钱莺娟
- 作品数：58 被引量：193H指数：8
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 14型蓝舌病病毒VP7蛋白原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量：4
- 2020年
- 为建立蓝舌病(bluetongue,BT)的血清学诊断方法,本研究通过得到14型蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的s7基因,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,原核表达得到VP7蛋白,并对表达的包涵体VP7蛋白进行纯化,Western blot分析表明,纯化的VP7蛋白具有良好的抗原性。以纯化的VP7蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法。该方法与羊痘阳性血清,羊口蹄疫阳性血清和羊的小反刍兽疫阳性血清均无交叉反应,与中和试验比较,两者符合率为90%,ELISA批内和批间重复性试验显示,D值的变异系数小于10%。说明本方法具有良好的特异性和重复性。本研究在国内首次建立了14型BTV抗体间接ELISA方法,可用于BTV感染的流行病学调查以及疫苗接种动物的抗体水平监测,为以后相关BTV ELISA检测试剂盒研发提供技术平台。
- 孙雯张莹辉曹雨朱真杜吉革李启红陈小云姚文生钱莺娟印春生
- 关键词：蓝舌病病毒VP7蛋白原核表达间接ELISA
- 表达绿色荧光蛋白的重组CVI988病毒的构建及特性被引量：9
- 2003年
- 提取马立克氏病毒Ⅰ型疫苗毒株CVI988的总DNA为模板,利用PCR技术扩增出病毒生长非必需的US2基因并克隆入T-easy载体。将CMV启动子和增强子控制的含GFP基因表达盒克隆入US2基因中,成功构建了含GFP基因的转移质粒载体pGUS2GFP。用脂质体将其与CVl988株共转染CEF细胞,用96孔板稀释法得到纯化的表达绿色荧光蛋白的重组CVI988病毒株rCVIGFP,并分别测定其在体内和体外的生长情况。表达EGFP基因的重组病毒在细胞上生长曲线与亲本毒CVI988类似,体外实验表明,1日龄腹腔接种该重组毒后,可以从鸡体内分离到表达绿色荧光的病毒。
- 张雪莲范伟兴周玉传缪德年钱莺娟陈溥言
- 关键词：绿色荧光蛋白重组病毒马立克氏病病毒
- BTV和PPRV双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2022年
- 为建立一种能够同时检测蓝舌病病毒(BTV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)的快速检测方法,本研究选取蓝舌病病毒的NS3基因和小反刍兽疫病毒的N基因作为靶基因,参照GenBank上公布的两种基因序列,通过序列比对后选取一段保守性较高的区域,利用Beacon designer 8设计引物和探针并优化反应体系及反应条件,建立了双重荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,该方法检测BTV和PPRV阳性质粒标准品的最低检出量分别为1.7 copies/μL和1.2 copeis/μL;与山羊痘病毒、羊口疮病毒、口蹄疫病毒、羊腐败性梭菌、布氏杆菌及弓形虫无交叉反应,具有良好的特异性;其组间重复性和组内重复性的变异系数均小于2%,表明该方法具有较好的重复性。结果表明,建立的双重荧光定量RT-PCR检测方法适用于BTV和PPRV的快速检测。
- 勾倩倩杜吉革李启红李倩琳赵洋钱莺娟印春生郑龙三
- 关键词：蓝舌病病毒小反刍兽疫病毒
- Tubacin对蓝舌病毒感染的抑制作用
- 2019年
- 蓝舌病(bluetongue,BT)是由蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)感染反刍动物,包括山羊、绵羊、水牛和骆驼等,引起的非接触性传染病,以口腔、鼻腔及胃黏膜发生溃疡性炎症病变为主要特征,库蠓是其主要传播媒介。BTV传播相当广泛,除了南极洲外的所有洲都有发现,近20年间在欧洲肆虐传播,造成了巨大的经济损失。目前发现的BTV包含26个血清型,型间没有交叉保护作用,使用传统疫苗只能提供部分保护。虽然目前已经有针对多种血清型BTV重组疫苗的研究,但保护效果并不理想。因此,研究防治BT的药物具有重要的应用价值。本研究发现,组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的特异性抑制剂Tubacin能够抑制13型BTV感染,通过半定量PCR、Western blot、TCID50等试验验证,Tubacin处理后细胞病变减轻,病毒RNA和蛋白表达水平下降,上清中病毒粒子含量减少。结果证明Tubacin可在一定程度上抑制BTV感染,Tubacin是抗BTV的候选药,HDAC6可能是抗BTV感染的靶点之一。
- 陈新曹雨薄宗义陈欢孙雯张志芳印春生钱莺娟JUNG Yong-sam戴建君
- 关键词：蓝舌病抗病毒
- 非洲猪瘟病毒与宿主细胞相互作用研究进展被引量：18
- 2020年
- 非洲猪瘟(ASF)自2018年8月在我国暴发,对养猪业构成巨大威胁.该病是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的家养猪高热、急性和高死亡率的出血症和淋巴组织坏死症;认识和了解病原ASFV与宿主的相互作用是理解致病机制的基础和疫病防控的前提.本文对ASFV与宿主细胞受体和内体系统的互作、基因转录和蛋白合成系统的互作、细胞凋亡和内质网应激系统的互作、天然免疫干扰素应答系统的互作、抗原递呈细胞的互作五个方面现有研究进展进行综述;并试图在此基础上理解ASFV的免疫保护和免疫逃逸作用,思考ASFV与宿主互作中需要回答的问题,为研制保护性疫苗和深入认识ASF致病机制提供线索.
- 敖大陈南华钱莺娟钱莺娟陈鸿军郭晓宇张泉
- 关键词：非洲猪瘟病毒宿主相互作用免疫逃逸
- 黄腐酚在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中的用途
- 本发明公开了黄腐酚在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中的用途，所述黄腐酚的质量百分比含量不低于99.75％，其应用剂量为1‑10μM/L；黄腐酚用于抗猪流行性腹泻病毒效果非常显著，安全、毒副作用少，药物残留低且无污染。
- 钱莺娟郑龙三陈新薄宗义
- 两性霉素B对猪流行性腹泻病毒入胞的抑制作用研究
- 2023年
- 通过测定两性霉素B(amphotericin B,AmpB)的细胞毒性、半数抑制浓度以及利用Western blot、间接免疫荧光、空斑形成、内吞等试验方法探究AmpB对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的抑制作用及其分子机制。结果显示:20μmol/L浓度范围内,AmpB对Vero-E6和Marc145细胞毒性极低;在Vero-E6细胞,AmpB对PEDV HLJBY和CV777毒株的半数抑制浓度(IC_(50))分别为0.5和0.3μmol/L,在Marc145细胞,AmpB对HLJBY和CV777的IC_(50)均为0.3μmol/L;AmpB处理几乎能阻断病毒感染细胞;AmpB主要抑制PEDV入胞和细胞巨胞饮作用。本研究为研制抑制PEDV或广谱抑制冠状病毒药物提供了新线索。
- 赵普陈欢张财盛明鑫钱莺娟戴建君郑龙三
- 关键词：PEDV两性霉素B
- 黄腐酚对猪流行性腹泻病毒的体外抑制作用被引量：5
- 2020年
- 猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种以仔猪水样腹泻、呕吐、脱水和高死亡率为主要特征的高度接触性传染病。该病首先在欧洲出现地区性暴发,2000年后在亚洲流行严重,给全球养猪业造成了巨大的损失。由于PEDV毒株变异迅速,研究对PEDV具有抑制作用的天然活性化合物对于了解病毒感染致病机制以及防控PED具有重要意义。本研究通过RT-PCR、空斑形成试验、Western Blot和MTT试验等方法探究黄腐酚是否对PEDV感染具有抑制作用,并验证其作用效果。结果显示,黄腐酚能够明显抑制PEDV感染Vero-E6细胞中病毒M基因mRNA水平,显著降低细胞内和上清中病毒粒子的产生;黄腐酚对Vero-E6细胞几乎无毒性,抑制PEDV呈剂量依赖性且半数有效浓度为3.865μM;黄腐酚处理能明显降低PEDV不同毒株(如CV777和SQ2014毒株)感染细胞中N蛋白表达水平。本研究为进一步探究黄腐酚抗PEDV感染机制,研制抗PEDV或广谱抗冠状病毒药物奠定了基础。
- 赵诗莹陈新陈欢钱莺娟郑龙三戴建君
- 关键词：黄腐酚
- 蓝舌病病毒小反刍兽疫病毒羊口疮病毒和山羊痘病毒多重荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：2
- 2022年
- 为建立一种能够同时检测蓝舌病病毒(BTV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)和山羊痘病毒(CaPV)的方法,基于TaqMan探针技术,分别以NS3、N、F1L和P32为靶基因设计特异性探针和引物。以特异性引物扩增目的基因并构建重组质粒标准品。通过优化反应体系建立多重荧光定量PCR检测方法,并用此方法检测临床样品。结果显示,该多重荧光定量PCR标准曲线呈线性关系,对BTV、PPRV、ORFV和CaPV的扩增效率分别为100%、91%、91%、95%;该方法具有较高的灵敏性和特异性,对BTV、PPRV、ORFV和CaPV阳性质粒的最低检出量分别为17、12、8和9 copies/μL,与口蹄疫病毒、腐败梭菌、布鲁菌及弓形虫无交叉反应;其重复性较好,组间变异系数和组内变异系数均小于5%。对232份样品进行检测,用该多重荧光定量PCR分别检出9份BTV、3份PPRV、3份CaPV和24份ORFV阳性样品,而用常规PCR分别检出7份BTV、3份PPRV、0份CaPV、12份ORFV阳性样品。综上,该方法能够同时检测BTV、PPRV、ORFV和CaPV,可用于羊病的鉴别诊断、流行病学调查和疫病防控。
- 勾倩倩杜吉革朱真陈小云赵辉赵洋钱莺娟印春生
- 关键词：蓝舌病病毒小反刍兽疫病毒羊口疮病毒山羊痘病毒
- 黎芦碱及黎芦提取物在制备抗病毒药物中的应用
- 本发明属于黎芦碱新用途，特别涉及黎芦碱及黎芦提取物在制备抗病毒药物中的应用。其中黎芦碱对猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、伪狂犬病毒、单纯疱疹病毒、流感病毒或非洲猪瘟病毒有抑制作用。本发明的黎芦提取物以及黎芦碱用于抗病...
- 钱莺娟郑龙三吴晓东张朝凤陈欢粟硕薛峰戴建君齐传翔
