谭妍
- 作品数：4 被引量：27H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 四物汤效应成分基于CYP酶的相互作用研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究四物汤效应成分果糖、阿魏酸、芍药苷和川芎嗪及其配伍对CYP同工酶的抑制及诱导作用,为从代谢角度解释中药方剂的配伍规律提供依据。方法应用人肝微粒体体外孵育模型和探针底物代谢产物的LC-MS/MS定量方法,评价各单药及药对配伍组对CYP酶同工酶CYP1A2、2B6、2C9、2C19、2D6和3A4的抑制作用。应用"三明治"培养的大鼠原代肝细胞模型,评价各单药及其药对配伍组对CYP1A和CYP3A的诱导作用。结果果糖、阿魏酸、芍药苷、川芎嗪及其配伍组(100μmol·L-1),对人肝微粒体CYP1A2、2B6、2C9和2C19的抑制率均<62%,对CYP3A4和CYP2D6的活性无影响。各单药及配伍组对CYP3A1/2无明显的诱导作用;芍药苷及其药对和配伍(50μmol·L-1)对CYP1A2诱导活性的提高>阳性诱导剂的40%。结论四物汤各成分及其药对配伍对6个主要CYP同工酶均无明显的抑制作用,芍药苷单药对CYP1A2有一定诱导作用,与果糖、阿魏酸和川芎嗪配伍时,诱导活性明显增强。
- 谭妍沈国林庄笑梅李桦高月
- 关键词：四物汤相互作用细胞色素P450酶肝微粒体肝细胞
- 芍药苷的体外代谢性质被引量：8
- 2013年
- 目的研究芍药苷在人和大鼠肝微粒体,以及大鼠原代肝细胞中的代谢特征,确定芍药苷的Ⅰ相代谢酶表型。方法将芍药苷与人、大鼠肝微粒体或大鼠肝细胞在37℃孵育,应用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定孵育液中的芍药苷含量,考察芍药苷的代谢稳定性。将芍药苷与重组人源细胞色素P450酶(CYP)中CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6和3A4孵育,并在人肝微粒体中将芍药苷与各同工酶的特异性抑制剂共孵育,确定其代谢酶表型。结果在人和大鼠肝微粒体中,芍药苷均发生依赖于NADPH的Ⅰ相代谢消除,60 min的代谢率分别为10.74%和22.76%,半衰期T1/2分别为(88.87±5.32)和(48.47±1.18)min,经外推得到的肝脏清除率分别为(13.13±1.11)和(10.06±1.34)ml/(min·kg)。在加入葡萄糖醛酸转移酶辅酶(UDPGA)的人肝微粒体中,芍药苷不发生代谢转化。在大鼠原代肝细胞中,芍药苷的代谢转化率与肝微粒体相当,T1/2为(77.88±3.93)min。芍药苷是由多个CYP同工酶介导代谢的,CYP2C9、CYP3A4和CYP2C8是主要的代谢酶,用整体归一化法评价其代谢贡献率分别为22.06%、52.47%和25.47%。结论芍药苷在肝微粒体和肝细胞中主要发生多个CYP酶介导的Ⅰ相代谢,主要的代谢表型是CYP2C9、CYP3A4和CYP2C8。
- 谭妍沈国林庄笑梅原梅李桦高月
- 关键词：芍药苷细胞色素P450酶肝微粒体肝细胞代谢
- 川芎嗪的肝微粒体代谢动力学及代谢表型研究被引量：15
- 2014年
- 应用体外人和大鼠肝微粒体以及重组人源代谢酶孵育体系,研究了中药有效成分川芎嗪(TMPz)的肝代谢动力学特征和代谢酶表型。将TMPz与加入不同辅酶的人(HLM)和大鼠肝微粒体(RLM)孵育,应用LC-MS/MS法测定其剩余浓度,考察TMPz的肝微粒体代谢稳定性和酶动力学。在+NADPH和+NADPH+UDPGA的肝微粒体中,TMPz发生代谢转化。在同时加入NADPH和UDPGA的HLM和RLM中,TMPz的t1/2、Km和Vmax分别为(94.24±4.53)和(105.07±9.44)min、(22.74±1.89)和(33.09±2.74)μmol·L-1、以及(253.50±10.06)和(190.40±8.35)nmol·min-1·mg-1(protein)。TMPz在HLM的代谢消除略快于RLM,其氧化生成活性产物2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪(HTMP)后可进一步与葡糖醛酸结合。应用重组人源CYP酶及特异化学抑制剂法确定CYP1A2、2C9和3A4是参与川芎嗪Ⅰ相代谢的CYP同工酶,并介导了HTMP的生成。经整体归一化法得到CYP1A2、2C9和3A4的贡献率分别是19.32%、27.79%和52.90%。应用LC-MS/MS峰面积相对定量法,观察到UGT1A1、1A4和1A6是介导HTMP葡糖醛酸结合反应的主要尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶(UGT)亚型。上述结果表明,川芎嗪的肝脏代谢涉及多酶介导的Ⅰ相和Ⅱ相代谢。
- 谭妍庄笑梅沈国林李桦高月
- 关键词：川芎嗪细胞色素P450酶药物-药物相互作用
- 异鼠李素和阿魏酸在大鼠原代肝细胞的肝摄取性质被引量：1
- 2013年
- 目的建立大鼠原代肝细胞摄取模型,评价异鼠李素和阿魏酸的肝细胞摄取性质。方法应用RT-qPCR技术测定0,0.5,2和4h悬浮培养原代大鼠肝细胞上摄取转运体有机阴离子转运多肽(Oatp)1和Oatp2,有机阴离子转运体(Oat)2和有机阳离子转运体(Oct)1的mRNA表达。应用已知底物非索非那定、普伐他汀、甲氨蝶呤和阿昔洛韦评价转运体的功能。将已知底物或受试药物在4℃和37℃分别与肝细胞孵育不同时间,LC-MS/MS定量测定细胞摄取量,考察温度和时间对底物摄取的影响。由浓度依赖的摄取实验,计算得到Km、Vmax和主动摄取率等参数。在肝细胞模型上,将转运体的阳性抑制剂与异鼠李素10μmol·L-1和阿魏酸50μmol·L-1共孵育2min,观察抑制剂对受试药转运的影响。结果悬浮培养大鼠原代肝细胞上表达有转运体Oatp1,Oatp2,Oat2和Oct1,并能介导已知底物的主动摄取。转运体的mRNA表达水平随着时间的延长而快速下降,4h的表达水平约为0h的10%。转运体对已知底物摄取活性也随时间呈下降趋势,但程度显著低于表达水平,4h的活性约为0h的28.7%～71.4%。在经验证的肝细胞模型上,异鼠李素的4℃和37℃摄取无显著差异,主动转运率为14.6%。阿魏酸在37℃的摄取量显著高于4℃,主动转运率为84.1%;Oct阳性抑制剂奎尼丁100μmol·L-1能显著抑制阿魏酸的肝摄取,抑制率为64.9%。结论成功建立了大鼠原代肝细胞摄取模型,并用底物进行了验证。异鼠李素通过被动扩散进入肝细胞,阿魏酸的肝细胞摄取则以主动转运为主。
- 沈国林庄笑梅谭妍原梅李桦高月
- 关键词：异鼠李素阿魏酸肝细胞生物转运
