蒋虹
- 作品数：118 被引量：241H指数：9
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项中国国际公共关系协会项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学自然科学总论更多>>
- 从小鼠肺中分离仙台病毒和检出仙台病毒抗原的研究被引量：1
- 1998年
- 我们用鸡胚，鸡胚细胞和猴肾细胞成功地从自然和人工感染仙台病毒的小鼠肺中分离出仙台病毒。其中分离率以鸡胚尿囊腔接种法最高，猴肾细胞次之，鸡胚细胞较低。比较了病毒分离法，免疫酶法及间接免疫荧光法共检查了自然和人工感染仙台病毒的小鼠肺标本４５份，检出率依次为３７７８％，３３３３％和２６６７％，各方法间的符合率均达到８０％以上。仙台病毒抗原检出方法简单，快速，可供实际应用。
- 涂新明吴小闲蒋虹
- 关键词：仙台病毒检出抗原鼠肺肾细胞接种法
- 全文增补中
- 肠道病毒71型(EV71)对ICR小鼠的感染被引量：20
- 2009年
- 目的研究肠道病毒71型经不同途径感染不同日龄ICR小鼠后的感染状况,了解肠道病毒71型的感染特点,为了解EV71小鼠感染机制和模型制备提供实验信息和技术支撑。方法分别通过口腔途径、颅腔途径、肌肉途径及腹腔途径感染1日龄、7日龄及3~4周龄SPF级ICR小鼠,定期安乐动物,采集各器官组织进行病原学诊断,确定EV71病毒感染情况;同时建立一步RT-PCR、病毒分离、IFA及IEA等方法。结果经腹腔途径感染成年鼠出现竖毛、弓背、消瘦症状,其他各途径感染小鼠感染后未见竖毛、弓背、觅食减少、体重减轻、精神呆滞及神经系统症状。颅腔注射3~4周龄ICR小鼠能在脑组织检测到病毒RNA,腹腔注射和肌肉注射1日龄乳鼠能在肌肉组织和肠道检测到病毒RNA,其中,肌肉组织病毒分离可检测到活病毒。本研究同时建立了分子生物学、血清学方法,为今后研究其它适合EV71的动物模型奠定了基础。结论临床分离的EV71毒株通过口腔接种、颅腔、肌肉、腹腔注射途径感染1日龄、7日龄及3~4周龄SPF级ICR小鼠的疾病程度和病毒检出不同,ICR乳鼠及成年鼠可作为该病毒感染机制、病毒体内分布等基础研究,但用作EV71动物模型应用,感染程度尚不十分理想。
- 朵建英王卫佟巍丛喆蒋虹许文波魏强秦川
- 关键词：手足口病EV71病毒ICR小鼠
- 大鼠冠状病毒、涎泪腺炎病毒血清学检测方法建立及应用被引量：1
- 1998年
- 以ＲＣＶ为抗原，用ＣＦ、ＩＥＡ、ＥＬＩＳＡ三种方法检查５９份大鼠血清标本，ＩＥＡ、ＥＬＩＳＡ较ＣＦ敏感，又ＩＥＡ抗原制备简便经济，所以ＩＥＡ为首选方法。在应用ＥＬＩＳＡ时ＭＨＶ抗原可代替ＲＣＶ抗原检测ＲＣＶ、ＳＤＡＶ抗体。
- 蒋虹涂新明吴小闲
- 关键词：冠状病毒血清学检测方法补体结合试验免疫酶染色法
- 树合胞体病毒的初步报告
- 1997年
- 吴小闲涂新明蒋虹张新生施慧君
- 关键词：树鼩疱疹病毒细胞融合细小病毒TF
- 猴巨细胞病毒血清学监测方法的建立和应用被引量：4
- 1992年
- 巨细胞病毒(Cytomegalovirus CMV)是一组广泛传播的种属特异性病毒,人类和其它哺乳类都各有其特异性的CMV感染。自1963年Black首次从非洲绿猴分离到猴巨细胞病毒(Simian Cytomegalovirus SCMV)
- 施慧君吴小闲蒋虹时建东
- 关键词：巨细胞病毒血清学
- PCR技术在猴免疫缺陷病毒(SIV)感染模型中的应用
- 2005年
- [目的](1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法的敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中的前病毒DNA。(3)检验DNA-PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中的实用性和可操作性。[方法]用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,从血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT-PCR法扩增,凝胶电泳定性;从感染猴PB-MC中提取带有整合的SIV前病毒DNA的细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性。[结果]DNA-PCR和RNA-PCR经两轮扩增后均得到一长度为477bp的特异条带,测序鉴定确为目的片段。9只实验猴感染SIV后7天,RNA-PCR结果为7/9阳性,DNA-PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有5/9阳性;此后一直到感染后的42天,RNA-PCR和DNA-PCR的结果一直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率在感染后35天下降到4/9,到42天时下降为零。[结论]PCR方法比病毒分离方法的敏感性高。尤其是DNA-PCR,既可检测具有活跃病毒复制的受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期的细胞,所以在感染的早期和中后期——血浆病毒水平较低的情况下或病毒处于潜伏感染的阶段,它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之一有其必要性和重要性。这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感。
- 丛喆涂新明蒋虹魏强佟巍孙敏于浩秦川
- 关键词：巢式PCR病毒分离
- 猴副流感病毒SV5的PCR检测方法建立及初步应用被引量：1
- 2005年
- [目的]建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。[方法]根据Genbank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。[结果]利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccIII限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。[结论]本文首次初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。
- 于浩蒋虹佟巍丛喆孙敏涂新明魏强
- 关键词：聚合酶链反应巢式PCR
- 靶向融合蛋白XE-TNFαm2导致受HIV/SIV感染细胞的凋亡被引量：3
- 2009年
- 研制了基因工程靶向融合蛋白XE-TNFαm2。其中,XE为HIV/SIV辅助受体CXCR4的第二胞外域;TNFαm2是经突变改型的TNFα,其毒副作用已降低18倍,己用于临床治疗恶性肿瘤。己有的研究表明XE-TNFαm2的功能之一是杀灭受HIV/SIV感染的细胞、但不杀伤未受HIV/SIV感染的正常细胞。探讨XE-TNFαm2可否引起细胞的凋亡,以阐明其杀伤细胞作用的可能机制。结果表明,XE-TNFαm2只能引起受HIV/SIV感染细胞的凋亡,但不能引起未受HIV/SIV感染的正常细胞的凋亡。这一结果表明XE-TNFαm2是一种可特异杀灭受HIV/SIV感染细胞的准确靶向融合蛋白,其毒副作用己最小化。
- 路金芝陈伟京杨晶沈洋蒋虹王卫李涛吴钢黄毅佟薇丛喆魏强王憬惺卢圣栋
- 关键词：融合蛋白凋亡
- 中国恒河猴Mamu-A^＊01基因筛查及其对抗原肽p11C的特异性CTL反应被引量：10
- 2008年
- 目的筛查中国恒河猴Mamu-A*01基因,比较中国恒河猴和印度恒河猴的Mamu-A*01基因序列和功能是否相同。方法PCR方法检测128只中国恒河猴,用特异性引物扩增Mamu-A*01基因,将PCR扩增后的产物克隆测序后与印度恒河猴的Mamu-A*01基因进行同源比对;酶联免疫斑点检测(ELISPOT)方法分别检测5只Mamu-A*01基因阳性和5只阴性恒河猴针对SIV、SHIV抗原肽p11C的特异性CTL反应。结果共筛查出5只Mamu-A*01基因阳性恒河猴(3.91%),经测序分析后与印度恒河猴的同源性可达99.1%。这5只均为SIV/SHIV感染恒河猴,其中四只SIV感染的猴的ELISPOT结果显示针对p11C的高频CTL反应,斑点数在500-1400/106PBMCs之间,而另1只SHIV感染的恒河猴及5只阴性猴没有斑点出现。结论中国恒河猴含有Mamu-A*01基因,基因频率有区域性差异,中国恒河猴的Mamu-A*01可提呈特异性抗原肽p11C。
- 刘秀英丛喆侯俊王卫乔红伟蒋虹涂新明佟巍高虹杨贵波吴小闲卢耀增邵一鸣魏强秦川
- 关键词：中国恒河猴
- SARS冠状病毒感染恒河猴的病毒、血清学检测研究
- 2005年
- [目的]对感染SARS-CoV的恒河猴进行病毒、血清学等指标检测及研究,确定模型动物成功感染,并为SARS发病机制,疫苗评价,药物筛选确定参考指标。[方法]SARSCo-V经鼻腔接种8只恒河猴,在感染的第1天开始到5、7、10、15、20、30和60天分别安乐死时,不同时间取咽拭子、血液和脏器,进行病毒分离,RT-PCR检测和抗体测定。[结果]用巢式RT-PCR在感染后每天提取的咽拭子标本中检测SARS-CoV的RNA,以细胞培养冠状病毒为阳性对照,以正常恒河猴咽拭子为阴性对照,在8只动物病毒接种第5天开始可检测到大小为797bp的目的条带,阳性检出最长可持续到第15天。进一步用病毒分离实验对PCR结果进行确证,8只动物中的5只恒河猴接种5天的咽拭子标本中,经Vero细胞培养,细胞产生了典型细胞病变(CPE),提示SARS冠状病毒能感染恒河猴并有病毒的复制和排毒。IFA方法证实为SRAS-CoV抗原存在。SARS-CoV感染恒河猴后,可以检测出免疫反应。在SARS冠状病毒接种前和接种后第5、8、11、15、19、23、26、30、34、每隔4-7天以及安乐死时采血,制备血清测定抗体,8只恒河猴接种病毒前均血清中SARS冠状病毒特异性抗体IgG为阴性,10天后安乐处死的5只感染猴在11-15天开始,至安乐死时,均为阳性。IgG阳性的5只恒河猴均有一定的中和抗体产生,且对SARS病毒感染细胞有一定的保护性。感染SARS病毒猴后与正常猴比较,其细胞杀伤效应明显增强。感染SARS-CoV的恒河猴不仅出现与SARS患者类似的临床和病理学改变,也在一定时期内排毒,出现特异免疫反应,这些指标均可作为药物筛选、疫苗评价等方面的重要参数。
- 魏强王健伟张扬清鲍琳琳涂新明蒋虹高红丛喆朱华邓巍佟巍张兵林黄澜刘亚莉秦川
- 关键词：实验动物SARS动物模型
