郝顺祖
- 作品数:16 被引量:66H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院药物研究所更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金江苏省教育厅自然科学基金美国中华医学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- cGMP特异性磷酸二酯酶5活性及其抑制剂的研究
- 2001年
- 目的研究以cGMP为特异底物的磷酸二酯酶 5 (PDE5 )的水解酶活性及PDE5选择性抑制剂西地那非(sildenafil)的抑制作用。方法以牛阴茎海绵体为原料 ,通过快速蛋白液相系统分离纯化得到PDE同工酶 ,然后以3 H cGMP为底物 ,经纯化的PDE同工酶催化水解为3 H GMP ,进一步在含 5′ 核苷酸酶的蛇毒液作用下 ,脱去 5′ 磷酸生成3 H 鸟苷 ,在闪烁剂激发下测定3 H 鸟苷的变化 ,绘制PDE活性曲线。以不同剂量的PDE5选择性抑制剂西地那非作用于PDE5 ,经DixonPlots法处理结果以观察西地那非的抑制效应。结果由牛阴茎海绵体纯化得到三个PDE同工酶峰 ,其中第三个峰对cGMP水解活性最强 ,且西地那非对第三峰抑制作用明显。结论海绵体中的PDE以cGMP 特异的PDE5为主 ,西地那非是PDE5的选择性抑制剂 ,通过以上实验观察可初步确定第三峰为PDE5 ,其结果与文献报道相符。
- 郝顺祖黄诒森张均田
- 关键词:药理
- 骨髓间充质干细胞和部分肿瘤细胞中Nucleostemin基因的表达被引量:37
- 2005年
- 以分离的人胚胎和大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs) ,6种肿瘤细胞株 ,裸鼠肿瘤和转移瘤组织为实验材料 ,以大鼠心肌组织和人胎盘组织为对照 ,探讨nucleostemin基因的表达情况 .RT PCR结果显示 ,nucleostemin基因在MSCs、肿瘤细胞和肿瘤组织中均有不同程度的表达 ,而大鼠心肌和人胎盘组织中无表达 .DNA测序结果证明 ,扩增的PCR产物与GenBank提供的DNA序列完全同源 .SCID裸鼠肿瘤动物模型定量PCR结果证实 ,nucleostemin的mRNA在裸鼠肿瘤组织和转移瘤组织中表达较高 .研究结果表明 ,在细胞中nucleostemin基因不同水平的表达可能与MSCs、肿瘤细胞的增殖和肿瘤的发生、发展与转移有关 .
- 钱晖许文荣王文兵韩崇旭郝顺祖朱伟孙晓春胡嘉波黄诒森
- 关键词:肿瘤细胞人胎盘组织骨髓间充质干细胞N基因PCR产物
- 人参皂甙Rg1新用途
- 本发明涉及人参皂甙Rg1的新用途,尤其是在预防或治疗男性性功能障碍如勃起功能障碍中用途。
- 张均田王晓英郝顺祖黄诒森
- 文献传递
- 人参皂甙Rg1对体外磷酸二酯酶5活性的影响被引量:6
- 2004年
- 目的 :观察人参皂甙Rg1对磷酸二酯酶 5 (PDE5 )酶活性的影响。 方法 :应用12 5I放射免疫法 ,测定不同浓度的人参皂甙Rg1对PDE5活性的影响 ,并以西地那非作为阳性对照。 结果 :人参皂甙Rg1对PDE5有抑制作用 ,从而阻断cGMP的水解 ,能提高cGMP水平。结论 :人参皂甙Rg1能有效抑制PDE5活性 ,其半数有效浓度IC50 为 7 2 4nmoI/L ;西地那非IC50 为 3 4 2nmol/L。
- 郝顺祖孙晓春钱晖李君荣
- 关键词:CGMPPDE5磷酸二酯酶5人参皂甙RG1西地那非活性抑制作用
- 磷酸二酯酶研究进展被引量:17
- 2000年
- 郝顺祖黄诒森
- 关键词:磷酸二酯酶同工酶抑制剂
- 人磷酸二酯酶同工酶3A在昆虫杆状病毒系统中的表达被引量:1
- 2005年
- 目的利用杆状病毒表达系统探讨人磷酸二酯酶同工酶3A(HPDE3A)在Tn细胞中的表达。方法用重组HPDE3A杆状病毒感染昆虫Tn细胞进行蛋白表达,通过RTPCR,SDSPAGE和Westernblotting技术检测HPDE3A表达情况。结果重组杆状病毒在感染Tn细胞后形态变化明显,获得表达产物,RTPCR扩增结果证实了Tn细胞中HPDE3A的mRNA水平增高,Tn细胞能够表达出与HPDE3A多克隆抗体结合的蛋白,蛋白分子质量约为120kD。结论HPDE3A在昆虫杆状病毒表达系统中可以稳定表达,为进一步研究HPDE3A的生物学活性及筛选HPDE3A抑制剂奠定了基础。
- 严永敏许文荣朱海波张岭费仁仁王晓良钱晖郝顺祖王文兵
- 关键词:杆状病毒表达系统
- 小鼠肝损伤模型的建立及HSS对肝的保护作用的初探
- 1996年
- 从三周龄幼鼠制备了肝细胞再生刺激物质(Hepaticregenerationstimulatingsubstace,HSS)研究结果提示:注射CCl4导致小鼠血清ALT显著升高,AST也明显增高,表明CCl4致小鼠急性肝损伤,而HSS对肝损伤具有显著保护作用,为深入研究HSS对肝保护作用机理、HSS用于临床的可行性提供了基础。
- 郝顺祖黄新祥韩伟国黄中仕
- 关键词:肝损伤动物模型肝细胞
- 人参皂甙Rg1的用途
- 本发明涉及人参皂甙Rg1的新用途,尤其是在预防或治疗男性性功能障碍如勃起功能障碍中用途。
- 张均田王晓英郝顺祖黄诒森
- 文献传递
- EB病毒胸苷激酶基因的克隆
- 1995年
- EB病毒是一种常见的人类疱疹病毒,现已证实EB病毒与Burkitt淋巴瘤、低分化的鼻咽癌在病原学上有密切的关系[1、2],本实验构建了两种EB病毒胸苷激酶(TK)基因的重组体,为研究TK在EB病毒复制和致癌过程中的作用奠定了基础。
- 郝顺祖马涧泉
- 关键词:EB病毒胸苷激酶基因克隆
- 从牛海绵体组织分离纯化磷酸二酯酶5
- 2004年
- 目的 :纯化磷酸二酯酶 5 (PDE5 )用以研究其抑制剂及临床意义。方法 :利用快速蛋白液相层析系统 ,NaCl线性梯度分离PDE5。结果 :从牛海绵体组织与牛海绵体血管均得到 3个蛋白峰 ,Western印迹实验证实峰 1为PDE5 ,其余二峰可能为PDE2和PDE3。结论 :哺乳类海绵体组织有cGMP特异性PDE5存在 ,在海绵体血管尤为丰富。采用快速蛋白液相系统成功分离PDE5 ,方法简便可靠。
- 郝顺祖钱晖王卉放钱宇平黄诒森张均田
- 关键词:磷酸二酯酶5CGMP分离纯化