余敏
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：江苏大学医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 茅苍术挥发油对幽门螺杆菌及其尿素酶B表达的影响被引量：4
- 2016年
- 目的研究茅苍术挥发油对幽门螺杆菌(HP)的抑制作用以及亚最小抑菌浓度(sub-MIC)挥发油对HP毒力因子尿素酶B(Ure B)表达的影响。方法将实验分为阳性对照组(加入100μL HP菌悬液),溶剂对照组(加入100μL HP菌悬液和0.25μL二甲基亚砜),30.000、15.000、7.500、3.750、1.875、0.938、0.469 g·L^(-1)茅苍术组(分别加入30.000、15.000、7.500、3.750、1.875、0.938、0.469 g·L^(-1)茅苍术挥发油和100μL HP菌悬液)和空白对照组(加入培养基),运用常规肉汤稀释法测定茅苍术挥发油对HP的抑制作用。将2×1010CFU·L^(-1)HP接种于布氏肉汤液体培养基,然后分为实验组和空白对照组,实验组加入茅苍术挥发油使其终浓度为0.5×最小抑菌浓度,对照组不加茅苍术探发油,微需氧培养72 h后,采用实时定量荧光聚合酶链式反应检测2组尿素酶B(Ure B)mRNA的表达。结果溶剂对照组和0.469 g·L^(-1)茅苍术组抑制率与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。30.000、15.000、7.500、3.750、1.875 g·L^(-1)茅苍术组抑制率高于阳性对照组,0.938 g·L^(-1)茅苍术组抑制率低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组Ure B mRNA表达量为0.036±0.001,低于对照组的0.100±0.001,差异有统计学意义(P<0.01)。结论一定浓度的茅苍术挥发油可抑制HP生长,亚抑菌浓度挥发油可下调Ure B mRNA表达。
- 翟志刚余敏张开军石海波邵晨戴东方
- 关键词：茅苍术挥发油幽门螺杆菌尿素酶B
- 幽门螺杆菌cag1基因缺陷株的构建与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)细胞毒素相关基因致病岛(cytotoxin associated gene pathogenicity island,cag PAI)中的第1个编码基因hp0520/cag1基因缺陷株,为进一步研究cag1基因在cag PAI中的功能奠定基础。方法:使用同源重组技术,通过PCR扩增出cag1基因两侧同源臂序列,酶切纯化后分别连接于带卡那霉素抗性标志的载体两端,构建成cag1基因自杀质粒。将该质粒通过电穿孔导入受体野生株中,通过抗性筛选与PCR验证得到cag1基因缺陷株,与人胃上皮GES-1细胞共培养后,与野生株比较,观察细胞形态变化。结果:成功敲除H.pylori cag1基因,获得cag1基因缺陷株;与野生株相比,cag1基因缺陷株破坏细胞的能力降低。结论:成功获得幽门螺杆菌cag1基因缺陷株;cag1基因缺失后H.pylori对GES-1细胞的毒力减弱。
- 凌峰王晓春陈珵余敏朱虹罗彩凤邵世和
- 关键词：幽门螺杆菌基因缺陷
- 幽门螺杆菌CagL蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:制备幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)CagL蛋白单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),并鉴定其特性。方法:用原核表达并纯化的CagL融合蛋白免疫BALB/c小鼠,6周后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经亚克隆筛选获得阳性杂交瘤细胞株;ELISA法鉴定mAb的亚型;间接ELISA法测定杂交瘤细胞培养上清和腹腔积液效价及其相对亲和力;相加ELISA法分析mAb的识别表位;蛋白质印迹法鉴定mAb特异性;冻溶法检测杂交瘤细胞株的稳定性。结果:获得3株能稳定分泌抗CagL的杂交瘤细胞株,其中两株单抗属IgM类,一株单抗属IgG2a类,轻链型别均为κ型;杂交瘤细胞培养上清效价在1∶64～1∶128之间,腹腔积液的效价均达1∶16 000以上;相对亲和力较高;3株mAb识别3种不同的抗原表位;3株mAb都能与融合蛋白反应,其中两株能与H.pylori全菌蛋白发生特异性反应;杂交瘤细胞经冻存复苏后,体外传代仍能稳定分泌mAb。结论:成功制备了抗H.pylori CagL蛋白的单克隆抗体,为深入研究幽门螺杆菌CagL蛋白的功能和Ⅳ型分泌系统的致病机制奠定了基础。
- 朱虹陈珵凌峰邵晨余敏邵世和
- 关键词：幽门螺杆菌单克隆抗体杂交瘤
