郑葆芬
- 作品数:9 被引量:10H指数:2
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- 人类T细胞白血病病毒Ⅰ型的血清学调查
- 1993年
- 人类T细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV-Ⅰ)主要导致T细胞白血病和T细胞淋巴瘤,并且在一些自身免疫性的疾病,如系统性红斑狼疮(SLE)患者中有较高的感染率。我们对上海周围地区与HTLV-Ⅰ有关的部分病例进行检测。运用免疫荧光法从临床白血病患者中筛选了6例T淋巴细胞性白血病患者,用病理切片诊断出28例皮肤T细胞淋巴瘤患者以及56例SLE患者;分别抽取患者的血清样品,运用ELISA和Western蛋白印迹电泳的方法进行检测。从上述90例标本中,发现一例T淋巴细胞性白血病患者血清呈阳性反应。
- 马继延郑葆芬陈晓红谢红燕
- 关键词:T细胞血清学白血病病毒
- 小鼠SRS白血病病毒前病毒DNA片段的分子克隆被引量:1
- 1993年
- 从重组质粒pSF_(11)中提取SRS白血病病毒(SRSV)5kb DNA片段,用双脱氧法对其两末端进行测序,每端测得约150bp,从中筛选出PCR引物。SRSV新鲜感染NIH/3T3细胞,从感染细胞的胞质内提取前病毒DNA。用PCR法对SRSV前病毒DNA中的约3.4kb片段进行扩增,扩增产物用BamHⅠ酶切后与碱性磷酸单酯酶处理的pUC_(19)载体连接,并转化大肠杆菌JM_(103),得到含约3.4kb前病毒DNA片段插入子的重组质粒,并经Southern Blot证实,定名为pSF_(12),该克隆的SRSV DNA片段含有部分的env和pol基因。pSF_(12)和pSF_(11)构成SRSV的完整基因克隆。
- 李赤波郑葆芬
- 关键词:白血病病毒分子克隆
- 病毒性L6565白血病细胞克隆株的生物学、病毒学和反义c-myc的实验治疗研究
- 殷莲华姜延芳赵新永胡安群杨轶群程立赵凤娣吴春根郑葆芬孔宪寿
- 该文阐述了L6565白血病细胞克隆株的研究情况及成果。1966年在国内首先报导建成了小鼠病毒性L6565淋巴细胞白血病瘤株模型。生物学和分子生物学研究证明L6565克隆细胞携有致白血病活性的C型RNA肿瘤病毒和核内c-m...
- 关键词:
- 关键词:病毒反义C-MYC
- 小鼠腹水瘤病毒(SRSV)及其核糖核酸的纯化和某些性质的研究被引量:4
- 1989年
- 从感染NIH3T3小鼠成纤维细胞上清液中分离小鼠腹水瘤病毒,用蔗糖密度梯度离心法纯化。从新鲜病毒中取小鼠腹水瘤病毒RNA,并用酚-氯仿抽提和蔗糖梯度分离。各组分的沉降系数(S)和分子量通过超速离心凝胶电泳分析测定。SRSV RNA主要由两组分组成,一是沉降系数约60~70S(热处理后约35S),还有少量18S和28S,另一是4~5S。35S组分在体外能指导无细胞蛋白的合成。
- 单易非纪宏吴正泉吕妹珍郑葆芬程立孔宪寿
- 关键词:RNA沉降系数纯化
- 含SRSV U3区的重组Moloney小鼠白血病病毒的构建及其致病特性
- 1991年
- 质粒pSF11含有小鼠白血病病毒(SRSV)基因组5kb Bam H Ⅰ片段。应用限制性内切酶分析及Southern印迹杂交技术,确定了长末端重复区(Long terminal repeats,LTR)在pSF11上的位置。pSF11经Bg1 Ⅱ酶解,Klenow酶补平5’粘性末端,碱性磷酸酯酶脱磷后与EcoR Ⅰ Linker连接,转化大肠杆菌C600,经EcoRⅠ酶切筛选得到重组子 pER 1。pER 1经ClaⅠ+EcoR Ⅰ酶切,电泳回收含SRSV LTR的2.55kbDNA,与p63-2(含Moloney小鼠白血病病毒(leukemia virus,M-MuLV)完整基因组)的ClaⅠ+EcoRⅠ14.1kbDNA连接,转化C600受体菌,得到一个M-MuLV 3’LTR被SRSV LTR取代的重组质粒pMS。纯化后转染NIH 3T3细胞,经XC合胞试验及逆转录酶活性测定证明,转染细胞含有M-MuLV与SR-SV的重组病毒MSV,将MSV经皮下接种到新生的NIH Swiss小鼠,通过对小鼠发病阶段血像、大体解剖以及组织病理学检查,发现该重组病毒MSV具有与SRSV极其相似的致病特征。
- 陈晓红严冬郑葆芬陶鸿根丁令玫Hung Fan
- 关键词:白血病病毒基因重组
- 小鼠SRS白血病病毒的研究
- 1990年
- 小鼠SRS腹水瘤株是我校病理生理教研室于1971年用L6565白血病小鼠的胸腺细胞悬液接种到昆明小鼠腹腔而建立的;生物物理教研室及病生教研室在分离和鉴定小鼠SRS白血病病毒(SRSV)、建立SRSV感染的细胞系以及阐明SRS病毒基因组和病毒蛋白的分子生物学性质方面作了深入的研究,概述如下:1、应用分子筛凝胶柱层析及超离心法分别从昆明种小鼠SRS腹水瘤上清液和瘤细胞中分离提取了有生物活性的SRS白血病病毒(SRSV)。经电子显微镜观察表明,
- 郑葆芬周金涛李其翔钟德刚单易非程立
- 关键词:白血病病毒小鼠腹腔SRS腹水瘤瘤株电子显微镜观察
- 聚合酶链反应中引物的计算机辅助筛选
- 1994年
- 利用计算机辅助筛选聚合酶链反应(PCR)的扩增引物。计算机程序根据引物筛选规则编写。这些规则包括:①引物的3′端均以GC对结尾;②引物的长度为18~的个寡核苷酸;③每个引物中的GC含量为45%~60%;④避免引物自身及引物之间的同源性。由此我们设计了SRS小鼠白血病病毒的引物,成功地扩增了3.4kb的大片段目的基因。实验结果证明了由此法筛选出来的引物的有效性和特异性。
- 李赤波吴春根郑葆芬
- 关键词:聚合酶链反应引物计算机
- L6565白血病克隆细胞培养上清液的病毒特性和致病性被引量:6
- 2001年
- 目的 探讨小鼠L6 5 6 5克隆细胞株培养上清液中病毒的特性及其致病性。方法 从XC试验、逆转录酶活性、NB嗜性等方面了解培养上清液中病毒的特性 ;将培养上清液和超离心浓缩液分别皮下注射SSB系新生小鼠 ,观察其致白血病活性。结果 L6 5 6 5克隆细胞培养上清液的XC试验呈阳性 ,并具有逆转录酶活性和NB嗜性。培养上清液能诱发T淋巴细胞白血病 /淋巴瘤 (TL)和B淋巴细胞白血病 /淋巴瘤 (BL) ,发病率为 5 0 % (5只 / 10只 ) ;超离心浓缩液可诱发TL、BL和粒细胞白血病 (GL) ,发病率为 10 0 % (10只 / 10只 )。结论 小鼠L6 5 6 5白血病克隆细胞株培养上清液中存在具NB嗜性的、可诱发SSB系新生乳鼠TL。
- 胡安群姜延芳吴春根郑葆芬
- 关键词:白血病病毒白血病基因重排
- 小鼠腹水瘤病毒RNA的提纯和体外翻译被引量:2
- 1990年
- 从感染小鼠腹水瘤病毒(SRSV)的NIH3T3小鼠成纤维细胞培养液中,分离SRSV,并提取病毒核酸(SRSV RNA),通过超速离心和凝胶电泳测定RNA的沉降系数和分子量。SRSV RNA主要由两部分组成:①沉降系数(8)约60~70S(热处理后约35S)及少量18S和28S;②是4~5S。高分子病毒RNA在网织红细胞无细胞系统中刺激放射性氨基酸掺入。对翻译产物分析表明:至少有3个蛋白的分子量相应于病毒蛋白。
- 单易非纪宏吴正泉吕妹珍郑葆芬程立孔宪寿
- 关键词:RNA提纯