马小峰
- 作品数:9 被引量:56H指数:3
- 供职机构:沈阳军区总医院更多>>
- 发文基金:辽宁省科技厅科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生理学更多>>
- 阿托伐他汀通过p38丝氨酸蛋白激酶信号通路干预人肾小球系膜细胞增殖和转化生长因子β1的表达(英文)被引量:2
- 2007年
- 背景:p38丝氨酸蛋白激酶信号激活引起细胞生长、增殖、分化,可能是糖尿病血管并发症发生发展的共同通路。目的:观察阿托伐他汀对抗p38丝氨酸蛋白激酶信号通路的激活,及其对氧化修饰低密度脂蛋白作用下人肾小球系膜细胞增殖与转化生长因子β1表达的干预。设计:随机、平行对照、开放性实验。单位:中国医科大学附属第一医院内分泌科,解放军沈阳军区总医院内分泌科、呼吸科及泌尿外科。材料:实验于2004-05/2005-05先后在中国医科大学药理教研室、沈阳军区总医院呼吸科实验室完成。以肾肿瘤行单侧肾切除患者正常部分的肾皮质(由沈阳军区总医院泌尿外科向军主任提供,征得患者同意)作为实验用人肾小球系膜细胞的来源。氧化修饰低密度脂蛋白浓度为(5.3±1.0)nmol/100μg(购自协和医科大学生化研究所,批号20040711);阿托伐他汀(辉瑞制药,批号45837088);p38丝氨酸蛋白激酶单克隆抗体(Santa Cruz)。方法:①取肾肿瘤行单侧肾切除患者的正常部分肾皮质6.0~8.0cm3,分离制备肾小球系膜细胞,待生长单层达80%培养面积后进行消化传代。传至第2代时,观察细胞形态,行DAB染色,胞浆内出现棕黄色团块或泥沙样颗粒为DAB染色阳性。油红“O”染色检测细胞吞噬氧化修饰低密度脂蛋白的情况。取传至4~10代的细胞用于实验。②按5×103个细胞接种于96孔板,200μL/孔。实验共分5组:阿托伐他汀1.2,6,12mg/L浓度组分别加入对应浓度的阿托伐他汀溶液,氧化低密度脂蛋白组和空白对照组此时仅加入培养基,6个平行孔/组。各组预处理30min后,除空白对照组外均暴露于终浓度为80mg/L的氧化修饰低密度脂蛋白中,24h后每孔加入四甲基偶氮唑蓝,在492nm波长的酶标仪上检测吸光度值,计算细胞增殖抑制率。③将1×106~3×106细胞接种于6个200mL培养瓶中,随机数字表法选1瓶作为空白对照组,第2~4�
- 李萍张海燕刘国良盛志业马小峰向军
- 关键词:丝裂原激活蛋白激酶类肾小球膜
- LOX-1在ox-LDL诱导人肾小球系膜细胞表达TGF-β1中的作用被引量:6
- 2006年
- 为探讨血凝素样氧化低密度氧化脂蛋白受体(LOX-1)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人肾小球系膜细胞(HGMCs)表达TGF-β1中的作用,在体外培养人肾小球系膜细胞,在不同的时间加入不同浓度的ox-LDL及LOX-1阻滞性抗体JTX92,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养液中转化生长因子(TGF-β1)浓度,用半定量RT-PCR检测细胞LOX-1和TGF-β1mRNA表达,用Western印迹检测细胞LOX-1和TGF-β1蛋白合成。结果表明,ox-LDL以时间和浓度依赖的方式增加LOX-1表达的同时,也以时间和浓度依赖的方式增加细胞内TGF-β1mRNA表达、蛋白合成及培养液中TGF-β1的含量;JTX92(10μg/ml)可以明显抑制LOX-1和TGF-β1的表达(两者P<0·01)。结论:ox-LDL通过激活LOX-1调节HGMCs TGF-β1基因表达、蛋白的合成与分泌。
- 李萍盛志业马小峰徐建华向军
- 关键词:转化生长因子Β1肾小球系膜细胞
- 不同浓度亚砷酸钠对诱导NB_4细胞凋亡能力的影响
- 1998年
- 为探讨不同浓度亚砷酸钠对诱导 NB_4细胞凋亡能力的影响,采用流式细胞术、DNA 电泳和免疫印迹进行研究。结果发现:①经0.8~8 μmol·L^(-1)亚砷酸钠作用16h 后,NB_4细胞活性为95%以上,有"梯状"DNA 电泳带和亚二倍体峰,细胞在 G_2期阻滞,但 Bcl-2表达无明显下调;②浓度在10~80 μmol·L^(-1)时,虽然凋亡广泛发生,Bcl-2表达明显下调,但细胞活性也降至31.20%;③浓度在400 μmol·L^(-1)时,细胞活性为80.30±90%,无"梯状"电泳带、细胞周期阻滞和 Bcl-2下调,75.66%细胞被 dUTP-FITC 标记,但荧光强度低。上述结果提示亚砷酸钠具有诱导和抑制凋亡的双重作用。
- 马东初孙英慧马小峰常奎忠黄世林白月辉初俊杰刘亚革
- 关键词:亚砷酸钠凋亡NB4细胞细胞活性BEL-2
- 全文增补中
- 对氨基苯胂酸及其氧化物的色谱研究
- 1999年
- 用紫外分光光度计分析了对氨基苯胂酸(PABAA)及其氧化物的光谱特征后,在十八烷基键合相硅胶柱上,以甲醇-缓冲液作流动相,研究了二者的容量因子随流动相离子强度、柱温、甲醇含量变化的规律。用季铵盐作离子对试剂,反相离子对色谱法分离PABAA时,分离机理符合高子对机理,在适当条件下,所试验的化合物都可有所保留。对保留值作出贡献的有固定相排阻作用、分配作用以及居次要地位的PABAA与固定相表面剩余硅醇基的相互作用。排阻作用及分配作用的相对重要性与流动相中甲醇和离子对试剂的浓度有关。
- 康建马小峰孟璐露马东初
- 关键词:对氨基苯胂酸氧化物色谱
- 气相色谱测定结核菌硬脂酸快速诊断结核性脑膜炎的研究
- 1995年
- 采用毛细管柱气相色谱技术分离出结核杆菌特征组分并鉴定为结核菌硬脂酸。对59例结核性脑膜炎患者脑脊液与122名非结核性脑膜炎对照进行分析。实验结果显示,结核性脑膜炎组检出结核菌硬脂酸44例,对照组中检出5例,敏感性及特异性分别为74.6%和95.9%,表明结核菌硬脂酸的检测不仅有助于结核性脑膜炎的早期诊断,其敏感性和特异性亦明显优于传统微生物检查法。
- 康建包美复马小峰刘亚革梁建中于向南
- 关键词:结核脑膜炎脂肪酸气相色谱
- 对氨基苯砷酸及其氧化物的色谱研究
- 1998年
- 为探讨对氨基苯砷酸(PABAA)及其氧化物的色谱行为,用紫外分光光度计分析了PABAA及其氧化物的光谱特征后,在十八烷基键合相硅胶柱上,以甲醇—缓冲液作流动相,研究了二者容量因子随流动相离子强度、柱温、甲醇含量变化的规律。用季铵盐作离子对试剂,反相离子对色谱法分离PABAA时,分离机理接近离子对机理,在适当条件下,所试验的化合物都可有所保留。对保留值作出贡献的有固定相排阻作用、分配作用,以及居次要地位的PABAA与固定相表面剩余硅醇基的相互作用。排阻作用及分配作用的相对重要性与流动相中甲醇和离子对试剂浓度有关。血清降解试验提示影响PABAA及其氧化物稳定性的因素与酶促催化作用有关。
- 康建马小峰孟璐露马东初
- 关键词:氧化物紫外分光光度计光谱特征色谱行为砷化物
- 结核杆菌硬脂酸测定对脑脊液菌阴结核性脑膜炎诊断价值的探讨被引量:6
- 1995年
- 采用毛细管柱气相色谱技术分离出结核杆菌特征组份并鉴定为结核杆菌硬脂酸。对59例脑脊液菌阴结核性脑膜炎患者与122名非结核性脑膜炎对照组进行分析。实验结果显示结核性脑膜炎组检出结核杆菌硬脂酸44例,对照组中检出5例,敏感性及特异性分别为74.6%和95.9%。表明结核杆菌硬脂酸的检测有助于菌阴结核性脑膜炎的早期诊断。
- 康建包美复梁建中马小峰刘亚革于笑难
- 关键词:结核病脑膜炎脑脊液结核杆菌硬脂酸
- 阿托伐他汀对人肾小球系膜细胞增殖、TGF-β1 mRNA和p38MAPK表达的影响被引量:3
- 2007年
- 目的观察阿托伐他汀(atorv)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人肾小球系膜细胞(HGMCs)增殖和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA及丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白表达的影响。方法在体外培养HG-MCs,用MTT法检测细胞增殖,用半定量RT-PCR法检测细胞TGF-β1 mRNA表达,用Western blot法检测细胞p38MAPK蛋白合成。结果1.Ox-LDL(80μg/ml)刺激系膜细胞增殖;2.Ox-LDL(10μg/ml-80μg/ml)以浓度依赖的方式增加HGMCs TGF-β1 mRNA和p38MAPK蛋白表达,3.Atovastatin(6μg-12μg/ml)抑制系膜细胞增殖,降低ox-LDL引起的TGF-β1 mRNA表达上调,抑制p38MAPK信号途径激活。结论阿托伐他汀可能通过对抗p38MAPK信号通路,减少TGFβ1分泌,抑制ox-LDL引起的肾小球系膜细胞增殖,预防和治疗伴有血脂异常的糖尿病肾脏病变。
- 李萍张海燕刘国良盛志业马小峰向军
- 关键词:阿托伐他汀细胞增殖转化生长因子Β1丝裂原活化蛋白激酶人肾小球系膜细胞
- 低剂量雄黄诱导NB_4细胞凋亡的研究被引量:39
- 2000年
- 目的:探讨复方黄黛片中主要成分雄黄治疗急性早幼粒细胞白血病的作用机理。方法:应用台盘蓝排染法、流式细胞仪、DNA电泳、免疫印迹等多项方法,体外研究雄黄对NB4细胞的促凋亡作用。结果:雄黄对NB4细胞的生长有抑制作用,并有促凋亡效应,对细胞周期的影响表现为G2M期的阻滞,药物处理的早期细胞凋亡,未见伴有bc1-2的下调。结论:雄黄作用的早期主要以细胞凋亡为主,并且可能通过其他途径诱导细胞凋亡。
- 张晨黄世林向阳马东初孙英慧马小峰
- 关键词:雄黄NB4细胞低剂量促凋亡电泳