吕建强
- 作品数：167 被引量：733H指数：18
- 供职机构：深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目深圳出入境检验检疫局科研项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 鹿流行性出血病病毒VP7-ELISA抗体检测方法的建立被引量：2
- 2009年
- 以原核表达的鹿流行性出血病病毒(epizootic hemorrhagic disease virus of deer,EHDV)VP7蛋白为包被抗原,用HRP标记的兔抗羊IgG作为二抗,建立了检测EHDV群特异性抗体的间接ELISA方法(VP7-ELISA)。用VP7-ELISA方法检测EHDV阳性血清、其他病毒阳性血清及健康羊血清,结果表明,VP7-ELISA方法具有良好的特异性;用VP7-ELISA和琼脂扩散试验(AGID)检测EHDV阳性血清抗体效价,结果表明,VP7-ELISA的敏感性相当于AGID的8～16倍。用VP7-ELISA和AGID同时检测临床样品188份,VP7-ELISA的特异性和敏感性分别为95.9%和100%,两种方法的符合率为96.3%。表明VP7-ELISA可以代替AGID用于EHDV抗体检测。
- 花群义杨俊兴郭莹洁吕建强曾少灵秦智锋陈兵阮周曦董俊
- 关键词：酶联免疫吸附试验
- 非洲猪瘟病毒p72蛋白的真核表达及反应原性鉴定被引量：2
- 2015年
- 将p72基因克隆到载体pFast Bac/NT-TOPO上,转化大肠埃希菌DH5α。将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72。通过脂质体介导,将bacmid-p72转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染正常生长的sf9细胞,72h后收集细胞,超声破碎后取上清进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,重组蛋白大小约78ku,且重组蛋白可以与非洲猪瘟标准阳性血清反应。说明表达的重组蛋白为可溶性的,并具有良好的反应原性。
- 梁云浩曹琛福叶奕优花群义张彩虹曾少灵陶虹廖立珊刘建利唐勇吕建强
- 关键词：非洲猪瘟病毒脂质体介导重组杆状病毒
- 禽流感H7亚型实时荧光RT-PCR检测方法的建立
- H7亚型禽流感致病性强、危害性大,是进出口家禽及禽类产品的主要检疫对象。为了加强对H7亚型禽流感进行检测,建立新的快速检测方法。方法:通过对genbank已报道的H7亚型禽流感病毒的HA基因进行序列分析比较,设计了两组分...
- 卢体康秦智锋阮周曦吕建强花群义孙洁曾少灵曹琛福张彩虹
- 文献传递
- 水泡性口炎病毒N蛋白的原核表达和鉴定被引量：1
- 2016年
- 根据GenBank已公布的水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)N基因序列,设计上、下游引物,以VSV-NJ核酸为模板进行RT-PCR扩增,扩增产物克隆至pET52 3C/LIC载体中,成功构建了pET52-VSV N表达载体。将pET52-VSV N重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳分析,可见VSV N蛋白成功得到了表达,融合蛋白的分子量约为50KD,Western blot分析表明所表达的重组蛋白可与VSV阳性羊血清发生特异性反应,表达的VSV N蛋白可以作为建立VSV抗体检测方法的抗原。
- 刘建利孙洁陈兵张彩虹吕建强花群义杨俊兴
- 关键词：水泡性口炎病毒N蛋白原核表达
- 非洲猪瘟病毒p30蛋白真核表达载体的构建及表达被引量：2
- 2016年
- 本文设计特异性引物扩增全长p30基因,得到585bp的目的片段,克隆至杆状病毒Bac-To-Bac表达载体pFastBac/NT-TOPO中,转化大肠杆菌DH10Bac进行同源重组,成功构建了含有p30基因的真核表达载体。转染Sf9细胞,回收得到重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,表达产物20kDa,与预期大小一致,能与AFSV阳性血清产生特异性反应。
- 廖立珊孙洁刘建利花群义唐金明林彦星阮周曦张彩虹陶虹吕建强杨俊兴秦智锋林庆燕曾少灵
- 关键词：ASFV杆状病毒表达
- 鹿流行性出血病病毒抗体快速检测试纸条及其制备方法
- 本发明公开了一种鹿流行性出血病病毒(EHDV)抗体快速检测试纸条及其制备方法。其主要应用截短的EHDV VP7表达抗原作为检测线试剂。利用抗原表位分析软件对EHDV VP7进行分析，选取含有主要抗原表位的片段，对其对应的...
- 杨俊兴孙洁连慧香陈兵花群义吕建强曹琛福张彩虹卢体康胡运发秦智锋刘建利
- 文献传递
- 基于McAb和IgG及安全抗原的猪水泡病新型试剂盒研发与应用
- 花群义曹琛福杨俊兴祝贺卢体康吕建强阮周曦艾军曾少灵秦智锋张彩虹孙洁刘建立陈兵
- 猪水泡病病毒VP1单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定:为了更好的研究猪水泡病毒(swine vesicular disease virus, SVDV)的生物学特性和建立SVDV免疫学检测方法,该研究用纯化的SVDV VP...
- 关键词：
- 关键词：试剂盒免疫学检测方法
- 基于VP73表达抗原和单抗的非洲猪瘟c-ELISA试剂盒研制
- 曾少灵卢体康花群义杨俊兴吕建强秦智锋廖立珊阮周曦张彩虹曹琛福唐金明孙洁林庆燕刘建利陶虹陈泽华陈书琨宗卉
- VP73蛋白是非洲猪瘟病毒的主要抗原性结构蛋白,基因结构稳定保守,即使是不同毒株其DNA序列或氨基酸序列的相似性都很高,可超过96%以上.VP73蛋白在自然感染中可诱导产生抗体,也是最早产生的抗体种类之一,且抗原性稳定,...
- 关键词：
- 关键词：猪瘟病毒免疫学检测试剂盒
- 基于单克隆抗体的牛病毒性腹泻病毒抗原检测ELISA方法的建立
- 杨俊兴花群义曹琛福陶虹曾少灵卢体康唐金明张彩虹吕建强阮周曦孙洁刘建利陈兵叶奕优秦智锋胡运发李健波艾军祝贺
- 用单克隆抗体(2A6和5C9等比混合)作为第一抗体包被ELISA板,利用HRP标记的单克隆抗体(2F4)作为第二抗体,建立了BVDV双抗体夹心ELISA方法.首先,选用BVDV特异性单克隆抗体作为第一抗体,大大提高了EL...
- 关键词：
- 关键词：病毒性腹泻病毒抗原检测方法流行病学调查
- 非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的建立被引量：18
- 2010年
- 依据非洲猪瘟病毒(ASFV)的vp73基因保守序列,设计了特异性引物与TaqMan探针,扩增片段69bp,建立了ASFV实时荧光PCR检测方法。与OIE推荐用于检测ASFV的实时荧光PCR和普通PCR方法进行比对,结果显示,本文建立的方法与OIE两种检测方法的特异性相当,灵敏度与OIE荧光PCR方法相当,但比普通PCR方法高出至少10倍。标准定量曲线显示,本文方法最低检测限可达10 copies/μL病毒DNA(相关系数为0.993046)。重复性试验的批内CV值为0.61%～1.14%,批间CV值为1.37%～3.14%,表明本文方法的重复性和稳定性良好。可见,本文建立的基于vp73基因的ASFV实时荧光PCR检测方法具备快速、准确、灵敏的特点,将为检验检疫部门防御ASFV传入我国提供更多技术支持。
- 曾少灵花群义杨俊兴张彩虹孙洁阮周曦吕建强曹琛福秦智锋陈兵陈书琨杨云庆
- 关键词：非洲猪瘟病毒实时荧光PCR
