陈峥宏
- 作品数：114 被引量：398H指数：9
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金贵州省社会发展科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 鱼腥草内生微生物的分布及其发酵液抑菌活性分析
- 2024年
- 【目的】探明鱼腥草内生菌的类群组成,筛选对幽门螺杆菌和金黄色葡萄球菌具有抑菌活性的菌株,为进一步开发抗生素类药物先导化合物提供物质基础。【方法】采用组织培养法对贵州地区鱼腥草全植株进行内生菌分离培养和纯化,提取内生菌株基因组DNA,应用PCR技术获得细菌16S rDNA和真菌ITS区扩增产物,经测序并进行BLAST比对确定内生菌属。用摇瓶发酵法制备内生菌发酵液,将发酵液用旋转蒸发仪浓缩,通过24孔板抑菌试验检测发酵液对幽门螺杆菌的抑菌活性;通过打孔法测定抑菌圈直径试验检测发酵液对金黄色葡萄球菌的抑菌活性。【结果】分离到内生细菌60株和内生真菌27株。其中,芽胞杆菌属(Bacillus)和刺盘孢属(Colletotrichum)分别为细菌和真菌的优势菌群,分别占内生细菌和内生真菌的78%和41%。检测到9株内生菌(Kg_(3)、Tg_(23)、Kg_(9)、Tg_(3)、Zg_(3)、Kj_(2)、Ty_(9)、Ty_(2)、Zy_(3))发酵液对幽门螺杆菌有抑菌活性,其中内生菌Kg_(3)发酵液对金黄色葡萄球菌也有抑菌活性。【结论】鱼腥草具有丰富的内生菌资源,其中芽胞杆菌属和刺盘孢属的含量较丰富。
- 陆秋丹赵璐陈峥宏
- 关键词：鱼腥草内生菌幽门螺杆菌金黄色葡萄球菌抗菌活性
- 幽门螺杆菌临床菌株克拉霉素耐药性及耐药基因突变位点分析被引量：8
- 2012年
- 目的检测贵阳地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株对克拉霉素耐药性及相关基因突变情况。方法采用琼脂稀释法对临床分离鉴定的Hp菌株,进行体外抗生素敏感试验,选取Hp克拉霉素耐药的临床菌株10株、克拉霉素敏感的临床菌株4株和质控菌株2株,进行23SrRNA基因功能区V区片段的PCR扩增和测序,与GenBank中公布的Hp菌株相关序列进行比对分析。结果贵阳地区Hp临床分离株对克拉霉素的耐药率达30.9%(13/42)。贵阳地区10株Hp耐药菌的23SrRNA基因片段的碱基突变包括T2183C(10/10)、T2245C(9/10)、A2144G(6/10)、C2196T(1/10)、A2224G(1/10),4株敏感菌株在2183、2196、2224和2245位点也存在碱基差异,2144位点的基因突变仅存于耐药菌株中。结论贵阳地区Hp克拉霉素耐药率较高,耐药菌株23SrDNA与耐药性相关的基因突变主要为A2144G。
- 司书梅张涛陈峥宏王菲吴晓娟綦廷娜杨廷秀
- 关键词：幽门螺杆菌克拉霉素耐药性基因突变
- 大鼠肺炎支原体感染的ELISA实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨支原体感染大鼠的血清抗体反应及其间接ELISA检查与诊断方法。方法将肺炎支原体疫苗分别以滴鼻、腹腔注射、尾静脉注射方式免疫大鼠,收集动物血清,以方阵滴定法和间接法确立ELISA检测实验的最适条件,用间接法检测不同方法与时间免疫动物的血清特异性IgG抗体。结果ELISA系统的最适工作条件包括抗原包被浓度10×10^(-6)g/ml、血清稀释度1:40、酶结合物1:5000。以该系统检测滴鼻免疫大鼠共21只,免疫6次2只大鼠血清抗体阳性(66．67%),免疫7次后阳性率达100%;腹腔免疫和静脉免疫大鼠各18只,免疫2次后2只大鼠可检出特异性抗体(66．67%),免疫5次后全部动物均为血清抗体阳性(100%)。结论肺炎支原体0．0016 g/只以滴鼻、腹腔注射、尾静脉注射的方法均能够使大鼠产生特异性抗体,以间接ELISA检测法检查腹腔免疫组和静脉免疫组大鼠血清免疫2次后即有部分大鼠血清抗体检测即呈阳性,5次后阳性率达100%,而滴鼻免疫组大鼠直至免疫6次后部分血清抗体检测才可呈阳性其阳性率与腹腔免疫和静脉免疫2次阳性率相当。间接ELISA法可有效检测支原体感染动物的血清特异性抗体,是一种具有较高特异性的快速简便方法。
- 吴晓娟王和陈峥宏
- 关键词：支原体ELISA免疫
- 评估PCR-荧光探针法在临床标本诊断中的应用价值被引量：4
- 2015年
- 目的评估PCR-荧光探针法在临床标本中快速检测结核分枝杆菌(MTB)和非结核分枝杆菌(NTM)的临床价值。方法收集贵阳市肺科医院2012年4月-2013年2月住院及门诊的2 403例患者送检标本,包括痰液、纤维支气管镜刷检物、胸水标本、脓性分泌物,对标本涂片抗酸染色检测,同时采用PCR-荧光探针法,即用双重PCR技术和Taqman探针技术相结合,提取患者标本中的分枝杆菌核酸进行定性检测,比较两者结果。结果 2 403例患者临床标本经萋尼抗酸染色涂片镜检阳性696例,抗酸染色涂片镜检阴性1 707例,其中非肺结核患者539例,菌阴肺结核患者1 168例;在696例涂片阳性的标本中,应用PCR-荧光探针法,MTB核酸阳性标本635例和NTM核酸阳性9例;1 707例抗酸杆菌涂片阴性标本中MTB核酸阳性264例和NTM阳性6例,539例非肺结核患者标本中检测出MTB核酸假阳性4例;MTB感染患者标本经抗酸染色涂片与PCR-荧光探针法检测,阳性率分别为37.3%及48.8%,即PCR-荧光探针法检测灵敏度较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用PCR-荧光探针法可快速在临床标本中检测和区分MTB和NTM,具有较高的敏感性和特异性,值得在临床中推广应用。
- 陈静陈峥宏欧维正毕雅坤王念蒙俊
- 关键词：结核分枝杆菌聚合酶链反应荧光染料
- 亚洲带绦虫六钩蚴和囊尾蚴的光学显微镜和扫描电镜观察被引量：2
- 2010年
- 目的了解亚洲带绦虫六钩蚴和囊尾蚴的形态及其表面超微结构。方法以人工胃液和人工肠液孵化亚洲带绦虫虫卵,密度梯度离心法纯化六钩蚴,于倒置显微镜观察其形态;以及经戊二醛及四氧化锇固定,梯度乙醇脱水,醋酸异戊酯置换,进行临界点干燥,喷碳、喷金,扫描电镜观察其表面超微结构。将六钩蚴经皮下注射感染小鼠,55 d后剖检取囊尾蚴,经胆汁孵化翻出头节,于光学显微镜直接观察或经硼酸卡红染色后镜检。另将囊尾蚴经PBS洗3次,依次经戊二醛固定、四氧化锇固定,梯度乙醇脱水,干燥、喷碳、喷金,扫描电镜观察。结果六钩蚴呈卵形,大小为（10.7~14×14~18.7）μm,表面凹凸不平,形成脊状突起。囊尾蚴呈椭圆形,囊膜表面见疣状突起。头节顶部有吻状顶突,顶突周围及凹陷处均密布大量菜花样突起。吸盘表面不光滑,底部有3~4圈珊蝴样排列的指状突起。颈节表面分布较多大小为（1~3×3~5.5）μm近似球形的颗粒。结论亚洲带绦虫六钩蚴表面凹凸不平,囊尾蚴有明显的吻状顶突,顶突处无小钩,但却分布大量的菜花样突起。
- 陈峥宏吴晓娟包怀恩郎书源
- 关键词：亚洲带绦虫六钩蚴囊尾蚴扫描电镜
- 贵州省黔南州幽门螺杆菌克拉霉素的耐药性及23S rRNA基因突变的特征被引量：3
- 2015年
- 目的:了解贵州省黔南州幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)克拉霉素耐药相关基因突变情况.方法:采用改良琼脂稀释法检测分离自黔南州人民医院的74株H.pylori对克拉霉素的敏感性,选取H.pylori克拉霉素耐药菌株22株、敏感株10株,以及NCTC11637进行23S rRNA基因功能区V区片段的PCR扩增和测序,与GenBank中收录的H.pylori敏感菌株U27270相关序列进行比对和分析.结果:74株H.pylori克拉霉素耐药率为29.7%(22/74).共发现10种突变类型,其中在耐药菌株及敏感菌株23S rRNA V区均存在的基因突变包括:T2183C、T2245C和T2321C;仅在耐药株(22株)中检测到的突变包括:A2144G(4/22)、A2224G(4/22)、C2196T(1/22)、C2289 T(1/22)、A2435G(1/22)、C2695A(1/22)、T2712C(1/22).结论:黔南州医院分离的H.pylori克拉霉素耐药率较高;与耐药性相关的23S rRNA基因突变主要为A2144G和A2224G;本院菌株存在A2435G、C2695A、T2712C 3种尚未见报道的突变.
- 綦廷娜潘科王菲魏刚蒋勇张人弘郑娟张丹丹陈峥宏
- 关键词：幽门螺杆菌克拉霉素耐药性突变
- 基因芯片技术检测贵州省结核分枝杆菌耐药基因KatG和inhA被引量：11
- 2015年
- 目的了解本地区结核分枝杆菌(MTB)异烟肼(INH)相关耐药基因katG和inhA的突变特征,评价基因芯片法对MTB INH耐药性检测的临床应用价值。方法应用基因芯片法对经PCR-荧光探针法鉴定为MTB阳性的2 738例病人标本进行INH耐药性检测,分析其相关耐药基因katG和inhA的突变特征,同时应用比例法检测上述同期送检的相同病人的同类型标本经罗氏培养MTB阳性菌株的INH耐药性,比较两种方法的检测结果。结果 2 738例MTB核酸阳性标本经基因芯片法检测,INH耐药465例,耐药率16.98%,其中以katG315(AGC→ACC)突变为主,基因突变率为78.06%,其次为inhA-15(C→T),katG315(AGC→AAC),突变率分别为16.13%和5.59%。上述病人同期送检的同类型标本有1 493例经罗氏培养MTB阳性,比例法检测,INH耐药255例,耐药率17.08%,对应的基因芯片法检测结果为INH耐药249例,耐药率16.68%。以比例法结果为判断标准,基因芯片法测定INH耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)及准确性分别为85.49%、97.50%、87.55%、97.03%和95.45%。结论本地区INH耐药以katG315(AGC→ACC)和inhA-15(C→T)突变类型为主;基因芯片对MTB INH耐药性检测具有高敏感性、特异性、准确性和快速性,可用于本地区MTB INH耐药性的快速检测。
- 欧维正陈峥宏陈静骆科文王燕秦万蒙俊
- 关键词：基因芯片异烟肼结核分枝杆菌
- 胃黏膜中球形幽门螺杆菌的鉴定与临床意义被引量：7
- 2017年
- 目的:对球形幽门螺杆菌(Helicobacter.Pylori,H.pylori)进行鉴定,探讨其临床意义。方法:胃镜下确诊的胃炎及消化性胃溃疡患者的胃黏膜组织标本进行H.pylori分离培养、尿素酶检测,对革兰阴性(G^-)弯曲杆菌和不典型球菌进行H.pylori特异性PCR鉴定,并对特异性PCR阳性的不典型球菌以H.pylori 16S r DNA通用引物扩增测序。结果:共获得80株G^-弯曲杆菌和5株不典型球菌,在传代培养中有24株弯曲杆菌发生球形变异;G^-弯曲杆菌的组织及细菌培养物尿素酶试验均为阳性,G^-不典型球菌的组织及细菌培养物为阴性,返祖为G^-弯曲杆菌后则为阳性;85株菌经特异性引物鉴定均为H.pylori阳性,G^-不典型球菌16S rDNA序列与数据库中H.pylori 16S rRNA基因序列碱基一致性均达99%,鉴定为H.pylori。结论:H.pylori可发生球形变异,这可能会造成临床实验室微生物学诊断的假阴性。
- 王琼陈峥宏杨杰潘科熊妍印琳郭长城
- 关键词：胃溃疡胃炎胃黏膜球形
- PCR扩增16SrDNA在幽门螺杆菌感染诊断中的运用被引量：18
- 2010年
- 目的 探讨16SrDNA聚合酶链式反应 （PCR）在幽门螺杆菌（Hp）感染检查中的应用价值.方法 疑似慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡患者于胃镜下取其病变部位组织活检标本,胃癌患者于术中取病变部位组织活检标本,进行Hp的分离培养、提取活检组织DNA进行16SrDNA PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,并将二者结果进行比较.结果 85例病例中,54例16SrDNA PCR阳性,阳性率为63.5%;34例Hp分离培养阳性,阳性率为40%.结论 两种检测方法阳性率相比较,PCR检查法明显优于分离培养法（P＜0.005）.
- 吴晓娟陈峥宏王菲
- 关键词：幽门螺杆菌细菌培养PCR
- 贵州省钩端螺旋体血清群特异性PCR鉴定结果与分析被引量：8
- 2015年
- 目的采用血清群特异性PCR技术了解贵州省近年钩端螺旋体(钩体)流行菌群,为贵州省钩体病的防控提供技术手段和科学依据。方法采用致病性钩体特异性PCR方法(G1/G2-PCR)对来自贵州省近年的钩体分离菌株进行鉴定,进一步应用基于致病性钩体O抗原基因的血清群特异性PCR(O-PCR)对贵州省近年的58株钩体分离株进行血清群鉴定,并采用显微凝集试验(MAT)对O-PCR方法的检测结果进行验证。结果 G1/G2-PCR检测结果显示58株菌株均为致病性钩体,O-PCR将58株致病性钩体菌株鉴定为黄疸出血群,与传统的MAT法鉴定结果一致。结论 O-PCR技术可作为我省钩体快速分群鉴定可靠的实验室诊断技术手段,贵州省近年的钩体流行菌群为黄疸出血群。
- 刘英陈红李沛丽马青王定明唐光鹏姚光海周敬祝陈峥宏李世军
- 关键词：钩端螺旋体血清群PCR
