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粒细胞集落刺激因子(G-CSF)及其突变体(mG-CSF)与人血清白蛋白第三结构域(3DHSA)的融合蛋白及应用: 本发明属长效融合蛋白药物技术领域，具体是涉及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)及其突变体(mG-CSF)与人血清白蛋白第三结构域(3DHSA)的融合蛋白；融合蛋白中所述的人血清白蛋白第三结构域的氨基酸序列如SEQ NO：1...; 高向东赵述强张瑜姚文兵田浤刘超陈晓菲; 文献传递

小鼠铁调素1功能肽Hepc25的表达及纯化: 2012年; 目的利用原核生物表达载体表达小鼠铁调素功能肽Hepc25,并对其进行纯化。方法选取编码25aa的Hepc25基因与硫氧还蛋白基因融合后在大肠杆菌中大规模诱导表达该融合蛋白,以RT-PCR法扩增小鼠Hepcidin1功能肽基因Hepc25,将目的基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中获得pET-32a-Hepc25,再以pET-32a-Hepc25转化大肠杆菌BL21表达融合蛋白,收集菌体蛋白,用Western blotting和SDS-PAGE法检测融合蛋白,优化融合蛋白高表达条件。依次利用亲和层析、离子交换层析和凝胶排阻层析法纯化融合蛋白,融合蛋白经肠激酶酶切、高效液相色谱法(HPLC)分离纯化获得了目的蛋白Hepc25。结果成功构建了小鼠pET-32a-Hepc25融合蛋白表达载体,融合蛋白表达量约占大肠杆菌BL21总蛋白量的28%,融合蛋白在33℃、120r/min、终浓度为0.2mmol/L的异丙基-β-D硫化半乳庶糖(IPTG)诱导8h的条件下表达量最高,融合蛋白纯度达95%。融合蛋白经过色谱分离、酶切和HPLC分析,目的蛋白的纯度也达95%以上。结论利用原核生物表达载体成功表达并纯化了小鼠铁调素功能肽Hepc25,并筛选出了高表达的优化条件。; 赵述强石振华栗海峰段相林常彦忠; 关键词：铁代谢 SDS-PAGE 免疫印迹法小鼠

Hepcidin在机体铁稳态调控中的作用及其生物工程制备: 常彦忠孔卫娜段相林于鹏石振华赵述强刘晓志郭佩付丽娟; 人体许多重要的生命过程均有铁的参与，铁缺乏或铁超载都会对机体产生严重的伤害。铁缺乏可造成贫血、智障等；而铁过量则可促发产生大量自由基，引起神经退行性病变及与铁过载有关的许多疾病如心血管疾病、骨质疏松、糖尿病等。由此可知，...; 关键词：; 关键词：生物工程

RP-HPLC法对乳制品中主要牛奶蛋白的分离及定量测定被引量：16: 2009年; 建立一种基于反相高效液相色谱(RP-HPLC)的分析方法,对牛奶及其乳制品进行定量分析。此方法可一次分离牛奶及乳制品中的7种主要蛋白成分(κ-CN、αs2-CN、αs1-CN、β-CN、α-La、β-LgB、β-LgA),解决了加工后乳制品中变性蛋白定量不准确的问题和κ-CN、αs2-CN以及乳清蛋白中α-La、β-LgB和β-LgA难以分离的困难。各组分分离度均大于1,达到基线分离,回收率达88.9%～97.1%,相对标准偏差为0.8%～5.1%。该方法不需对样品进行离心,在测定清蛋白组分时,也不需提前去除优势蛋白酪蛋白,与传统的检测方法相比,具有准确、灵敏和快速等特点,可用于牛奶及其乳制品的质量控制和定量检测。; 王浩张志国常彦忠段相林赵述强张楠石振华; 关键词：牛奶奶粉

融合蛋白技术在长效药物开发中的应用被引量：5: 2013年; 随着生物技术与制药工业的迅猛发展,越来越多的蛋白和多肽类药物被研发并应用于临床,然而,大多数此类药物普遍存在体内半衰期短的问题,使其应用受到了限制,而融合蛋白技术是目前延长蛋白和多肽类药物半衰期的有效手段之一。对融合蛋白技术在长效药物开发中的应用进行综述,详细介绍该技术的常用融合伴侣、长效机制和相关药物的研发进展,旨在为长效蛋白或多肽类药物的开发提供参考。; 张瑜赵述强姚文兵; 关键词：融合蛋白半衰期人血清白蛋白转铁蛋白

改进反相高效液相色谱法测定硫酸奈替米星注射液的含量: 目的改进反相高效液相色谱法测定硫酸奈替米星注射液的含量。方法采用Agilent ZORBAX SB-C18（4.6*250mm,5μm）色谱柱;以{0.6%庚烷磺酸钠溶液(含0.1mol·L-1的磷酸二氢钾,用磷酸调pH...; 陈达史孙亮赵述强赵卫张朝凤袁耀佐张玫; 关键词：反相高效液相色谱硫酸奈替米星注射液; 文献传递

重组人血清白蛋白第3结构域-Nartograstim融合蛋白在毕赤酵母中的表达及初步活性研究被引量：2: 2013年; 将人血清白蛋白第3结构域(3DHSA)与粒细胞集落刺激因子突变体(Nartograstim)融合基因克隆至载体pPICzαA,置于醇氧化酶启动子(AOX)和α交配因子信号肽作用下构建分泌表达质粒,电击转化入毕赤酵母GS115。SDSPAGE结果显示3DHSA-Nartograstim相对分子质量约为42 kD,Western blot证实其同时具有HSA和G-CSF的抗原性。建立融合蛋白表达的条件为:BMMY培养基pH 6.0、1.5%甲醇、诱导84 h,灰度扫描发现该条件下融合蛋白的纯度为79%。依次采用亲和色谱和疏水色谱纯化得到纯度高于90%的融合蛋白,终产量为86 mg/L。采用MTT法检测融合蛋白对NFS-60细胞株的促增殖能力,结果显示,3DHSA-Nartograstim具有剂量依赖性促进NFS-60细胞增殖的作用。本研究为3DHSA-Nartograstim的进一步研究奠定了基础。; 赵述强张瑜田浤刘超高向东; 关键词：人血清白蛋白粒细胞集落刺激因子毕赤酵母

铁过载与糖尿病关系的研究进展被引量：1: 2009年; 铁是生物体必不可少的微量元素,铁缺乏或铁过载均会导致铁代谢相关疾病。铁缺乏会导致缺铁性贫血,铁过载主要表现为遗传性血色素沉着症(HH)。研究发现HH与二型糖尿病(typeⅡ diabetes mellitus,T2DM)之间存在某种关联。大量的临床、流行病学和基础实验研究均表明组织铁沉积可能与T2DM的发生及其并发症有关。血清铁蛋白(ferritin)已经成为T2DM患者的重要检测指标之一。然而铁在T2DM发病过程中的作用机制研究较少。最新研究表明缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)是连接铁代谢与糖代谢的关键因子。通过减少饮食中血红素铁的摄取、放血以及用铁螯合剂处理可以起到对HH诱导的T2DM的预防和治疗作用。; 郭佩赵述强樊玉梅于鹏常彦忠段相林; 关键词：二型糖尿病铁过载缺氧诱导因子1Α T2DM 代谢相关疾病 HIF-1Α

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)及其突变体(mG-CSF)与人血清白蛋白第三结构域(3DHSA)的融合蛋白及应用: 本发明属长效融合蛋白药物技术领域，具体是涉及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)及其突变体(mG-CSF)与人血清白蛋白第三结构域(3DHSA)的融合蛋白；融合蛋白中所述的人血清白蛋白第三结构域的氨基酸序列如SEQ？NO：1...; 高向东赵述强张瑜姚文兵田浤刘超陈晓菲; 文献传递

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赵述强