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一种柑橘溃疡病菌的DNA水浴沉淀提取方法: 本发明一种柑橘溃疡病菌的DNA水浴沉淀提取方法。本发明方法将新鲜菌体加入洗涤缓冲液洗涤、再经裂解缓冲液水浴，抽提缓冲液及饱和酚、氯仿、异戊醇混合溶液抽提，乙醇洗涤沉淀后，晾干加入灭菌ddH2O溶解沉淀，在﹣20℃保存即可...; 易龙陶珍珍卢占军; 文献传递

柑桔衰退病毒分子生物学检测及基因型分析技术研究进展: 2014年; 由柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的柑桔衰退病是一种严重为害世界柑桔种植业的病害。随着我国柑桔产业的发展,柑桔衰退病为害日趋严重。为了解CTV分子生物学检测及基因型分析技术研究的进展,对相关文献报道进行了综述。; 陶珍珍周常勇; 关键词：柑桔衰退病毒分子生物学检测基因型分析

柑橘品种对不同基因型柑橘衰退病毒的抑制及变异的影响被引量：3: 2016年; 为研究不同柑橘品种对柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)不同基因型的抑制效果,将T36、T30、VT和T3等基因型CTV的毒源分别接种于‘赛蒙斯’甜橙、‘邓肯’葡萄柚、‘墨西哥莱檬’和‘强徳勒柚’,运用RT-qPCR技术检测被接种植株中CTV复制水平的差异。结果表明,‘墨西哥莱檬’最适于CTV各基因型的复制。‘邓肯’葡萄柚中VT、T3和T36基因型的复制水平最低。4种柑橘品种对T36基因型CTV都有明显的抑制作用。通过对CTV的CP基因进行分析发现,VT基因型CTV在‘赛蒙斯’甜橙中发生了较大变异。; 唐萌金鑫周常勇李中安陶珍珍周彦; 关键词：柑橘柑橘衰退病毒基因型 RT-QPCR

柑橘碎叶病毒外壳蛋白基因的原核表达被引量：2: 2013年; 【目的】获得原核表达的柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)的外壳蛋白(Coat protein,CP)。【方法】以感染CTLV的柑橘叶片总RNA为模板,根据已报道CTLV设计引物,运用一步法RT-PCR对CTLV的CP进行扩增并克隆,并将CP克隆至表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得表达蛋白。【结果】扩增测序结果显示,克隆产物CP区域序列全长714 bp,与已报道CP核苷酸序列(GenBank序列号:FJ223212)相似性达100%,推测编码238个氨基酸,表达蛋白的大小约27 kD。重组质粒经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析结果显示,重组质粒高效表达约30 kD蛋白,酶联免疫吸附(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测结果表明,该蛋白稀释5000倍仍能与苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)抗体发生阳性反应,证实表达蛋白为CTLV的CP。【结论】克隆了CTLV的CP,通过原核表达系统高效表达了CTLV的CP,为制备CTLV抗体奠定了基础。; 段硕李敏陶珍珍宋震李中安周常勇; 关键词：柑橘碎叶病毒 CP 原核表达蛋白纯化

应用多重RT-PCR技术分析重庆市柑橘衰退病毒基因型: 柑橘衰退病毒(Citrus Tristeza Virus,CTV)是长线形病毒科(Closterowri-dae)长线形病毒属(Closterovirus)的正义单链RNA病毒,其引起的柑橘衰退病是柑橘生产中的一种重要病...; 陶珍珍周常勇; 关键词：柑橘衰退病多重RT-PCR 基因型

一种检测柑橘衰退病毒T3基因型的实时荧光定量RT-PCR方法: 本发明公开了一种检测柑橘衰退病毒T3基因型的实时荧光定量RT-PCR方法，包括以下步骤：1）提取待测样品总RNA；2）以所提取的RNA为模板，利用T3基因型的特异性引物T3-4R进行反转录反应，得到反转录产物cDNA；3...; 陶珍珍周常勇周彦宋震李中安; 文献传递

甜橙茎陷点型弱毒株基因型的时空分布及其田间防效评估: 由柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus，CTV)引起的柑橘衰退病是严重危害柑橘产业的主要病害之一，广泛分布于世界各柑橘产区。随着我国柑橘品种结构调整，加大了柚类和甜橙品种的推广，CTV茎陷点强株系的为...; 陶珍珍; 关键词：柑橘衰退病毒实时荧光定量RT-PCR; 文献传递

T3基因型柑橘衰退病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立及应用被引量：9: 2015年; 根据不同基因型柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)ORF1a的序列差异,设计T3基因型CTV的特异性引物T3-4F/R,通过优化得到最佳反应条件建立T3基因型CTV分离株的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR,并进行灵敏性、重复性试验。应用该方法测定柑橘植株中T3基因型CTV分离株含量。建立了一种特异性检测T3基因型CTV分离株的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法,其灵敏性比普通RT-PCR方法高100倍。标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为97.1%,相关性系数为0.992。组内和组间变异系数均小于2.94%,表明该方法重复性好。田间样品中T3基因型CTV含量差异较大,最高含量是最低含量的1 250倍。本研究中建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法能够准确检测柑橘植株内的T3基因型CTV分离株,可用于研究T3基因型的CTV的变化规律。; 陶珍珍李中安贾敏唐萌唐科志周常勇周彦; 关键词：柑橘衰退病毒实时荧光定量RT-PCR

赣南脐橙主产区柑橘衰退病发病率调查研究被引量：3: 2011年; 江西赣南是中国脐橙最适宜生长区域之一,目前已成为世界上最大的脐橙集中产区,为了解和探明赣南脐橙主产区柑橘衰退病毒的发生和危害情况,作者通过对赣南脐橙14个主产区柑橘果园进行调查和样品采集,运用直接组织点免疫法(DTBIA)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对采集到的样品进行病毒检测,两种方法检测结果相一致,均发现试验中收集到的1498份柑橘样品中有673份样品携带CTV,感染率达44.9%,研究结果表明赣南脐橙主产区柑橘衰退病毒危害严重,生产上应加大防控力度。; 陶珍珍易龙卢占军李坊贞赖晓桦钟八莲陈慈相; 关键词：赣南脐橙柑橘衰退病感染率

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陶珍珍