赵燕秋
- 作品数：26 被引量：133H指数：7
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家自然科学基金创新研究群体项目创新研究群体科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 胃癌MG-7抗原模拟表位与HSP70融合基因的构建及表达被引量：14
- 2001年
- 目的构建和表达胃癌 MG7模拟表位与人热休克蛋白70(HSP70)的融合基因.方法采用加端 PCR 的方法,将 MG7模拟表位(GC23)的编码序列融合到 HSP 基因的3′端;PCR 获得的融合基因片段经 T-A 克隆法克隆到 pUCm-T 载体上,并进行 DNA 测序;将融合基因片段从 pUCm-T 载体上酶切后,亚克隆到表达载体 PET-21a(+)上;将重组质粒 PET-21a(+)/GC23-hsp 转化大肠杆菌,经IPTG 诱导后,收集细菌,菌体裂解后进行 SDS-PAGE 及Western blot 检测.结果应用 PCR 方法扩增出约2.0kb 的目的片段,序列测定结果证实,模拟表位 GC23序列成功地融合到 HSP70基因的3′端,GC23及 HSP70基因序列均正确;经 EcoR I+Xho I 酶切及 PCR 鉴定证实,融合基因成功地克隆到原核表达载体 PET-21a(+)上;转入重组质粒的大肠杆菌经 IPTG 诱导后,进行SDS-PAGE 发现在 M_r 为72000处有表达量明显增多的蛋白条带,Western blot 证实,M_r72000处的条带为目的条带.结论成功构建并表达了 MG7模拟表位与 HSP70的融合基因.
- 宁晓暄吴开春时永全王新赵燕秋樊代明
- 关键词：抗原热休克蛋白质类70生物治疗融合基因
- 人bax真核表达载体的构建及其在人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR中的表达被引量：4
- 1999年
- 目的：构建人ｂａｘ真核表达载体，经脂质体导入人胃癌耐药细胞ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ，并检测ｂａｘ基因在转导株的表达．方法：采用分子克隆技术将ｂａｘ基因插入真核表达载体ｐＢＫ－ＣＭＶ的多克隆位点之间，以脂质体介导法将目的基因导入受体细胞ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ，Ｇ４１８筛选克隆细胞，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ｂａｘ基因的表达．结果：成功地构建了重组质粒ｐＢＫ－ｂａｘ，将之转入细胞后，经Ｇ４１８筛选３０ｄ获得了稳定的细胞克隆，即ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ－ｂａｘｃｅｌｓ．Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证实了ｂａｘ基因转导株具有明显的Ｂａｘ蛋白表达．结论：ｂａｘ真核表达载体的构建，为胃癌耐药的临床治疗打下了基础．
- 赵燕秋肖冰樊代明
- 关键词：BAX真核表达载体胃癌耐药细胞系
- 反义核酸抑制胃癌细胞Bcl-2表达被引量：4
- 1998年
- 本文采用分子克隆技术成功地构建了反义核酸表达载体ｐＤＯＲ－Ｂｃｌ－２ ｃＤＮＡ。以奚质体介导法将重组反义核酸表达载体转染受体细胞ＳＧＣ７９０１，并Ｇ４１８筛选，从２×１０＾５细胞中筛选出大约１５０个抗性克隆，转导率大于１‰，随机挑选２个克隆继续筛选与扩增培养，获得了１株稳定的抗性细胞，从而建立了Ｂｃｌ－２表达阻断的胃癌细胞株，我们命名为７９０１ａｎＢｃｌ－２ｃｅｌｌｓ。通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法、
- 肖冰王佐佑时永全赵燕秋尤涵樊代明
- 关键词：BCL-2反义核酸胃癌细胞基因表达
- 锌带蛋白基因ZNRD1高表达胃癌细胞模型的建立
- 2002年
- 为建立高表达ZNRD1胃癌细胞模型 ,通过分子克隆技术将ZNRD1基因全长cDNA片段克隆入真核表达载体pcDNA3 1+的多克隆位点之间 ,对重组质粒进行酶切鉴定 ,经显微注射将重组质粒导入人胃癌细胞SGC790 1,G4 18筛选后应用Northernblot检测ZNRD1基因的表达。结果经酶切鉴定证实正确地构建了真核表达质粒 ,转染SGC790 1细胞后获得有效表达。表明已成功地构建了ZN RD1基因真核表达载体 ,并经显微注射法建立了高表达锌带蛋白基因ZNRD1的胃癌细胞模型 ,为深入研究ZNRD1的作用和机制奠定了基础。
- 张宇梅严泉剑时永全金晓航赵燕秋樊代明
- 关键词：胃癌胃肿瘤细胞模型多药耐药化疗
- Bax基因对人胃癌耐药细胞多药耐药性的逆转作用被引量：22
- 2000年
- 目的 研究凋亡相关基因Bax对胃癌多药耐药细胞的多药耐药性的逆转作用。方法 构建含有人BaxcDNA全长的真核表达载体 pBK Bax ,经脂质体导入缺乏Bax蛋白表达的人胃癌多药耐药细胞系SGC790 1/VCR中。Western印迹观察Bax基因在转导细胞中的表达 ,MTT法检测Bax转导细胞与空载体转导细胞对化疗药物的敏感性。结果 成功构建了Bax的真核表达载体 ,Bax转导细胞能稳定表达Bax蛋白 ,与空载体转导细胞相比 ,Bax转导细胞对长春新碱 (vincristine ,VCR)、阿霉素 (adri amycin ,ADR)、丝裂霉素 (mitomycin ,MMC)的敏感性显著增加 (P <0 .0 1)。 结论 Bax基因转导对胃癌多药耐药细胞SGC790 1/VCR的多药耐药性具有逆转作用。
- 赵燕秋肖冰樊代明
- 关键词：BAX基因转导胃癌多药耐药
- 卵巢癌及胃癌患者腹水细胞因子水平的变化
- 1999年
- 免疫细胞产生的细胞因子不但参与调节免疫应答的过程,也参与细胞间相互作用、细胞生长和分化等机体重要的生理过程,以及某些病理过程,如细胞因子及其受体的调节失衡可能引起肿瘤的发生或增殖。近年来对ＩＬ6、ＩＬ8和ＴＮＦα等在这方面作用的研究较为深入。本文应用ＥＬ?..
- 苏丽李琦黄艳红赵燕秋杨琨刘雪松金伯泉
- 关键词：卵巢癌胃癌腹水细胞因子
- 锌带基因ZNRD1在胃癌耐药细胞中的表达和功能被引量：7
- 2003年
- 目的 探讨锌带基因ZNRD1在多药耐药胃癌细胞中的表达和作用。方法 应用Northernblot和半定量RT PCR ,观察锌带基因ZNRD1在胃癌细胞SGC790 1及其长春新碱 (VCR)诱导的耐药细胞SGC790 1/VCR中的表达 ;将反义核酸转染SGC790 1/VCR细胞 ,通过免疫组化检测转导细胞与非转导细胞ZNRD1蛋白的表达 ;以流式细胞仪检测细胞周期的变化 ,以MTT实验检测细胞生长曲线和对VCR、阿霉素 (ADM)的药敏性。结果 胃癌耐药细胞SGC790 1/VCR与非耐药细胞相比 ,ZNRD1基因的表达明显增高。转导株antiZNRD1 SGC790 1/VCR细胞的ZNRD1蛋白水平明显低于非转导株 ,G1期细胞比例增加而S期比例减少 ,生长受到抑制 ,且对VCR、ADM的敏感性明显增高。结论 胃癌耐药细胞与非耐药细胞相比 ,ZNRD1基因处于高表达状态。反义核酸转染可有效阻断ZNRD1蛋白的表达 ,在一定程度上逆转人胃癌耐药细胞SGC790 1/VCR的多药耐药性。
- 张宇梅赵燕秋严泉剑潘阳林易辉樊代明
- 关键词：胃癌多药耐药性反义核酸SGC7901细胞
- 人层粘连蛋白受体调节胃癌细胞多药耐药性的实验研究被引量：9
- 2002年
- 目的 探讨相对分子质量为 6 70 0 0的人层粘连蛋白受体 (LR)对胃癌细胞多药耐药性(MDR)的调节作用及其机制。方法 应用DNA重组技术构建LR前体蛋白 (LRP)的反义RNA表达载体 ,并借助脂质体将其导入胃癌MDR细胞SGC790 1 VCR中。用Western印迹法检测LR在胃癌细胞中的表达 ,MTT法测定细胞对化疗药物的敏感性 ,流式细胞仪测定细胞周期以及阿霉素在细胞内的蓄积和潴留。结果 转染LRP反义RNA表达载体显著降低了LR在SGC790 1 VCR细胞中的表达。转染细胞 (SGC790 1 VCR anLRP)对长春新碱、阿霉素、5 氟尿嘧啶和顺铂的敏感性明显升高 ,细胞内蓄积和潴留的阿霉素也明显增多。细胞周期分析表明 ,SGC790 1 VCR anLRP细胞发生了G1期阻滞 ,并出现了自发性凋亡。结论 LR可能通过影响药物蓄积和细胞凋亡参与对胃癌细胞MDR的调节。
- 时永全翟惠虹王新宁晓暄赵燕秋樊代明
- 关键词：层粘连蛋白受体多药抗药性胃肿瘤
- 胃癌细胞耐药相关蛋白质分子的差异展示被引量：7
- 2001年
- 目的 寻找新的胃癌细胞耐药相关蛋白质分子 ,阐明肿瘤耐药的新机制。方法 以胃癌细胞SGC790 1和长春新碱诱导的耐药胃癌细胞SGC790 1/VCR为研究对象 ,用固相化pH梯度等电聚焦的二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术展示并比较两种细胞表达的所有蛋白质 ,凝胶银染法显示耐药与非耐药细胞差异表达的蛋白质分子。结果 在两张银染的凝胶蛋白质图谱上 ,均有 6 80个可辨识的蛋白质点 ,绝大多数蛋白点在位置、形状和密度上是一致的。在耐药细胞蛋白质二维电泳图谱中 ,发现有 30个明显差异的蛋白点 ,并初步确定了其等电点和分子量。其中 3个蛋白点表达量很高 ,但在非耐药细胞中未出现 ;6个蛋白点丰度明显上调 ;19个蛋白点丰度明显下调 ;2个蛋白点在耐药细胞中未出现 ,但在非耐药细胞中高表达。结论 胃癌耐药细胞中差异表达的蛋白质分子可能与其长春新碱耐药机制相关。
- 王新时永全赵燕秋王吉村药立波张宗友兰梅金建平樊代明
- 关键词：胃肿瘤SGC7901细胞长春新碱
- 人硫氧化还原蛋白系统生物学意义的研究进展被引量：6
- 2001年
- 硫氧化还原蛋白Ｔｈｉｏｒｅｄｏｘｉｎ（Ｔｒｘ）是一种重要的氧化还原调节分子，广泛存在于生物体内， 与Ｔｒｘ还原酶和ＮＡＤＰＨ共同组成一个广谱的蛋白二硫键还原系统，在稳定细胞内氧化还原环境与调 节蛋白－蛋白、蛋白－核酸相互作用等方面起重要作用。人类的多种肿瘤中均存在Ｔｒｘ的异常表达； Ｔｒｘ直接应用于临床或作为抗肿瘤药物的靶分子已引起广泛关注。
- 赵燕秋樊代明
- 关键词：肿瘤治疗生物学意义
