪氨酸蛋白激酶SRC、磷酸化细胞外信号调节激酶（P-ERK）蛋白表达量的变化。数据采用单因素方差分析进行比较。结果FITC-Dextran灌注视网膜铺片显示正常组视网膜血管分布呈均匀网状；RNA干扰组新生血管面积（0．271399mm^2）明显较OIR模型组（1.212782mm^2）、空载体组（1．152504mm^2）少（F=449．924，P〈0．01）。OIR模型组和空载体组间差异无统计学意义，其余两两间差异均有统计学意义（P〈0．01）。视网膜铺片免疫荧光染色显示紧密连接蛋白Claudin-5和Occludin在RNA干扰组中与正常组相似，呈均匀光滑线性分布，而在OIR模型组、空载体组的分布中断、不均匀，在新生血管团中可见团块状的强荧光；VEGF的RNA干扰组中VEGF、P13K、酪氨酸蛋白激酶SRC和p-ERK的蛋白表达量较OIR模型和空载体组低。结论玻璃体腔注射靶向VEGF的RNA干扰慢病毒能有效抑制OIR小鼠模型中VEGF及其下游通路蛋白的表达．从而抑制视网膜新生血管的形成．为临床上早产儿视网膜病变的防治提供了新思路和新途径。
- 毛娅妮李正原黄娟肖伟陈晓云凌士奇项道满
- 关键词：RNA干扰视网膜新生血管化视网膜病
- 过表达Claudin-5增强体外培养的人视网膜微血管内皮细胞屏障功能被引量：2
- 2014年
- [目的]探讨过表达Claudin-5后对视网膜血管内皮细胞屏障功能的影响.[方法]体外原代培养人视网膜血管内皮细胞（hRVEC）.当接种至transwell膜的P2～P5代hRVEC近60％融合时进行慢病毒介导的转染实验.hRVEC分为对照组,慢病毒空载体组,慢病毒介导的Claudin-5高表达转染组.荧光活细胞动态显微镜观察慢病毒介导的转染效率.Western Blot检测各组细胞中Claudin-5表达水平.CCK8法检测病毒转染对细胞的毒性.待接种至transwell膜的hRVEC培养2周后建立稳定的单层人视网膜血管内皮细胞屏障模型后,电阻仪检测hRVEC屏障的跨内皮电阻（TER）,异硫氰酸荧光素右旋糖酐检测hRVEC屏障的通透性.[结果]慢病毒可以介导Claudin-5在hRVEC高表达,其转染率达60％,Western Blot检测证实Claudin-5蛋白表达显著增加.CCK8检测表明慢病毒转染不影响细胞的活性,对细胞毒性小;过表达Claudin-5后也不影响hRVEC的增殖;过表达Claudin-5后能降低体外单层人视网膜血管内皮细胞屏障模型的通透性,并提高其TER.[结论]过表达Claudin-5后可以显著提高体外人视网膜血管内皮细胞屏障的功能,这为视网膜血管性疾病的治疗提供新思路.
- 田蓉刘秋慧蔡萌李静王菁肖伟罗燕
- 关键词：CLAUDIN-5慢病毒转染
- 不同年龄组人视网膜微血管内皮细胞特性的研究(英文)
- 2009年
- 目的:研究2个不同年龄组供体来源的人视网膜微血管内皮细胞的特性。方法:分离培养2个不同年龄组的人视网膜微血管内皮细胞,分别为出生后30 d内和40-65岁供体组。视网膜微血管内皮细胞具有特异性表达,通过免疫荧光染色CD31、vWF和乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)的摄取来定位内皮细胞的标记。通过使用matrigel基质胶培养细胞,激光共聚焦显微镜和Western blotting分析vWF在细胞内的分布,评估2组细胞管状结构形成能力以及vWF在细胞内的不同分布。结果:从2个不同年龄组中成功地获得高纯度视网膜微血管内皮细胞。2组在种到基质胶后6 h均能形成典型的二维管腔样结构,但婴幼儿组评分比成人组高(27.2%±2.2%),且二维管腔样结构在30 h仍可较好地维持,而成人组已看到部分自发降解。另外可见到vWF在婴幼儿组主要表达在细胞核内,而成人组主要表达在胞浆。结论:不同年龄来源的人视网膜血管内皮细胞具有某些自身特定的性状特征,在与年龄相关的疾病的体外研究中,供体年龄因素可能造成的影响应该得到一定的重视。
- 李建桥罗燕马伟丁小燕袁玲肖伟李杰史煜唐仕波
- 关键词：血管内皮细胞视网膜WILLEBRAND因子
- 组织、领导传销活动罪司法适用问题研究
- 2009年2月28日第十一届全国人民代表大会常务委员会第七次会议通过《中华人民共和国刑法修正案（七）》，新增组织、领导传销活动罪。本文从司法实践对组织、领导传销活动罪的构成要件的认定切入，对该罪的的要件属性、与相关犯罪活...
- 肖伟
- 关键词：传销活动犯罪构成司法适用
- 文献传递
- 复方血栓通对人视网膜血管内皮细胞抗氧化损伤的保护作用及其机制被引量：9
- 2011年
- 背景氧化损伤是引起内皮细胞功能障碍和细胞死亡的重要因素之一，它还可导致视网膜血管性疾病的发生。复方血栓通对多种视网膜血管性疾病有一定的疗效，但分子机制尚不明确。目的研究复方血栓通对叔丁基过氧化氢（t—BHP）诱导的人视网膜血管内皮细胞（RVECs）氧化损伤的保护作用及其机制。方法分离健康人供体眼的视网膜，用组织块培养法进行人RVECs的原代培养，并用FITC-vwF染色流式细胞仪对培养细胞进行鉴定。取3～5代的细胞用于实验，在含有5×10^4个／L细胞密度的培养孔中分别加入质量浓度为0．0625、0．1250、0．2500、0．5000、1．000g／L复方血栓通溶液，各质量浓度复方血栓通组和t-BHP模型组均加入终浓度为100μmol／Lt-BHP，干预24h后用MTT法检测各组人RVECs的吸光度（A490）值以评估复方血栓通的细胞毒性。t-BHP模型组分别加入终浓度为75、100、200和300μmol／L的t-BHP，相应的复方血栓通组在不同浓度t-BHP造成细胞氧化损伤的同时均加入终质量浓度为0．2500g／L复方血栓通溶液，干预6h后，用MTT法检测复方血栓通对t-BHP引起氧化损伤的作用。用Annexin V—FITC／PI双染流式细胞仪检测各组细胞的凋亡和坏死率；用倒置显微镜和Hoechst33258细胞核染色观察各组细胞的形态学，利用免疫荧光法检测人RVECs中蛋白氧化损伤和DNA氧化损伤的生物标记物硝基酪氨酸（NT）和8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的表达；Western blot法检测t-BHP损伤6、12、24h各组细胞核转录因子．KB（NF—KB）、p53、bcl-2和bax的蛋白表达水平。结果正常对照组、0．0625、0．1250、0．2500、0．5000、1．000g／L复方血栓通组人RVECs的A490值总体比较差异无统计学意义（F=1．989，P〉0．05），75、100、200和300μmol／L的t-BHP作用后细胞存活率下降，而相应的复方血栓通组细胞存活率均较t-BHP模型组升高，差�
- 陈晓云李建桥朱晓波肖伟黄娟李涛唐仕波罗燕
- 关键词：复方血栓通视网膜血管内皮细胞核转录因子-ΚB凋亡
- 利率市场化下我国商业银行货款定价研究
- 本文主要基于现代商业银行贷款定价的信贷配给、利率的逆向选择、激励效应和贷款担保等经典理论依据，概括了我国商业银行的贷款定价演变过程、常用方法以及造成的扭曲现象，分析西方商业银行常用的三种的贷款定价方法在我国现阶段应用的难...
- 肖伟
- 关键词：商业银行货款业务利率市场化
