苏畅
- 作品数：12 被引量：20H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市科委医学引导类科技项目上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同离心介质对小鼠胰岛分离结果影响研究
- 2009年
- 胰岛移植治疗糖尿病推广中的首要问题是如何获得多量、高活力和高纯度的胰岛。离心介质的选择是影响胰岛分离结果的重要因素之一。该研究旨在比较Ficoll和Dextran两种离心介质对小鼠胰岛分离结果的影响。
- 苏畅陈曦张正筠山爱景顾卫琼彭承宏李宏为周光文
- 关键词：胰岛介质离心小鼠DEXTRAN糖尿病
- 血红素氧化酶-1保护异种胰岛移植物及机制研究
- 2008年
- 目的:探讨钴原卟啉(cobalt protoporphyrin,CoPP)诱导血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)过表达对异种胰岛移植物的保护作用及其可能的机制。方法:采用大鼠对受体鼠胰岛移植模型。按术前不同处理方式将分离纯化的胰岛随机分为3组:A组胰岛体外培养36h;B组胰岛与50mmol/L的HO-1诱导剂CoPP共培养36h;C组胰岛与50mmol/L的CoPP及50mmol/L的诱导阻断剂锌原卟啉(zinc protoporphyrin,ZnPP)共培养36h。RT-PCR及Western印迹法检测各组胰岛HO-1mRNA及蛋白表达。受体鼠也随机分为3组,每组11只,分别接受上述3组胰岛;比较各组受体鼠血糖维持正常之时间。ELISA法检测受体鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-10及IL-1β的含量。结果:CoPP预处理可诱导胰岛HO-1mRNA和蛋白过表达。B组受体鼠血糖维持正常时间为(14.63±1.19)d,与A组的(9.88±2.17)d及C组的(9.38±1.60)d相比,有显著差异(P<0.01),而A、C两组间无显著差异(P>0.05)。B组受体鼠血清IL-10含量为(72.97±9.74)pg/mL,与A组的(30.57±3.94)pg/mL及C组的(45.55±8.26)pg/mL比较,差异有统计学意义,P值分别为0.005及0.02。而3组间血清IFN-γ、TNF-α及IL-1β含量无显著差异(P>0.05)。结论:CoPP体外诱导HO-1过表达对异种胰岛移植物具保护作用;该作用可能与IL-10有关。
- 张正筠陈曦苏畅顾卫琼李宏为周光文
- 关键词：胰岛移植血红素氧化酶异种白介素-10
- 糖尿病外科治疗进展
- 2007年
- 苏畅周光文李宏为
- 关键词：外科治疗糖尿病外源性胰岛素注射胰岛素酮症酸中毒内科疾病
- 血红素加氧酶-1诱导性高表达保护异种移植胰岛功能的研究
- 2009年
- 目的探讨通过钴原卟啉（cobalt protoporphyrin，CoPP）诱导供体胰岛血红素氧化酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）高表达对异种胰岛移植物的保护作用。方法采用大鼠对小鼠胰岛移植模型，分为对照组、体内诱导组、体外诱导组、体内阻断组及体外阻断组5组，改良Gotoh法提取胰岛，移植于糖尿病模型小鼠的肾包膜下。比较各组受体移植后血糖维持正常时间，糖刺激试验检测胰岛功能，PCR和ELISA法分别检测移植物内和血清IL-10、TNF—α、IL-1β及INF-γ及其mRNA表达。分别以PCR和Western印迹法检测胰岛组织内HO-1mRNA及蛋白表达。病理学检查移植物淋巴细胞浸润情况。结果对照组小鼠血糖维持正常时间为（9．33±1．37）d，与体内诱导组的（16．33±1．51）d及体外诱导组的（14．33±1．51）d相比差异有统计学意义（P〈0．05），体内诱导组优于体外诱导组（P〈0．05）。受体阻断的两组血糖控制时间则与对照组相近，分别为：体内阻断组（9．67±1．03）d，体外阻断组（9．17±1．47）d。体内、外诱导组及对照组胰岛于低糖刺激下胰岛素分泌量差异无统计学意义（P〉0．05），而高糖刺激下，体内诱导、体外诱导及对照组分别为：（187．68±19．93）、（137．22±11．73）及（91．25±12．64）μIU·ml^-1·10islets^-1·45min^-1，差异有统计学意义（P〈0．05）。移植后，接受经诱导处理的胰岛的两组小鼠血清IL-10含量[体内诱导（72．97±9．74）pg／ml、体外诱导（70．84±3．56）pg／ml]明显高于未处理组[（30．57±3．93）pg／ml]及阻断两组[体内阻断：（39．78±3．00）pg／ml、体外阻断：（35．42±4．30）pg／ml]。两诱导组胰岛移植物的IL-10mRNA表达强于对照及阻断两组。IFN-γ、TNF-α及IL—1β在各组间差异无统计学意义。体内、体外诱导两组HO-1mRNA、蛋白表达高于对照组，其中体内诱导组HO-1mRNA高于体�
- 韦瑶陈曦张正筠苏畅张明钧顾卫琼李小英周光文
- 关键词：胰岛移植血红素加氧酶-1白细胞介素10
- 肝星状细胞对同种异体胰岛移植物的保护作用
- 2010年
- 目的 研究小鼠肝星状细胞对同种异体胰岛移植物的保护作用.方法 将糖尿病小鼠随机分为三组,分别为糖尿病组、单纯胰岛移植组及与肝星状细胞共同移植组.单纯移植组于肾被膜下移植入同种异体胰岛300个;共同移植组移植入肝星状细胞（3×10^5个）与同种异体胰岛（300个）混合物.分别于移植术后监测受体小鼠血糖值及正常血糖维持时间;血糖正常一周后移植组及糖尿病组小鼠分别采血检测血清中TGF-β,TNF-α,IL-1β,IFN-γ的含量,同时取出移植物进行免疫组织化学检测.结果 术后共同移植组受体正常血糖维持时间为（23.75±8.96）d,单纯胰岛移植组受体正常血糖维持时间为（11.9±6.92）d,差异有统计学意义（P〈0.05）;三组受体血清中TNF-α、IL-1β、IFN-γ含量差异无统计学意义（P〉0.05）,共同移植组受体血清中TGF-β含量为（2292.31±5.87）pg/ml,单纯移植组为（1246.55±38.91）pg/ml,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;病理学结果显示共同移植组胰岛素表达量大,并且在移植物周围有生物包膜形成.结论 在同种异体移植模型中,肝星状细胞可能通过高分泌TGF-β、局部形成包囊等方式保护胰岛移植物并延长其存活时间.
- 陈曦韦瑶张强苏畅张正筠张明均周光文
- 关键词：胰岛移植肝星状细胞
- 钻原卟啉诱导血红素氧化酶-1表达上调对异种移植胰岛的保护作用
- 2008年
- 目的研究不同浓度钴原卟啉（CoPP）与其诱导胰岛细胞血红素氧化酶-1（HO-1）表达的效应关系，探讨HO-1表达上调对异种移植胰岛的保护作用。方法将分离和纯化的供者胰岛随机分为5组（A、B、C、D和E组），分别置于含有不同摩尔浓度CoPP的培养液中诱导，5组CoPP的浓度依次为（1、5、25、50和75mmol／L。检测各组胰岛细胞中HO-1mRNA和HO-1蛋白表达情况，并测定体外胰岛素释放水平，筛选出能诱导HO-1表达上调幅度最高的CoPP合适浓度。再将受者分为研究组和对照组（每组8只），对照组移植未经CoPP诱导的供者胰岛细胞；研究组移植经合适浓度CoPP诱导的供者胰岛细胞，术后每天监测受者血糖和排斥反应情况。结果D组HO-1mRNA、蛋白表达上调幅度以及胰岛素分泌量均高于其他4组，差异均有统计学意义（P〈0．05），诱导胰岛细胞HO-1上调幅度最高的CoPP浓度为50mmol／L。研究组受者移植D组供者胰岛后，维持正常血糖的时间为（14．63±1．19）d，对照组为（9．88±2．17）d，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论在异种胰岛移植中，经50mmol／L的CoPP体外诱导供者胰岛HO-1表达上调幅度最高；HO-1的表达上调可以促进移植胰岛的功能恢复，抑制排斥反应，延长移植胰岛的存活时间。
- 张正筠陈曦苏畅顾卫琼李宏为周光文
- 关键词：异种血红素氧化酶
- 钴卟啉诱导胰岛血红素加氧酶-1过表达的初步研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨钴卟啉腹腔注射诱导大鼠胰岛血红素加氧酶-1（Ho-1）过表达的量／效关系及其对胰岛功能的影响。方法大鼠分为5组，A、B、C、D4组分别在提取胰岛前24h予腹腔注射2．5、5、7.5及10mg／kg的钴卟啉溶液，对照组给予1．5ml生理盐水。改良Goth法提取胰岛，计数胰岛得率、估定纯度，real time—PCR和Western印迹法检测胰岛组织内Ho-1 mRNA及蛋白表达，糖刺激试验评价胰岛功能。结果C、D组大鼠在注射CoPP溶液后出现机体损伤，D组部分大鼠死亡。A、B、C及对照组胰岛得率及纯度差异无统计学意义（P〉0．05），B组Ho-1 mRNA及蛋白表达量为4组中最高（B组Ho-1 mRNA表达量达对照组的84．18倍）。A、B及对照组胰岛于低糖刺激时，胰岛素分泌量差异无统计学意义（P〉0．05），而高糖刺激下，胰岛素分泌量以B组最高，差异有统计学意义[A、B及对照组分别为：（172．37±16．4）、（187．68±19．93）及（91．25±12．64）μIU·ml^-1·10islets^-1·45min^-1，P〈0．05]。结论腹腔注射5mg／kg体重钴卟啉相对安全，可大幅提高大鼠胰岛组织中HO-1的表达量，并能增强胰岛功能。
- 苏畅张正筠陈曦顾卫琼张明均张强周光文李宏为
- 关键词：胰岛移植
- 大鼠胰岛分离、纯化技术改良被引量：8
- 2007年
- 目的:探讨SD大鼠胰岛分离、纯化的较优方案,并评价依该法分离所得胰岛的生物学特性。方法:以浓度为0.75mg/ml的Ⅺ型胶原酶经胆管充分灌注大鼠胰腺;完整分离后以37℃水浴振荡消化17min,Dextron70不连续密度梯度(1.091、1.081及1.037)离心法分离、纯化胰岛;以DTZ染色鉴定胰岛并计算得率,AO-PI染色检测胰岛活性,糖刺激试验判定胰岛功能,胰岛"细胞免疫细胞化学鉴定"细胞,光镜观察体外培养胰岛的形态学变化。结果:纯化后,每只大鼠胰岛收获量为(743.60±43.07)个,胰岛纯度>90%,胰岛细胞活率>90%。在45min内每10个胰岛细胞在低糖和高糖刺激下分泌的胰岛素浓度分别为(25.35±7.00)μIU/ml和(86.48±12.75)μIU/ml。结论:依改良后的分离纯化方案分离大鼠胰岛可获得高纯度高活率的胰岛细胞,且细胞形态正常、功能良好。
- 苏畅张正筠陈曦顾卫琼周光文李宏为
- 关键词：胰岛细胞分离细胞学技术
- 体内诱导胰岛血红素加氧酶-1过表达对异种胰岛移植物的保护作用被引量：1
- 2009年
- 目的探讨钴原卟啉（CoPP）诱导血红素加氧酶-1（HO-1）过表达对异种胰岛移植物的保护作用及其可能机制。方法将18只SD大鼠平均分为3组：对照组（腹腔内注射1．5ml生理盐水）、阻断组（腹腔内同时注射5mg／kg体质量的CoPP及等量的锌卟啉）和诱导组（腹腔内注射5mg／kg体质量的CoPP）。提取3组大鼠的胰岛。采用肾包膜下移植的方法将3组大鼠的胰岛分别移植至C57BL／6小鼠。通过检测血糖及病理学检查比较各组移植物的存活情况，检测各组受鼠血清IL-10浓度及胰岛移植物内IL-10mRNA表达水平。结果诱导组移植物存活（16．3±1．5）d，明显长于对照组[（9．3±1．4）d]和阻断组[（9．7±1．0）d]（P〈0．05），对照组和阻断组间无明显差异（P〉0．05）。诱导组移植物IL-10mRNA表达水平是对照组的（6．1±2．7）倍（P〈0．05），对照组和阻断组间无明显差异（P〉0．05）。诱导组受鼠血清IL-10含量为（73．0±9．7）pg／ml，显著高于对照组[（30．6±3．9）pg／ml]和阻断组[（32．1±5．9）pg／ml]（P〈0．05）。诱导组移植物内淋巴细胞浸润数量明显少于其他两组（P〈0．05）。结论CoPP诱导HO-1过表达可延长异种胰岛移植物存活，其机制可能与IL—10免疫调节有关。
- 苏畅陈曦张正筠顾卫琼张明钧周光文李小英宁光李宏为
- 关键词：胰岛移植动物实验血红素氧化酶-1
- 血红素氧化酶-1对异种胰岛移植物的保护作用被引量：3
- 2008年
- 血红素氧化酶（HO）-1是一种重要的细胞保护物质，被认为是决定移植物长期存活的重要物质。本实验旨在观察HO-1对异种胰岛移植物的保护作用。
- 张正筠陈曦苏畅顾卫琼李宏为周光文
- 关键词：血红素氧化酶-1细胞保护长期存活HO-1
