- 转染缝隙连接蛋白CX43在脑胶质瘤化疗旁观者效应影响的体外实验研究被引量:2
- 2011年
- 背景与目的:肿瘤细胞受损伤时,其旁边未受损肿瘤细胞也出现损伤的现象称为旁观者效应,国内外研究发现多种肿瘤组织在体内外存在该效应,为进一步明确脑胶质瘤在药物化疗时是否存的旁观者效应以及CX43(缝隙连接蛋白43)对该效应的影响,通过构建并转染pCMV-Cx43cDNA质粒入C6细胞,上调缝隙连接蛋白CX43表达,增强缝隙连接功能,探讨转染缝隙连接蛋白CX43对脑胶质瘤化疗体外旁观者效应影响。方法:(1)通过C6细胞培养,并提取总RNA,行RT-PCR、质粒酶切及连接等,构建缝隙连接蛋白CX43真核表达重组质粒pCMV-Cx43cDNA;(2)通过脂质体行重组质粒pCMV-Cx43cDNA转染C6细胞,过表达C6细胞缝隙连接蛋白CX43,RT-PCR及Weston-blot检测CX43 mRNA及蛋白表达水平变化。划痕荷载染料传输实验法检测转染缝隙连接蛋白CX43后缝隙连接功能;(3)通过体外TRASWELL细胞共培养模型,将转染pCMV-Cx43cDNA、空载体细胞分别分成化疗药物替膜唑胺处理组与替膜唑胺未处理组细胞,然后将两组细胞按一定比例分别接种TRASWELL细胞共培养板膜两侧,检测未化疗处理细胞存活率及凋亡率,观察体外转染CX43对体外化疗旁观者影响。结果:(1)成功构建带CX43目的基因的真核表达pCMV-Cx43cDNA重组质粒;(2)成功转染C6细胞并筛选稳定转染过表达CX43细胞株(C6-Cx43)及转染空载体的细胞株(C6-non),C6-Cx43细胞Cx43mRNA及CX43蛋白表达显著增加;(3)在体外TRASWELL细胞共培养模型中,观察到体外未化疗细胞凋亡的旁观者效应,(C6-Cx43)组与对照组差异存在明显统计学意义。结论:(1)C6细胞转染重组质粒pCMV-Cx43cDNA,缝隙连接蛋白CX43表达增高,C6细胞GJIC功能增强;(2)在体外化疗时,C6-Non、C6-Cx43都存在化疗旁观者效应,而C6-Cx43的化疗旁观者效应显著。即转染缝隙连接蛋白CX43能放大体外化疗的旁观者效应。
- 闻海兵李嘉杰邹树峰严剑魏敏俊刘先波颉奎洪涛
- 关键词:化疗旁观者效应缝隙连接蛋白CX43质粒构建转染
- 肌钙蛋白I评估心力衰竭严重程度的临床研究被引量:1
- 2005年
- 目的探讨心肌肌钙蛋白I(cTnI)对心力衰竭严重程度及预后评估的价值。方法92例充血性心力衰竭病人入院后检测cTnI以及彩色多普勒超声心动图检测左心功能,按cTnI是否阳性分为阳性组和阴性组,比较两组间的心功能分级、病死率、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVDd)、心排血量(CO)值的差异。结果阳性组的心功能Ⅲ级、Ⅳ级、病死率均高于cTnI阴性组(P<0.05或P<0.01);彩色多普勒超声心动图测量各项指标阳性组与阴性组比较有统计学意义(P<0.01)。结论cTnI水平可反映心力衰竭的严重程度,可作为评估心力衰竭病人预后的指标。
- 陆玉丽何孟国张辉刘先波
- 关键词:心力衰竭充血性心肌损伤
- 左股骨头快速骨溶解1例报道被引量:1
- 2012年
- 大块骨质溶解症,又称为特发性骨质溶解症、gorham病/综合征、消失骨病、急性自发性骨吸收、鬼怪骨。1938年jackson首次报道本病,1954年gorham首次正式描述本病,1958年johnson和mechure将本病命名为大块骨质溶解症。本病是一类罕见疾病,是一种自限性的。
- 李勇李强钟发明汤敏予刘先波
- 缝隙连接蛋白43 Ser368位点磷酸化水平变化在ET-1诱导的脑血管痉挛中作用的研究
- 目的: 目前研究表明,Cx43 Ser368位点磷酸化状态对Cx43缝隙连接通道功能有着重要的影响,此位点磷酸化可通过调节Cx43蛋白的代谢过程以及Cx43通道的通透性和电导率等,调节缝隙连接通道功能。通过枕大池穿刺二...
- 刘先波
- 关键词:磷酸化慢病毒载体脑血管痉挛蛛网膜下腔出血
- 文献传递
- 缝隙连接蛋白S368位点突变的慢病毒载体构建及鉴定
- 2012年
- 蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)的发生发展机制一直是神经科学研究领域的难题。临床上其发病率高,总体治疗效果和愈后不佳。我们的研究结果显示缝隙连接蛋白(Cx43)与SAH后CVS的发生发展有着紧密关联。
- 刘先波李嘉杰邹树峰魏敏俊严剑洪涛
- 关键词:缝隙连接蛋白位点突变慢病毒蛛网膜下腔出血脑血管痉挛