刘利锋
- 作品数：17 被引量：16H指数：2
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市重点实验室北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 中国艾滋病人中枢神经系统和外周基因型耐药和基因多样性比较
- 背景 高效联合抗病毒治疗时代,艾滋病人生命延长,HIV相关神经认知障碍发生率依然很高.耐药的发生率因地域和HIV的亚型不同而不同,目前为止,关于中国艾滋病人中枢神经系统耐药的报道较少.方法 扩增了来自于34名中国HIV感...
- 刘利锋魏飞力赵清霞汪习成吴昊陈德喜
- IFN-λs及其JAK-STAT信号通路中相关分子在MSMHIV-1感染病人的变化规律被引量：1
- 2017年
- 目的研究男男性行为者(MSM)艾滋病(AIDS)病人急性期、慢性期外周血单核细胞(PBMC)中的干扰素(IFN)及其JAK-STAT信号传导通路中相关分子,以期发现IFN-λs、IFN-λR及相关基因、蛋白在HIV不同感染时期的变化规律。方法收集PBMC标本,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及流式细胞术方法分析IFN-α/βR2、IFN-γReceptor 1、IFN-λR1、STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5a、STAT5b、STAT6、IRF9、Mx1、OAS1信使核糖核酸(mRNA)及蛋白的表达。结果对20例急性HIV-1感染(AHI)病人、24例慢性HIV-1感染(CHI)病人、22例健康对照(HC)的PBMC标本进行分析,RT-PCR结果显示,在急性HIV-1感染患者中,IFN-αR2、IFN-γReceptor1、IFN-λR1、STAT1、MX1的mRNA水平高于健康对照组(分别为6.03、9.89、8.20、7.03、5.89倍)(P<0.01)。IFN-λR1的mRNA水平与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关(R=-0.403,P=0.009),与病毒载量呈正相关(R=0.43,P=0.005)。流式细胞术结果显示,在急性HIV-1感染患者中,IFN-αR2、IFN-γReceptor1、IFN-λR1、STAT1的蛋白水平高于健康对照组(P<0.01)。结论急性HIV-1感染可以提高IFN-λR1及相关基因、蛋白的表达,并且与疾病进展相关。
- 赵国宪刘利锋李威粟斌张彤吴昊
- 关键词：艾滋病病毒1型信号通路
- 检测HIV K103N突变的成套试剂与试剂盒
- 本发明公开了检测HIV K103N突变的成套试剂与试剂盒。本发明公开的检测HIV K103N突变的成套试剂包括RT‑RAA扩增引物对、crRNA、Cas13a蛋白；RT‑RAA扩增引物对由序列表中序列7和8所示的两条单链...
- 粟斌姜太一寇志华吴昊张彤李小辉刘利锋李浩孙岩松韩尧
- 总HIV-1 DNA定量检测技术的建立被引量：2
- 2019年
- 目的建立一种基于实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法的1型艾滋病病毒(HIV-1)总脱氧核糖核酸(DNA)定量检测技术。方法构建了同时包含HIV靶基因和内参基因的质粒标准品,设计了涵盖我国主要HIV流行亚型的特异性引物和Taqman水解探针,对引物亚型覆盖面、灵敏度、特异性等相关指标进行了分析,进行了批内和批间重复试验。结果该检测方法所设计的HIV特异性引物和探针序列高度保守,成功检测12种常见及稀有HIV亚型;扩增灵敏度可达4个拷贝/PCR反应管,特异度100%;加入了细胞定量体系,做到了在同一个PCR反应管中既定量了HIV DNA,又定量了细胞数;批内和批间差异性的变异系数均在20%以内。结论该检测方法可用于HIV储藏库检测,评估联合抗病毒治疗的效果,可以用于"窗口期"HIV感染的辅助诊断以及HIV阳性母亲的新生儿HIV感染的诊断。
- 刘志英袁霖张欣陆小凡刘利锋计云霞夏炜粟斌吴昊张彤
- 关键词：艾滋病病毒
- 河南献血人群血浆和脑脊液HIV膜区序列分析
- 背景中枢神经系统的HIV感染能使感染者发展为AIDS相关闹痴呆。目前为止,关于河南献血人群HIV感染者脑脊液HIV病毒膜区特征的报道较少。目的与方法留取了六位因为献血而感染HIV的感染者的脑脊液和血液标本,克隆了HIV膜...
- 刘利锋赵清霞魏飞力李宁吴昊陈德喜
- 文献传递
- 血清25-羟基维生素D在慢性乙型肝炎患者中检测的临床意义被引量：4
- 2020年
- 目的探寻慢性乙型肝炎患者血清中25-羟基维生素D的在体水平及相关临床意义。方法选取我院2015年1月至2018年9月确诊的82例慢性乙型肝炎(非肝硬化)患者作为研究对象,同时选取同期健康体检人群95例作为对照组。应用化学发光法检测各组中患者血清25-羟基维生素D的浓度。结果慢性乙型肝炎组血清25-羟基维生素D低于健康对照,具有显著的统计学意义(P<0.01)。根据25(OH)D3在体水平分为足量、不足、缺乏三类构成,慢性乙型肝炎和健康体检人群二者在血清25-羟基维生素构成比上具有显著差异。对慢性乙型肝炎患者在体25(OH)D3水平进行分层分析,以HbeAg阳性及阴性分组的话,HBV-DNA载量具有显著性差异,而25(OH)D3在体内的水平不具有统计学差异;以HBV-DNA载量的高低进行分组的话,高载量组的25(OH)D3的水平与低载量组具有明显的统计学差异(P<0.05),并且高载量组和低载量组25(OH)D3水平的三种构成上也具有显著性差异。进一步分析慢性乙型肝炎患者25(OH)D3水平与生化指标及HBV-DNA载量的相关性发现:25(OH)D3水平与AST、HBV-DNA载量呈负相关,具有显著性差异(P<0.05),与PLT呈正相关,具有显著性差异(P<0.05),不与TBiL、ALT具有相关性。结论慢性乙型肝炎患者血清25-羟基维生素D与正常对照相比具有差异,并与乙肝病毒复制相关,纠正25-羟基维生素D缺乏状态,可能利于慢性乙型肝炎的治疗。
- 王玉起蒋兆年刘利锋李莉
- 关键词：慢性乙型肝炎HBV-DNA载量
- 可覆盖多亚型的HIV-1总DNA定量检测引物对、探针及检测试剂盒
- 本发明公开了一种可覆盖多亚型的HIV‑1总DNA定量检测引物对和探针，其中，所述引物对的上游引物HIV‑U1序列如SEQ ID No.1所示；下游引物HIV‑R1序列如SEQ ID No.2所示；所述探针Probe‑HI...
- 刘志英袁霖粟斌张彤吴昊刘利锋陆小凡张欣王蕊夏炜黄晓婕
- 文献传递
- 干性记忆型T细胞及其在抗肿瘤研究中的进展被引量：2
- 2018年
- 伴随CAR-T细胞疗法获得FDA批准正式上市以来,足以改变癌症治疗模式的过继免疫治疗（AIT）成为人们持续关注的热点。AIT目前大多采用分化终末期的效应T细胞,而且其疗效与过继转移T细胞的数量有关。研究表明中晚期T细胞回输后,其扩增及存活能力均不如早期T细胞,例如Klebanoff等^（[1]）观察了中心记忆型T细胞（TCM）和效应型T细胞（TEM）分别输注于接种肿瘤细胞的小鼠模型,发现在体内TCM比TEM具有更持久的存活时长和更好的抗肿瘤效果。
- 李莉陆小凡赵焕英计云霞刘利锋粟斌
- 关键词：记忆性T细胞
- HIV相关神经认知紊乱患者配对组织来源的HIV-1 env基因特征分析被引量：2
- 2014年
- 目的探讨人类免疫缺陷病毒相关神经认知紊乱(HIV associated neurocognitive disorder,HAND)患者不同组织中HIV-1 env基因的变异进化特征。方法通过国际HIV痴呆量表筛选出HAND患者,获得其血浆及脑脊液来源的HIV-1 env基因核苷酸序列,回顾性分析遗传多样性、氨基酸长度、潜在糖基化位点(PNGS)、辅助受体利用以及特征性氨基酸的特点及组织间差异。结果本研究纳入4例HAND患者共57条HIV-1 env基因V3-C4序列(血浆来源29条,脑脊液来源28条)。脑脊液中的HIV-1遗传多样性高于血浆来源毒株,差异有统计学意义(遗传多样性变异度中位数分别为0.053和0.007,P=0.043)。3例患者脑脊液与血浆来源的毒株均使用CCR5辅助受体,其中2例患者脑脊液(患者D 158 bp,患者F 158 bp)中的HIV-1 V3-C4区氨基酸长度中位数明显长于血浆来源(患者D156 bp,P=0.017;患者F 157 bp,P=0.003)。脑脊液与血浆中HIV-1 env基因序列相比共有16个氨基酸位点存在明显差异,62.5%(10/16)分布在V4区。结论 HAND患者脑脊液和血浆中的HIV-1 env基因特征存在差异,脑脊液中的HIV-1准种遗传多样性更高。
- 欧阳雅博刘利锋张玉林袁霖刘志英杨素芳魏飞力乔录新陈德喜
- 关键词：人类免疫缺陷病毒脑脊液基因特征
- 脑脊液来源人类免疫缺陷病毒tat真核表达载体的构建及鉴定
- 2014年
- 目的探讨脑脊液来源人类免疫缺陷病毒(HIV)tat真核表达载体的构建,并研究TAT蛋白在真核细胞的表达。方法从脑脊液中扩增出HIV tat基因,构建pcDNA-tat真核表达载体,所构建载体经酶切和测序鉴定。将构建的表达载体转染293T细胞系,通过免疫荧光检测TAT蛋白的表达。结果成功扩增tat基因,酶切和测序结果证实正确构建了表达载体pcDNA-tat,免疫荧光证实所构建载体能在293T细胞中有效表达HIV TAT目的蛋白。结论成功构建真核表达载体pcDNA-tat,为了解HIV在中枢神经系统的潜伏机制奠定实验基础。
- 刘利锋乔录新李庆李莉李威吴昊陈德喜
- 关键词：脑脊液人类免疫缺陷病毒TAT基因
