芦婷
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 双峰驼天然单域抗体库的构建及鉴定被引量：1
- 2017年
- 重链抗体的可变区VHH是目前天然存在的具有完整功能的最小抗体分子片段,该抗体在基础研究、药物开发等领域应用前景极为广阔。为了构建双峰驼天然单域抗体库并对其进行初步鉴定,从5峰未经免疫的健康骆驼全血中分离淋巴细胞,提取其总RNA,之后反转录为cDNA,利用PCR技术扩增全套编码重链抗体可变区的基因序列,将经过回收并酶切纯化的VHH序列克隆到噬菌体载体上,电转化大肠杆菌TG1感受态细胞,共转化343次。结果表明,构建的双峰驼天然单域抗体库库容为4.4×10~7,转化阳性率为75%,多样性良好,体现为CDR3区碱基序列及长度存在显著差异。成功地构建了双峰驼天然单域抗体库,为今后从中筛选出具有应用价值的特异性单域抗体奠定了基础。
- 包福祥芦婷阿米娜赵鑫鑫邬春艳温靖杜雅楠
- 关键词：双峰驼单域抗体噬菌体展示技术
- IBRV特异性噬菌体单域抗体库的构建、筛选及鉴定
- 2020年
- 为了开发有效的用于治疗和诊断牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhinotracheitis,IBR)的抗体,试验用牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)免疫双峰驼,构建IBRV特异性噬菌体单域抗体库,并以IBRV gD蛋白为筛选抗原,对其进行筛选,对筛选得到的单域抗体进行诱导表达、纯化及鉴定。结果表明:构建得到的IBRV特异性噬菌体单域抗体库的库容为7×10^7;经3轮富集和筛选,phage-ELISA筛选出14个与gD蛋白结合的阳性克隆,并成功对阳性值较高的重组单域抗体IB68进行表达和纯化;经ELISA和Western-blot鉴定,重组单域抗体IB68可与gD蛋白产生抗原抗体结合反应,具有较高的亲和力。说明制备的IBRV特异性噬菌体单域抗体库具有较高的库容和多样性,且筛选得到的单域抗体具有较高的抗原抗体结合活性和免疫学反应性。
- 包福祥徐文博芦婷芦婷刘欣秦岭兄李鑫泳刘树弘杜雅楠
- 关键词：牛传染性鼻气管炎单域抗体抗体库原核表达
- 苦豆籽粕-两岐双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪血清生化指标及免疫球蛋白含量的影响被引量：5
- 2014年
- 为研究苦豆籽粕-两岐双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪血清生化指标及免疫球蛋白含量的影响,试验选用60头21d体重相近的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分4组,每组3个重复,每个重复5头仔猪。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加5、10、20g/kg的合生元,试验期为4周。分别在断奶仔猪28、35、42、49d时,每个重复组随机抽取1头仔猪前腔静脉采血5mL,收集血清,采用全自动分析仪和ELISA方法检测血清生化指标及免疫球蛋白含量。结果表明:1与对照组相比,饲料中添加合生元能够显著提高42d时断奶仔猪血清中TPO、ALB和GLB的含量(P<0.05),极显著降低49d时仔猪血清中ALT的含量(P<0.01),但对仔猪血清中CHO含量无影响(P>0.05);而42d时添加20g/kg合生元显著增加了仔猪血清中AST的含量(P<0.01)。2与对照组相比,添加合生元能够极显著提高仔猪血清中IgM、IgG和IgA的含量(P<0.01),而35d时添加20g/kg合生元组3种免疫球蛋白含量均极显著低于对照组(P<0.01)。表明在饲料中添加苦豆籽粕-两岐双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元对早期断奶仔猪血清生化指标和体液免疫起到改善的作用,添加5、10、20g/kg合生元组较添加20g/kg合生元组作用效果明显,对改善仔猪早期断奶应激有良好的作用。
- 郭东清王雪飞孙晓磊刘艳成刘丹丹芦婷杨英杜雅楠
- 关键词：合生元断奶仔猪血清生化指标免疫球蛋白
- 骆驼重链抗体特异性多抗的制备及鉴定
- 2015年
- 目的:骆驼血清中除了常规抗体Ig G1,还存在两种天然缺失轻链的重链抗体Ig G2和Ig G3,其具有分子量小、稳定性强等优点,但由于缺乏有效的检测手段,使其研究和应用受到了一定的限制,因此制备针对骆驼重链抗体的多抗将具有一定应用前景。方法:本实验中,我们从骆驼抗凝血中分离骆驼血浆,经过Protein G/A Resin柱子对骆驼3种亚型抗体进行了分离和纯化。利用纯化的骆驼Ig G2对家兔进行3次免疫制备了针对骆驼重链抗体的多克隆抗体,并对其活性进行了鉴定。结果:SDS-PAGE凝胶电泳检测结果显示我们成功分离到了骆驼各亚型抗体。间接ELISA测定多抗效价为1:4 096,再通过间接ELISA和Western-blot方法测定多抗的特异性,结果显示制备的多克隆抗体与牛Ig G以及骆驼Ig G1无交叉反应,而与Ig G3抗体具有交叉反应性。结论:实验结果显示我们成功制备了骆驼重链抗体特异性多克隆抗体,将对骆驼抗体资源的开发、利用及对骆驼疾病的检测和研究提供有力支持。
- 芦婷辛满喜阿米娜刘艳成杜雅楠包福祥
- 关键词：多克隆抗体
- 犬瘟热病毒H、F和N基因的克隆及原核表达
- 2018年
- 犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)为负链RNA病毒，属于副黏病毒科麻疹病毒属，可引起犬科、鼬科和浣熊科动物的急性、高度接触性、致死性疾病，该病的主要传染源为患病动物和隐性感染的带毒动物。目前，犬瘟热常年发生，呈散发、地方流行，传染性强、发病率和死亡率高，是养犬业、经济动物养殖和野生动物危害最大的疾病之一。CDV由15 616个核苷酸组成，编码基因按3’～5’端排序依次为：3’端前导序列、核衣壳蛋白基因（N）、磷蛋白基因（P）、基质蛋白基因（M）、融合蛋白基因（F）、血凝素蛋白基因（H）、聚合酶蛋白基因（L）和5’端引导序列。研究表明，CDV的N、F和H三种蛋白在病毒感染和宿主免疫方面起主要作用。因此，H、F和N蛋白的克隆和表达将对CDV的诊断和治疗具有非常重要的意义。
- 包福祥阿米娜阿米娜芦婷赵鑫鑫杜雅楠
- 关键词：犬瘟热病毒原核表达核衣壳蛋白基因N基因熊科动物融合蛋白基因
- 2010年-2014年猪流行性腹泻病毒S基因遗传进化分析被引量：15
- 2015年
- 自2010年以来,随着猪流行性腹泻病毒(PEDV)新毒株的出现,猪流行性腹泻(PED)开始在免疫猪群中流行,并迅速蔓延至国内多个省份,其发病率和病死率至今仍无法得到有效控制。为明确当前PEDV流行毒株的遗传变异情况,利用DNA Star、MEGA6等软件对2010年-2014年NCBI上已收录的319株PEDV S基因进行多序列比对,筛选出6个国家和地区的代表性毒株,并对各代表毒株、疫苗株、经典毒株的遗传进化关系、序列变化进行分析。遗传进化分析显示,进化树可分为G1、G2两大分支,其中多数流行毒株位于G1分支上,与较早的疫苗株及经典毒株遗传距离差异较大。除Chinju99和JS/HZ/2012两株经典毒株位于G1分支上外,其余所有的疫苗株和经典毒株均位于G2分支上。氨基酸序列比对结果显示,各流行毒株与经典毒株及疫苗株相比存在明显的变异位点,且主要集中于S1区的氨基端。结果表明,目前全球范围内广泛流行的PEDV毒株与经典毒株及疫苗株相比,其基因序列呈现出快速变异和进化的趋势,尽快从当前流行毒株中筛选出新的疫苗候选株将成为防控该病继续蔓延的关键措施之一。
- 刘艳成芦婷刘丹丹李静张文超邓侨张伟杜雅楠
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S基因遗传进化分析
