胡良凯 作品数:29 被引量:88 H指数:6 供职机构: 上海市杨浦区市东医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 政治法律 更多>>
白介素-10在抗肝纤维化中的作用 被引量:5 2004年 白介素-10(IL-10)是一种主要由Th_2细胞产生,抑制Th_1细胞释放细胞因子的免疫调节性细胞因子。IL-10可通过抑制库弗细胞活化及炎性介质、细胞因子、氧自由基等释放,抑制核因子-κB活性,参与调节肝再生反应等来发挥抗肝纤维化作用。IL-10有望成为治疗肝纤维化的重要药物。 胡良凯 陈颖伟 李定国关键词:白介素-10 IL-10 抗肝纤维化 TH2细胞 TH1细胞 细胞因子 重组复制缺陷型腺病毒AdIL-10构建及其在HSC中的表达 2005年 目的利用AdEasy系统构建重组复制缺陷型腺病毒AdIL 10 ,并观察其在肝星状细胞 (HSC)中的表达。方法从SD大鼠脾脏单核细胞中抽提总RNA ,通过RT PCR获得鼠IL 10cDNA片段 ,插入穿梭质粒pAdTrack巨细胞病毒 (CMV)启动子下游 ,构建重组穿梭载体pAdTrack CMV IL 10 ,线性化后与AdEasy 1电穿孔共转化BJ5 183,获得重组腺病毒质粒pAdIL 10。pAdIL 10用Lipo fectamin包装转染HEK 2 93细胞 ,获得重组腺病毒AdIL 10。将AdIL 10体外感染HSC ,3d后抽提HSC总RNA ,以RT PCR检测IL 10的表达。结果通过酶切和测序法筛选出pAdIL 10 ;经 2 93细胞包装 ,3d后观察到绿色荧光蛋白 (GFP)表达 ;AdIL 10感染HSC3d后观察到GFP表达 ,通过RT PCR可检测到IL 10的表达。结论利用AdEasy系统可制备重组腺病毒AdIL 10 ;AdIL 10感染HSC后可表达IL 胡良凯 陈颖伟 李定国关键词:HSC 缺陷型 293细胞 总RNA 体外导入外源IL-10基因对HSC增殖的影响 被引量:3 2005年 目的利用重组复制缺陷型腺病毒AdIL 10将外源IL 10基因导入肝星状细胞 (HSC) ,并观察其对HSC增殖的影响。方法将本实验室自行构建的重组腺病毒质粒pAdIL 10用Lipofectamin包装转染HEK 2 93细胞 ,即可获得重组腺病毒AdIL 10。应用胶原酶原位灌注和密度梯度离心法分离大鼠HSC ,当HSC生长至 80 %密度时 ,以 5× 10 4细胞 /孔接种于 96孔板 ;HSC培养 2 4h后 ,取病毒AdIL 10以感染复数 (MOI) 5 0感染HSC ;用MTT法检测HSC增殖率。结果pAdIL 10经 2 93细胞包装 ,3d后可观察到绿色荧光蛋白 (GFP)表达 ;AdIL 10感染HSC 3d后可观察到GFP表达 ,且HSC增殖受到抑制。结论重组腺病毒AdIL 胡良凯 陈颖伟 李定国关键词:HSC 增殖率 293细胞 外源 上海市杨浦区部分地区社区居民结直肠癌筛查结果分析 2016年 目的探讨社区结直肠癌高危人群进行结肠镜检查的意义。方法:对2013-2014年上海市杨浦区部分地区354例结直肠癌高危人群进行结肠镜检查。结果:354例病例中,共检查出结直肠息肉204例,结直肠癌15例,其它病变22例。结论:社区开展结直肠癌筛查能有效地减少结直肠癌的发生率及病死率。 陈建清 胡良凯 张建民 施敏 王波 荣文关键词:结直肠癌 结直肠息肉 结肠镜 整合素与肝纤维化 被引量:4 2003年 整合素(integrin)是一类跨膜糖蛋白受体家族分子,主要介导细胞-细胞以及细胞-细胞外基质的粘附。细胞外基质-整合素-细胞骨架组成的焦点附着斑能激活粘附斑激酶,再通过Ras途径激活丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK),MAPK激活后通过调节基因表达等改变细胞行为,参与肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的增殖、收缩、粘附及迁移的调节。整合素在肝纤维化发生发展中的作用已成为当前研究的一个热点。 胡良凯 李定国关键词:整合素 肝纤维化 肝星状细胞 体外导入外源IL-10基因对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌的影响 被引量:2 2007年 目的:利用重组复制缺陷型腺病毒AdIL-10将外源IL-10基因导入肝星状细胞并观察其对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ胶原分泌的影响。方法:用传至1~2代的大鼠肝星状细胞以2×10^5/孔接种于24孔板,按每组6复孔分为三组:(1)单纯肝星状细胞培养组;(2)AdGFP对照组:肝星状细胞培养24h后取病毒AdGFP以感染复数50感染肝星状细胞;(3)AdIL-10组:肝星状细胞培养24h后取病毒AdIL-10以感染复数50感染肝星状细胞。3d后分别收集各组肝星状细胞,提取总RNA。结果:与单纯肝星状细胞培养组相比,AdIL-10组的IL-10mRNA表达明显增强(P〈0.01),而AdGFP对照组的IL-10mRNA表达差异无统计学意义(P〉0.05);AdIL-10组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达明显降低(P〈0.01),而AdFP对照组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:重组腺病毒AdIL-10感染肝星状细胞后可抑制肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ胶原分泌。 胡良凯 孙巧玲 梁立维 张建民 李定国关键词:白介素-10 重组腺病毒 肝星状细胞 医院高知识群体党员发展工作实践与探析 2024年 探索把公立医院高知识群体中先进分子吸收为党员的可行性策略,把我们党建设成为优秀人才高度密集的政党。方法 通过文献研究法、专家座谈法,紧紧围绕医院高知群体的政治情感、信念、价值观及党建方法等方面,设计《医院高知识群体发展党员现状分析与对策》调查表,以二级甲等综合性医院的高知识群体为研究对象,进行问卷调查365人次、个案访谈15人次,剖析新时代医疗卫生系统高知群体政治取向的问题,阐明发展党员现状的成因,论述高知识群体党员发展工作的重要意义及实践成效。结果 经过5年的实践研究,2023年发展对象4名,35岁以下占比50%,硕士研究生及以上占比50%,副高职称及以上50%,高知识群体占比从2018年0%提升至2023年75%,专业技术职称、学历和医生占比上均显著提升。结论 在高知群体中发展党员的有效路径:①深入排摸考察,建立高知识群体入党数据库;②构建“一对一”思想导师联系人,增强党建引导力;③实施“全流程跟踪培养”,严把高知识群体入党接收关;④建立区域化党建联盟,加强跨界交流、协同推进。⑤以“双带头人”跨学科引领党建与业务深度融合;⑥强化党外杰出科研人才的政治吸纳;⑦贯通新入职优秀高知人才接续培养工作机制。 张艺 田燕雯 胡良凯关键词:高知识群体 党员发展 外源Smad7基因对四氯化碳诱导大鼠实验性肝纤维化的影响 2010年 目的研究外源Smad7基因对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠实验性肝纤维化的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组。第一组为正常对照组,其余3组采用CCl4皮下注射法建立大鼠肝纤维化模型,并在实验第2周和第4周分别经尾静脉导入生理盐水、重组复制缺陷型腺病毒AdSmad7或对照病毒AdGFP。标准酶法测定各组大鼠肝功能情况;放射免疫法测定血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平;RT-PCR法检测大鼠肝组织Smad7 mRNA表达。免疫组织化学法测定α-肌动蛋白(α-SMA)、Smad7表达;肝组织切片采用HE和VG染色进行肝纤维化程度分级。结果与模型对照组相比,AdSmad7导入组大鼠血清谷丙转氨酶(GPT)和碱性磷酸酶(AKP)水平有不同程度的降低,GPT降低更明显;血清PCⅢ和LN水平也显著下降(P<0.05)。RT-PCR和免疫组织化学染色证实,AdSmad7导入组大鼠肝组织Smad7表达显著上调,而α-SMA表达则明显下降(P<0.05)。病理学检查显示:AdSmad7导入组大鼠肝组织结缔组织增生程度减轻,纤维间隔变细,假小叶形成不明显,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论重组复制缺陷型腺病毒AdSmad7经尾静脉注射后可在大鼠肝组织中表达;外源Smad7基因可改善纤维化大鼠肝功能,降低血清PCⅢ水平,下调α-SMA表达,减轻大鼠肝纤维化程度。 陈颖伟 王连升 胡良凯 张文竹 李定国关键词:SMAD7 腺病毒载体 实验性肝纤维化 冠状动脉造影术后自身挤压伤致横纹肌溶解症一例 2011年 患者女,80岁,因“突发胸痛、胸闷3h”于2011年1月18日入院。心电图示V3~V5导联ST段抬高〈0.1mV,心肌肌钙蛋白T(cTnT)0.68μg/L,肌酸激酶(CK)158U/L,血清肌酐(SCr)94.7μmol/L。既往有糖尿病病史。 叶旭辉 涂春莲 吴焱 胡良凯关键词:冠状动脉造影术后 横纹肌溶解症 挤压伤 突发胸痛 V5导联 心电图示 血清miR-31和miR-23a表达水平在胃腺癌检测中的临床意义 被引量:4 2019年 目的观察血清miR-31和miR-23a表达水平在胃腺癌检测中的早期诊断和预后的应用价值。方法选择2014年1月至2016年12月确诊为胃腺癌的患者75例为胃腺癌组;选择同期在医院行胃镜检查诊断为胃腺瘤患者30例和健康体检者20例为胃腺瘤组和健康对照组。采用实时荧光定量PCR检测miR-31和miR-23a表达水平。观察健康对照组、胃腺瘤组和胃腺癌组血清miR-31和miR-23a基因表达量,胃腺癌组的miR-31和miR-23a基因表达量与临床病理因素和预后相关性,两指标的相关性分析及预测胃腺癌的受试者工作特征曲线(ROC)分析。结果胃腺癌组血清miR-31表达量明显低于胃腺瘤组和健康对照组(P<0.01),胃腺瘤组明显低于健康对照组(P<0.01);而miR-23a表达量胃腺癌组明显高于胃腺瘤组和健康对照组(P<0.01),而血清miR-23a表达量胃腺瘤组明显高于健康对照组(P<0.01)。胃腺癌患者血清miR-31和miR-23a表达水平明显与肿瘤大小、分化程度、淋巴转移和肿瘤分期具有明显相关性(P<0.01),而与性别、年龄和肿瘤部位无明显相关性(P>0.05)。胃腺癌存活组的miR-31表达水平明显高于死亡组(P<0.01),而miR-23a表达水平存活组明显低于死亡组(P<0.01)。通过ROC来预测胃腺癌发生的灵敏度和特异性,曲线下面积来评价诊断效率,发现联合miR-31和miR-23a表达水平预测胃腺癌的灵敏度和特异性明显高于miR-31(Z=2.344,P<0.05)和miR-23a(Z=3.055,P<0.01)检测,而miR-31和miR-23a的比较,差异无统计学意义(Z=0.304,P>0.05)。结论血清miR-31和miR-23a表达参与为胃腺癌的发生发展过程,其联合检测对胃腺癌的早期诊断具有较高的灵敏度和特异性,对于胃癌的预后具有较高的临床价值。 陈建清 胡良凯 徐选福关键词:胃癌 微小RNA 预后