邹东霆
- 作品数：25 被引量：68H指数：5
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 肿瘤抑制基因p53的结构与功能保守性的比较分析被引量：1
- 2004年
- 目的 比较分析不同物种来源的p5 3蛋白的系统发育规律及其结构与功能的保守性。方法 多序列比较、结构域比对和二级结构预测等生物信息学分析及系统发生树构建。结果 模式生物间p5 3蛋白有较高同源性 ,而且都具有p5 3蛋白的典型结构特征 ;各结构域中维持功能活性必需的氨基酸残基几乎不变 ,二级结构折叠元件的组成和分布也十分类似 ;最大似然法和邻接法两种方法推导出的分子系统进化树基本一致。结论 物种来源不同的p5 3蛋白同属于一个有相似功能作用的蛋白家族。从比较生物学新的角度 ,进一步说明了p5 3蛋白的结构和功能保守性。
- 涂洪斌李冰陈耀勇邹东霆陈维洁蒋义国葛曰萍陈尊器
- 关键词：肿瘤抑制基因P53细胞周期模式生物
- F10蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：11
- 2007年
- 目的:表达F10蛋白,并制备兔抗F10多克隆抗体。方法:利用PCR方法扩增F10基因片段,经BamH I和EcoR I酶切后连接入pET-GST原核表达载体,构建的pET-GST/F10融合重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达蛋白,并以亲和层析的方法进行纯化。表达产物用SDS-PAGE电泳和Western blot进行分析鉴定。以纯化的F10蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗F10的多克隆抗体,并以ELISA法检测抗体效价。结果:经酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的F10读码框。SDS-PAGE电泳分析显示pET-GST/F10诱导后表达一相对分子质量(Mr)约为61 000的融合蛋白,与预期结果相符。目的蛋白纯化后的纯度达90%以上,Western blot证实该蛋白是GST/F10的融合蛋白。将纯化的GST/F10融合蛋白免疫家兔,得到的兔抗F10抗体效价达1∶20 000。结论:成功构建了人F10基因原核表达载体,并获得了高纯度的F10重组蛋白及兔抗F10抗体,为下一步研究F10基因功能奠定了实验基础。
- 付欣邹东霆周问渠邢福祺李冰
- 关键词：原核表达抗体
- 探讨细胞不同初始接种密度对转染效率的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨不同初始接种密度对细胞转染效率的影响。方法:利用Lipofectamine 2000(Lipo)介导GCLC基因(γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位)及绿色荧光蛋白(GFP)表达载体转染大鼠肺泡上皮L2细胞,通过双萤光素酶报告基因系统检测萤光素酶活性值、荧光显微镜和流式细胞仪检测其GFP表达情况,来探讨细胞不同初始接种密度对转染效率的影响。结果:细胞初始接种密度不同,其转染效率也不同。结论:细胞不同初始接种密度对转染效率有显著性影响,转染细胞数适宜才能得到较高的转染效率。
- 洪玮付欣周问渠邹东霆李冰
- 关键词：脂质体转染效率绿色荧光蛋白
- 慢病毒介导的稳定表达LBH的前列腺癌细胞株的建立被引量：2
- 2016年
- 目的:构建稳定表达LBH基因的人前列腺癌细胞株PC-3M-LBH,探讨LBH基因对PC-3M细胞增殖能力的影响。方法:构建表达LBH基因的重组慢病毒载体并制备出相应的慢病毒,感染低表达LBH基因的人前列腺癌PC-3M细胞后,经嘌呤霉素筛选获得细胞克隆;实时荧光定量PCR和蛋白印迹法(Western-Blot)分别检测细胞株中LBH的mRNA、蛋白表达水平;采用CCK-8法检测表达LBH基因后细胞增殖能力的改变。结果:成功构建了重组慢病毒表达质粒p Lenti-LBH并包装出了慢病毒,感染前列腺癌细胞后经嘌呤霉素筛选得到PC-3M-LBH细胞株;PC-3M-LBH细胞株中LBH基因的mRNA和蛋白表达显著上调;相对母细胞和NC对照组,PC-3M-LBH细胞在接种后第4天即出现明显的生长抑制,到第6天其生长抑制率达到19.7%。结论:构建的细胞株能稳定表达LBH基因,该基因的表达能显著抑制前列腺癌PC-3M细胞的体外增殖。
- 李二毛陈嘉欣李晓艳邹东霆李冰刘启才
- 关键词：前列腺癌PC-3M
- 香茶菜黄酮诱导人肝癌细胞系GHC-3恶性表型的逆转被引量：5
- 1995年
- 香茶菜提取物黄酮体外对人肝癌细胞系ＧＨＣ－３的诱导，从细胞生长特性、膜受体、肿瘤标志物、癌基因产物和遗传性状等方面观察到细胞恶性表型的逆转。经过药物作用１０周后发现细胞形态由多边形上皮样逐渐转变为梭形，生长速度减慢，分裂指数、集落形成、ＣｏｎＡ凝集和ＣｏｎＡ受体、ＤＮＡ含量及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入均明显减少，染色体分布较集中，出现二倍体细胞等变化。进一步以三种单克隆抗体测试，ＡＦＰ和ｒａｓ
- 葛曰萍陈维洁王晨光邹东霆陈尊器
- 关键词：肝瘤癌细胞逆转
- 不同转移潜能肺癌细胞的基因表达差异被引量：3
- 2003年
- 目的 :了解肺癌转移过程中基因的参与 ,进而为肺癌诊断、治疗提供依据。方法 :选用 5个不同转移潜能的体外培养肺癌细胞株H1 2 99、HLAMP、PGCL3、PAa和NiS作为研究对象 ,以永生化的支气管上皮细胞 1 6HBE为对照 ,采用含有 80 0个基因探针的肺癌相关基因芯片LUs ,研究各细胞株基因表达的差异。结果 :5个肺癌细胞株差异表达的基因共有 35 5个 ,5株细胞共同上调或下调的基因仅有 4个 ,基因表达的变化在不同细胞株之间明显表现出多态性。其中 4个转移株与无转移的NiS间比较 ,有 9个基因表达差异 ;3个高转移细胞株H1 2 99、HLAMP、PGCL3与和低转移细胞株PAa和无转移NiS之间比较 ,有 1 3个基因表达差异。这些基因大多是膜蛋白、细胞骨架蛋白 ,或和细胞信号转导有关 ,基因功能复习提示和肿瘤转移有可能的关联性。结果还显示和细胞膜陷窝结构有关的蛋白可能在肺癌转移过程中具有较大的意义。结论 :基因芯片方法对于筛选肺癌转移相关基因有独特的优势 ;获得的差异表达基因具有较强的代表性 。
- 李冰宋春林付欣邹东霆
- 关键词：肺癌转移CDNA芯片基因表达谱
- 女孩性早熟患者中检出一种新的雌激素受体基因突变(英文)被引量：5
- 2005年
- 对收集的16例未见血液雌激素水平升高的临床女孩性早熟患者的外周血样本,利用PCR-SSCP方法筛查了雌激素受体基因编码区的可能突变。结果在1例患者发现:其雌激素受体基因8号外显子编码精氨酸的548位密码子,1个C→T转换导致精氨酸残基被半胱氨酸所替代;这一突变使DNA序列中产生1个BtsⅠ酶切位点,通过PCR-RFLP实验证明此患者为Arg548/Cys548杂合体。为证明该突变在性早熟发生中的作用,构建了一个雌激素受体反应元件报道质粒pGL3-promoter-ERE;成功将野生型ESR1基因定点突变,并克隆于PCR3.1真核表达质粒。报道质粒和表达质粒共转染CMF-7细胞,Cys548突变能够增加萤火虫荧光素酶的产生。结果证明该突变雌激素受体在体外具有高活性特征,因而推测在体内也可能具有相应的过高活性,从而导致女孩的性早熟。
- 李冰刘丽付欣周问渠邹东霆赵小媛蔡艳娜涂洪彬刘启才陈耀勇
- 关键词：雌激素受体基因突变女孩性早熟
- 雌激素受体Arg548/Cys548基因突变导致受体的高敏感性被引量：1
- 2011年
- 目的:研究雌激素受体新突变Arg548/Cys548对受体介导的下游基因表达调控的影响,并探讨其机理和在女孩性早熟中的作用。方法:利用已构建的雌激素受体反应元件报道质粒pGL3-promoter-ERE,分别与野生型ESR1表达质粒PSG5-wtER和定点突变受体表达质粒PSG5-mutER共转染CMF-7和MDA-MB-231细胞,转染后加入雌激素、类似物和拮抗物处理,检测转染细胞的荧光素酶活性值。结果:转染突变型受体的CMF-7和MDA-MB-231细胞的荧光素酶活性值明显升高,在生理浓度雌激素及类似物植物类雌激素异黄酮刺激下,Cys548突变型受体基因转染比野生型受体转染的CMF-7和MDA 231细胞均表现出显著强烈的增加萤火虫荧光素酶的活性,表现高敏感的特性;单独加入TAM后荧光素酶活性值没有变化,而同时加入E2和TAM后荧光素酶活性值比加入E2的荧光素酶活性值则明显下降。结论:Cys548突变受体在体外具有较高的敏感性,对药物雌二醇及类似物反应敏感,拮抗剂TAM对受体的活性没有抑制作用,却能竞争性降低雌激素及类似物的作用。
- 邹东霆周问渠付欣陈耀勇李冰
- 关键词：基因突变转染荧光素酶
- 转染赤IPL基因对诱导人恶性胚胎横纹肌瘤RD细胞死亡的影响被引量：1
- 2004年
- 涂洪斌李冰陈耀勇邹东霆陈维洁
- 关键词：RD细胞基因转染细胞坏死
- 5个不同肺癌细胞株的基因差异表达谱被引量：4
- 2002年
- 目的 :希望获得细胞间基因表达的异同 ,对癌细胞的形成和发展中基因参与提供分析线索。方法 :选用 5个不同转移潜能及来源的体外培养肺癌细胞株H12 99,HLAMP ,PAa ,PGCL3和NiS作为研究对象 ,以永生化的支气管上皮细胞 16HBE为对照 ,采用含有 80 0个基因探针的肺癌相关基因芯片LUs,研究了基因表达的差异。结果 :5个肺癌细胞株差异表达的基因共有 35 5个 ,但共同上调或下调的基因仅有 4个 ,基因表达的变化在不同细胞株之间明显表现出多态性。比较三个高转移细胞株和两个低转移细胞株 ,有 12个基因表达改变出现在高转移细胞株而在低转移株未见明显变化 ,其中有 3个已报道的转移相关基因和 9个未报道和转移相关的基因 ,这些基因大多是膜蛋白、细胞骨架蛋白或 /和细胞信号转导有关 ,基因功能复习提示和肿瘤转移有可能的关联性。结论 :cDNA芯片对于肺癌相关基因的筛选是一个非常有效的研究手段 ;对于临床诊断应用 ,需要在大规模数据收集的基础上建立必要的模式 ,通过多基因系统分析 ,才能获得有效的应用。
- 陈耀勇李冰宋春林付欣邹东霆
- 关键词：肺癌细胞株CDNA芯片基因表达
