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生产紫穗槐－4,11－二烯和青蒿酸的方法: 本发明提供了一种在酿酒酵母细胞中生产紫穗槐－4，11－二烯的方法，包括：i)将HMG－CoA还原酶基因导入酿酒酵母细胞中的第一位点；ii)将紫穗槐－4，11－二烯合酶基因和FPP合酶基因一起导入酿酒酵母细胞中的第二位点，...; 朱平王伟孔建强戴均贵程克棣王丽娜郑晓东; 文献传递

生产紫穗槐-4,11-二烯和青蒿酸的方法: 本发明提供了一种在酿酒酵母细胞中生产紫穗槐-4，11-二烯的方法，包括：i)将HMG-CoA还原酶基因导入酿酒酵母细胞中的第一位点；ii)将紫穗槐-4，11-二烯合酶基因和FPP合酶基因一起导入酿酒酵母细胞中的第二位点，...; 朱平王伟孔建强戴均贵程克棣王丽娜郑晓东; 文献传递

HMG-CoA还原酶和FPP合酶基因拷贝数对紫穗槐-4,11-二烯酵母工程菌产量的影响被引量：12: 2007年; 从青蒿中克隆了紫穗槐-4,11-二烯合酶基因(ADS),从酿酒酵母中克隆了HMG-CoA还原酶(HMGR)催化结构域和FPP合酶(FPPS)基因。构建含ADS基因的酿酒酵母表达载体pYeDP60/G/AS,将其转入酿酒酵母,获得能产生紫穗槐-4,11-二烯的酵母工程菌,以朱栾倍半萜为参照,产量为10μg.L-1。另外构建了含HMGR和FPPS基因的酵母表达载体pGBT9/A/HMG/G/FPP,将该载体和pYeDP60/G/AS共转入酿酒酵母,得到第二个能产生紫穗槐-4,11-二烯的酵母工程菌,产量为23.6 mg.L-1,结果表明增加HMG-CoA还原酶和FPP合酶基因的拷贝数能显著增加酵母工程菌的紫穗槐-4,11-二烯产量。; 孔建强程克棣王丽娜郑晓东戴均贵朱平王伟; 关键词：HMG-COA还原酶

甲型H1N1流感病毒非结构蛋白NS1与人CPSF30结合拮抗剂筛选模型的建立及药物筛选被引量：6: 2010年; 利用酵母双杂交技术研究甲型H1N1流感病毒非结构蛋白NS1和人切割与多聚腺苷酸化特异因子30kDa亚基(CPSF30)的相互作用,构建了一个酵母模型用于筛选NS1和CPSF30相互作用的拮抗剂,从而为筛选抗甲型H1N1流感病毒药物奠定基础。采用连续重叠PCR技术克隆得到H1N1流感病毒NS1基因。提取人HeLa细胞RNA,通过RT-PCR克隆得到人CPSF30基因。将NS1基因克隆到表达载体pGBKT7中获得诱饵载体pGBKNS1,将CPSF30基因克隆到载体pGADT7中获得捕获载体pGADCPSF;将pGBKNS1和pGADCPSF共转入酿酒酵母AH109,获得重组酿酒酵母AH109[pGADCPSF+pGBKNS1]。利用该模型筛选了30余种中成药,发现双黄连口服液等4种中成药能抑制NS1和CPSF30之间的相互作用。; 孔建强沈君豪黄勇阮仁余项斌郑晓东程克棣王伟; 关键词：H1N1流感病毒中药筛选

中国红豆杉细胞色素P450还原酶的基因克隆、表达与活性分析被引量：17: 2010年; 细胞色素P450还原酶(Cytochrome P450 reductase,CPR)是细胞色素P450羟基化酶电子传递链的组成部分,在生物体内起着重要的电子传递作用。文章从中国红豆杉(Taxuswallichiana var. Chinensis)愈伤组织细胞中克隆CPR基因(TchCPR),TchCPR含有一个2154bp碱基的阅读框,编码717个氨基酸残基;在氨基酸水平上它与裸子植物细胞色素P450还原酶的同源性(>82%)高于其他被子植物的细胞色素P450还原酶(<74%)。在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达了全长和从N-端截短不同数目氨基酸残基的6个融合肽段,经亲和层析纯化,分析了表达的不同长度融合蛋白的电子传递效率。结果表明截短长度大于61个氨基酸残基肽段的胞色素P450还原酶都能够诱导表达,在表达水平上无显著差异,而截短61个氨基酸的CPR融合蛋白电子传递的催化活性(1.6057nmol Cyt Cred/min/μg TchCPR融合蛋白)高于其他4个融合蛋白。; 阮仁余孔建强郑晓东张书香秦成蕴程克棣王建明王伟; 关键词：中国红豆杉

青蒿P450 cDNA基因的克隆及生物信息学分析被引量：9: 2007年; 目的:对青蒿P450 cDNA基因进行克隆和生物信息学分析。方法:通过RT-PCR,从青蒿cDNA中克隆了1个P450基因;通过生物信息学方法,对其结构特点进行分析。结果:该P450 cDNA基因ORF为1 464 bp,编码488个氨基酸,该序列在GenBank上的登录号为DQ667171。编码蛋白是一个中等大小的A型P450,相对分子质量54.992 kDa;等电点8.83,定位于线粒体,和CYP71AV1具有很高的同源性。结论:该青蒿P450和CYP71AV1在进化和性质上很接近,可能在青蒿中执行类似功能。; 孔建强王伟郑晓东朱平程克棣; 关键词：青蒿 P450 生物信息学分析

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郑晓东