龙启福
- 作品数：73 被引量：158H指数：6
- 供职机构：青海大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海大学中青年科研基金青海省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 木兰花碱对HERG钾通道蛋白表达的影响被引量：9
- 2011年
- 目的探讨木兰花碱抗心律失常的作用及机制。方法将低浓度(1、3μmol/L)及高浓度(10、30μmol/L)木兰花碱分别作用于转染HERG基因重组载体的HEK-293细胞,采用Western blot法、免疫荧光化学染色法分别定量、定性检测HEK-293细胞中HERG钾通道蛋白(以下简称HERG蛋白)表达。结果低浓度木兰花碱对HERG蛋白表达无明显影响;高浓度木兰花碱作用后HERG蛋白表达明显受抑。结论高浓度木兰花碱能够抑制HERG蛋白表达,此可能为木兰花碱抗心律失常的作用机制。
- 沈国平龙启福
- 关键词：木兰花碱HERG钾通道心律失常
- 胃癌弱差异基因表达谱中DDEF2基因的表达和生物学作用
- 2012年
- 目的明确胃癌差异基因表达谱中弱差异表达基因的敏感性并探讨弱差异表达基因DDEF2在胃癌发生发展中的生物学作用和意义。方法利用半定量RT／PCR方法检测DDEF2基因在胃癌细胞系及组织表达水平，并利用GoMiner功能注释软件研究DDEF2的生物学功能。结果DDEF2基因在7株胃癌细胞系中表达差异与分化程度呈一定相关性；胃癌组织中较癌旁组织表达微弱下降（16／20，80％）；功能注释显示DDEF2参与整联蛋白介导的信号途径、GTP酶活性调节等重要生物学途径。结论胃癌差异基因表达谱中弱差异表达基因具有高度灵敏性：弱差异表达基因DDEF2的表达异常可能在胃癌的发生发展中具有重要的生物学作用。
- 孙伟高芳龙启福王晓龙沈国平许博林耿排力
- 关键词：胃癌基因表达谱
- SDS热变性法可提高PCR-SSCP检测线粒体DNA突变分析结果的准确性及清晰度*
- 2011年
- 目的通过改变变性方法来提高PCR-SSCP检测小型哺乳动物线粒体DNA突变分析结果的准确性及敏感度,以期提高大样本动物线粒体DNA突变的筛查准确性和筛查效率。方法利用碱变性和SDS热变性对PCR产物进行处理,并加样到聚丙烯凝胶上,观察两者结果,并对背景色、条带清晰度、样本间距、易判性及敏感度等方面进行对比。结果通过比较,SDS热变性试验方法提高了条带的清晰度,降低了背景色。结论 SDS热变性法可提高PCR-SSCP检测线粒体DNA突变分析结果的准确性及清晰度,可提高大样本动物DNA突变的筛查准确性和筛查效率。
- 沈国平李耀东朱德锐龙启福
- 关键词：PCR-SSCP小型哺乳动物线粒体DNA突变
- 融合蛋白TOP_3原核表达载体的构建、表达及纯化研究
- 2009年
- 目的:利用HIV病毒TAT蛋白转导结构域、人缺氧诱导因子1α氧依赖降解结构域以及CASPASE3构建融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化。方法:分别构建原核表达质粒pET-28a(+)-TAT、pET-28a(+)-TAT-ODD、pET-28a(+)-TAT-ODD-CASPASE3(pET-28a(+)-TOP3);在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS内,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白TOP3进行纯化。结果:成功构建了pET-28a(+)-TOP3的原核表达载体,经过优化表达和纯化条件,融合蛋白在IPTG诱导下获得特异性表达,纯化得到了高纯度的目的蛋白。结论:融合蛋白TOP3的成功表达及纯化,为该融合蛋白应用于肿瘤的治疗研究奠定了理论基础。
- 王嵘刘芳孙伟龙启福赵延礼李耀东顾存林
- 青海湖嗜盐菌的分离与优势菌株QHL5的特性被引量：10
- 2012年
- 采用高盐选择性培养基从20份青海湖水样中筛选分离获得35株青海湖嗜盐微生物.耐盐梯度实验分析表明:水体中以中度嗜盐菌为主,约占65.7%;弱嗜盐菌次之,约占25.7%;非嗜盐菌与耐盐菌相对较少,约占8.5%.其中优势菌QHL5的生长盐度耐受范围为0.04～3.0 mol/L,最适生长范围为0.3～0.9 mol/L,隶属于中度嗜盐菌.菌体形态和生长特性分析表明:QHL5菌落大小为4～6 mm,圆形或椭圆形,边缘整齐厚实,乳白色,中间微隆起,不透明,革兰氏染色阴性.显微形态呈杆状,最适生长pH为8.5～9.5,最适生长温度为35℃.生理生化、16S rRNA的全序列Blast和系统发育分析表明:QHL5菌株分类定位于γ变形菌纲海洋螺菌目盐单胞菌属樊氏盐单胞菌(Halomonas ventosae).通过80%乙醇法抽提胞内相溶物质,采用TLC法检测出该菌积聚四氢嘧啶.
- 朱德锐刘建刘静静沈国平龙启福高翔刘德立
- 关键词：中度嗜盐菌TLC法四氢嘧啶
- 青海湖盐单胞菌Ectoine合成基因簇ectABC的重组共表达被引量：4
- 2015年
- 盐单胞菌属(Halomonas)通过胞内积聚有机相容溶质(Compatible solutes)来抵抗胞外的高盐渗透压。为了探究相容溶质Ectoine合成代谢相关基因的结构特征和异源共表达的可能性,以青海湖盐单胞菌Halomonas sp.QHL1为材料,通过高效液相色谱(HPLC)分析不同盐梯度下QHL1胞内Ectoine的积聚量,并借助于染色体步移技术(Genome walking)捕获QHL1菌株的Ectoine生物合成基因簇ect ABC,利用分子克隆技术分析ect ABC基因簇的异源重组表达(E.coli BL21)。研究结果表明:胞内Ectoine的积聚量随着培养基中Na+浓度的增加而增加,最大积聚量为167.1 mg/g细胞干重(1.0 mol/L Na+),但菌体生长却受到高浓度Na+的强烈抑制作用。QHL1的ect ABC操纵子全长序列为3580 bp,结构基因ect A(579 bp)、ect B(1269 bp)与ect C(390 bp)串联排列。基于生物信息学预测分析,两个启动子(δ70与δ38因子控制)和若干未知功能的保守模序(Motifs)存在于QHL1的ect操纵子上游。构建重组表达载体p ET-28-ect ABC,并在E.coli BL21中异源表达ect ABC基因簇(2438 bp)。SDS-PAGE结果显示Ect A、Ect B和Ect C分别为27.2、52.5和20.8 k D,与预测结果一致,表明ect A、ect B和ect C基因能在E.coli BL21中实现异源共表达,为构建Ectoine合成代谢基因整合的系统代谢工程,并实现低盐发酵控制和过量化生产提供了重要的理论基础。
- 朱德锐韩睿沈国平龙启福李丹丹刘建刘德立
- 关键词：盐单胞菌属ECTOINEECT结构基因共表达
- 0微波消解ICP—AES法同时测定藏药二十五味松石丸中的四种金属元素被引量：1
- 2010年
- 目的：建立藏药二十五味松石丸中汞、金、铜和铅4种金属元素的含量测定方法。方法：采用微波消解ICP—AES法同时测定藏药二十五味松石丸中汞、金、铜和铅4种金属元素。结果：藏药二十五味松石丸中的汞的含量较高，为1．54％，金含量〈0．0001％，铜和铅的含量分别为0．38％和0．001％。加样回收率为96．40％～100．60％，精密度RSD为1．36％～2．55％。结论：本法简便、灵敏、准确，可用于藏药二十五味松石丸的质量控制。
- 龙启福李向阳朱俊博
- 关键词：藏药二十五味松石丸金属元素
- 嗜盐菌相溶物质合成与转运调节机制被引量：13
- 2011年
- 嗜盐菌是极端环境微生物的重要类群之一,作为新型微生物资源,为微生物生理、遗传分类及生命科学和相关学科许多领域的研究提供新的课题。文章综述了嗜盐菌的嗜盐渗透压分子调节机理中,相溶物质胞外吸收转运与胞内生物合成途径涉及的结构基因、主要酶类的相关研究进展,并对后续研究进行讨论与展望。
- 龙启福朱德锐韩睿芦殿香
- 关键词：嗜盐菌渗透压调节耐盐基因
- 促进深度学习的混合式教学模式构建及应用研究
- 2023年
- 随着社会信息技术的飞速发展,高校的计算机学科教学已成为社会各界广泛关注的课程内容,学生只有掌握良好的计算机技术,才能利于自身更好的发展。同时,现代化教育的发展、教育信息化是高校各科教育教学创新与改革的重要方向,尤其是对于高校的专业技术学习而言。据相关调查显示,大部分的学生处于浅层学习现象,基于此,探索构建及应用混合教学模式促进学生深度学习是具有一定理论意义和现实意义的。本文从阐述深度学习的混合教学模式概念出发,分析促进深度学习的混合式教学模式构建及应用的意义,并探讨从课前、课中、课后三个方面构建及应用混合模式的策略,以期能满足学生学习需求促进学生深度学习。
- 汪绍荣龙桂铃龙启福
- 关键词：混合式教学模式
- 心肌缺血再灌注中的棘手问题及对策被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨心肌缺血再灌注研究中的一些棘手问题,以及目前应对这些问题的主要临床辅助策略。方法:通过查阅近几年发表的有关心肌缺血再灌注研究的文献,分析该研究领域的研究现状。结果:再灌注是恢复缺血心肌血流供应的有效手段。研究发现,冠状动脉闭塞后60～90 min实施再灌注能够有效挽救缺血心肌。再灌注可以引起心律失常、微循环紊乱、受损心肌细胞死亡,导致再灌注损伤;而不利的心肌重塑则是急性心肌梗死患者主要的死亡原因之一。常规即时再灌注的实施、减轻再灌注损伤和防止不利的心肌重塑等是现在临床治疗面临的难题。采取预处理、活化再灌注损伤救援激酶、干细胞治疗等辅助措施有望解决这些难题。结论:心肌缺血再灌注虽是恢复缺血心肌血液供应最有效的手段之一,然而,再灌注引起的损伤及不利的重塑也是急需解决的难题,再灌注治疗联合辅助措施有望为解决这一问题带来突破。
- 芦殿香吴海英芦殿荣龙启福张树娜贾瑛王欣佩格日力
- 关键词：心肌缺血再灌注
