周峻
- 作品数：32 被引量：136H指数：3
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生一般工业技术化学工程理学更多>>
- 改性蒙脱石构建多功能载药体系的研究被引量：3
- 2012年
- 目的:构建以蒙脱石为骨架,将药物插层于蒙脱石中,用聚阳离子材料包裹于外层,制成药物缓释和基因输送体系。方法:将阿霉素(Dox)插层入蒙脱石层间,用聚乙烯亚胺(PEI)包裹载药蒙脱石外层,使之具有正电荷。用X射线粉末衍射(XRD)、傅里叶红外光谱(FT-IR)和热重分析(TGA)等方法对聚合物进行化学表征;粒度分析和扫描电镜对聚合物进行形态学观察;进行了体外药物释放实验;通过凝胶电泳阻滞实验对体系的DNA结合能力进行了测定;在COS-7和SKOV3两种细胞株上进行了细胞毒性实验;进行了PEI-蒙脱石对胃粘膜保护的体内实验。结果:粉末衍射、傅里叶红外光谱和热重实验表明阿霉素插层于蒙脱石层间,导致蒙脱石层间距增加至31.3。在1 560cm-1和2 850 cm-1处出现PEI特征峰,1 350 cm-1处出现Dox特征峰,表明体系含有PEI和Dox两种物质。粒度分析和扫描电镜表明颗粒直径约为600 nm,表面电荷约为30 mV;体外释药结果说明体系在72 h内体系药物释放稳定,药物浓度在6×10-4至8×10-4mg/ml;凝胶电泳阻滞实验证明,在PEI/Dox/MMT:DNA质量比为20∶1时体系能够基本完全结合DNA;MTT实验证明,在COS-7和SKOV3两种细胞上,改性蒙脱石在实验浓度范围内,细胞的存活率皆超过80%;体内实验证明,0.3μg剂量的PEI-蒙脱石对于胃粘膜具有良好的保护能力。结论:构建了功能化的蒙脱石载药体系。
- 金雪王启闻胡天楠徐桑胡奇达周峻汤谷平胡秀荣
- 关键词：多柔比星蒙脱石阿霉素聚乙烯亚胺缓释
- 一种树枝状基因药物载体及制备和应用
- 本发明提供一类可生物降解的高效低毒性的树枝状聚阳离子材料，本发明利用二硫键将毒性很低的低代数树枝状阳离子聚合物链接在生物相容性很好的水溶性内核上，形成了一个高分子量的聚合物，不仅有很好的基因和药物递送效率，而且可以在细胞...
- 王凯汤谷平周峻
- 文献传递
- 细菌外膜囊泡纳米载体的制备及其免疫调节作用被引量：5
- 2017年
- 目的:以细菌外膜囊泡(OMV)结合三嵌段聚合物普朗尼克F127(PEO_(100)-PPO_(65)-PEO_(100)),构建能够有效促进巨噬细胞分泌抗肿瘤细胞因子的纳米载药体系OMV-F127。方法:培养减毒沙门菌,用超滤离心法与超声破碎法提取OMV,机械挤压法制得OMV-F127;蛋白质定量试剂盒和SDS-PAGE法检测OMV的蛋白含量和成分;荧光显微镜、透射电镜、动态光散射法检测OMV-F127形态学特征、粒径、电位及其稳定性;以小鼠巨噬细胞RAW246.7为细胞模型,ELISA检测OMV-F127对抗肿瘤细胞因子的分泌作用。结果:两种方法成功提取到减毒沙门菌的OMV,其蛋白质总量分别为2.8 mg/mL和2.7 mg/mL。成功制备OMV-F127且含有OMV的标志蛋白OmpF/C。OMV为纳米级囊泡结构,F127以及OMV-F127为球形纳米颗粒。OMV、F127、OMV-F127颗粒平均直径分别为(72±2)nm、(90±3)nm、(92±2)nm。OMV-F127能促进抗肿瘤细胞因子IL-12、α-TNF、γ干扰素的分泌。结论:基于细菌OMV的纳米载体OMV-F127能够有效促进巨噬细胞分泌抗肿瘤细胞因子,具有免疫调节作用。
- 陈琪吴敏白宏震郭则灵周峻王青青汤谷平
- 关键词：佐剂细菌外膜蛋白质类药理学巨噬细胞细胞因子类细胞
- 普朗尼克—聚乙烯亚胺纳米胶束的制备及其细胞生物学特性被引量：1
- 2017年
- 目的:采用普朗尼克—聚乙烯亚胺纳米胶束制备高效、低毒的药物和基因输送体系。方法:利用小分子量的聚乙烯亚胺作为交联剂制备普朗尼克—聚乙烯亚胺纳米胶束,采用动态光散射法、芘荧光探针法分别测定聚合物的粒径、表面电动电位及临界胶束浓度,考察聚合物携带基因和药物的能力,并在细胞水平上探讨普朗尼克—聚乙烯亚胺的细胞毒性、转染效率以及对细胞内ATP和P-糖蛋白水平的影响。结果:成功制备了普朗尼克一聚乙烯亚胺纳米胶束,其粒径120~180 nm,表面电位+6^+9 mV,具有良好的携载基因、药物的能力。细胞生物学研究表明,普朗尼克—聚乙烯亚胺毒性较小,其中P123-PEI600基因转染效率高,并且能降低细胞内ATP和P糖蛋白水平。结论:普朗尼克—聚乙烯亚胺是一种良好的药物和基因输送体系,P123-PEI600是理想的可用于逆转肿瘤多药耐药的载体。
- 汪河滨李洋刘馨刚周峻王青青汤谷平
- 关键词：纳米球腺苷三磷酸P-糖蛋白
- 黄秋葵冻干粉的制备方法
- 本发明的提供一种黄秋葵冻干粉制备方法。取一定量黄秋葵籽，加入3-5倍量的水，煮沸3-5小时，过滤；再加3-5倍量水，煮沸3-5小时，过滤，合并滤液；浓缩滤液至滤液中黄秋葵重量百分含量为85-95%；在浓缩液中加入等量95...
- 汤谷平胡秀荣周峻
- 文献传递
- 氟硼二吡咯类光敏剂的制备及对肿瘤细胞的光动力学影响被引量：3
- 2017年
- 目的:设计合成两种不同极性取代基的氟硼二吡咯类光敏剂,观察其理化特性和在不同极性条件下的光动力学效应。方法:通过苯甲醛与吡咯活泼氢的缩合反应以及亲电取代反应制备氟硼二吡咯类光敏剂碘代羟基氟硼二吡咯(BPOI)和碘代甲酸甲酯氟硼二吡咯(BPCI)。通过核磁共振氢谱、傅里叶红外光谱和紫外可见吸收光谱、荧光发射光谱对该光敏剂进行理化性质表征。通过1,3-二苯基异苯并呋喃与2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐检测该光敏剂活性氧产生能力,并采用MTT法检测其对肿瘤细胞的光动力学效应。结果:核磁共振氢谱和傅里叶红外光谱证实成功合成了两种不同取代基的氟硼二吡咯类光敏剂BPOI和BPCI。两种材料具有低毒性,且易被细胞摄取。meso位为给电子取代基的氟硼二吡咯类光敏剂BPOI产生活性氧的能力受溶剂极性影响大,而weso位为吸电子取代基的氟硼二吡咯类光敏剂BPCI则不受溶剂极性影响。结论:给电子取代基的氟硼二吡咯类光敏剂BPOI在高极性环境中产生活性氧速率慢,而在低极性环境中产生活性氧的能力大大增强,有望用于肿瘤细胞内的环境选择性光动力治疗。
- 刘馨刚吴敏李素莹李忠宝胡青莲周峻汤谷平
- 关键词：光化学疗法肿瘤细胞光谱法
- 5-氟尿嘧啶—烟酰胺共晶的制备及其抗肿瘤活性研究
- 2017年
- 目的:以烟酰胺(NCT)为共晶形成物制备5-氟尿嘧啶—烟酰胺共晶(5-Fu-NCT),对其理化特性和生物学性质进行研究。方法:采用冷却结晶法制备5-Fu-NCT共晶,用X射线粉末衍射法、核磁共振、红外光谱、差示扫描量热法等方法对其结构进行表征,用高效液相色谱法测定其溶解度,用MTT法、HE染色和细胞划痕实验测定其对肿瘤细胞活性的影响。结果:成功制备了5-FU-NCT,其特征衍射峰(20)为16.4、20.4、22.3、27.9、30.1°。共晶溶解度为13.5 g/L。体外细胞试验结果表明,5-Fu和5-Fu-NCT作用于BEL-7402/5-Fu细胞的半数致死浓度值(IC_(50)值)分别是129.6μg/mL、42.6μg/mL;细胞划痕实验、HE染色结果表明,5-Fu-NCT对耐5-Fu的BEL-7402/5-Fu细胞毒性更强。结论:采用冷却结晶法成功制备了5-Fu-NCT。相比5-Fu,5-Fu-NCT对耐Fu肿瘤细胞有更强的抗肿瘤活性。
- 吴敏刘馨刚薛宇陈琪胡秀荣周峻汤谷平
- 关键词：工艺学
- 以聚乙烯亚胺-β-环糊精为骨架偶联短肽CY11的转基因载体被引量：2
- 2009年
- 目的:以聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用靶向于肿瘤表面成纤维细胞生长因子受体(FGFR)的短肽CY11(CGMQLPLATWY)偶联于载体材料上,研究该载体材料的基因转染效率。方法:用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将CY11偶联到PEI-β-CyD上,合成CY11-PEI-β-CyD。核磁共振氢谱(1H-NMR)、热重分析(TGA)对载体材料进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,MTT法测定载体材料的细胞毒性,在COS-7、Hela和B16细胞株上进行体外转染实验。结果:成功合成材料CY11-PEI-β-CyD,在N/P为4时能够有效地浓缩质粒DNA。在B16细胞上,材料CY11-PEI-β-CyD达到160μg/ml时,细胞存活率仍高于80%。在CY11-PEI-β-CyD/DNA复合物在N/P为20∶1时,转染效率是对照组PEI-β-CyD的17倍。结论:CY11-PEI-β-CyD是具有低毒性、高转染且有FGFR靶向性的新型非病毒转基因载体。
- 虎义平姜启英陈丹赵丹军陆晓余海王青青周峻胡秀荣汤谷平
- 关键词：聚乙烯亚胺肽类成纤维细胞生长因子
- 聚-羟丙基-天冬氨酸-谷氨酸-聚乙烯亚胺共聚物作为非病毒载体的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:选用聚-羟丙基-天冬氨酸-谷氨酸材料作为骨架偶联低分子量聚乙烯亚胺,以构建低毒、高效的新型非病毒性基因载体。方法:用聚-羟丙基-天冬氨酸-谷氨酸(PHPAG)为基本骨架,偶联低分子量的聚乙烯亚胺(PEI1.8kDa)形成聚-羟丙基-天冬氨酸-谷氨酸-聚乙烯亚胺(PHPAG-PEI1.8kDa)的载体材料。通过核磁共振氢谱(1H-NMR)、粒径测定、凝胶体积排除色谱法(GPC)等化学物理方法,凝胶电泳阻滞实验、MTT细胞毒性实验、细胞转染等生物学实验,对聚合物的结构及性能进行研究。结果:成功合成载体材料PHPAG-PEI1.8kDa。通过1H-NMR证实材料PHPAG-PEI1.8kDa在5或6个氨基酸上能偶合1个PEI1.8kDa。GPC结果表明PHPAG、PHPAG-PEI1.8kDa2种材料的分子量约为1.2×104。粒径检测结果显示,PHPAG-PEI/pDNA复合物的平均粒径为200nm左右。凝胶电泳阻滞实验表明,PHPAG-PEI/pDNA复合物在N/P为3.5∶1时可以完全阻滞DNA。细胞毒性实验表明,在COS-7和A2932种不同的细胞中,载体材料显示出较低的毒性,与对照组PEI1.8kDa相近。在B16细胞、Hela细胞上的转染实验表明,PHPAG-PEI/pCAG-Luc3的复合物在N/P为25∶1时的转染效率最高,高于对照组PEI25kDa。结论:PHPAG-PEI聚合物载体材料是一种有潜在用途的非病毒基因药物载体。
- 陈丹何彬彬赵丹军姜启英王中仁周峻余海王青青汤谷平
- 关键词：聚乙烯亚胺转染质粒谷氨酸天冬氨酸
- 香菇多糖键合低分子量的聚乙烯亚胺作为新型非病毒基因载体的研究被引量：3
- 2009年
- 目的:构建以香菇多糖为骨架材料键合低分子量聚乙烯亚胺的新型转基因载体,研究其在肿瘤细胞中的基因转染。方法:从香菇中提取香菇多糖作为载体骨架,1,1'-二羰基咪唑(CDI)作为交联剂,键合低分子量的聚乙烯亚胺(PEI1.2kDa)形成香菇多糖-聚乙烯亚胺(LNT-PEI)聚合载体材料。将叶酸(folicacid,FA)偶联到LNT-PEI上,形成具有肿瘤细胞靶向性的组装式基因载体LNT-PEI-FA。用核磁共振氢谱(1H-NMR)、傅里叶转换红外光谱(FT-IR)和热重分析(TGA)等对载体材料进行化学表征,以确定其结构。用凝胶电泳阻滞实验观察LNT-PEI-FA对质粒DNA的结合能力,MTT法检测聚合物的毒性,用TEM对LNT-PEI-FA/DNA复合物的粒径大小、形状等进行检测。在A293和B16细胞株上进行转染实验。结果:凝胶阻滞电泳结果显示,LNT-PEI-FA与DNA在W/W为1.8∶1时可以完全缩合DNA,在相同浓度下LNT-PEI-FA的毒性明显低于PEI25kDa;体外转染实验显示,在A293和B16细胞株上具有很高的转染效率,荧光素酶表达值分别为1×1010和1×107。结论:以香菇多糖为骨架材料键合低分子量聚乙烯亚胺形成的转基因载体是一种有潜在研究价值的新型非病毒转基因载体。
- 姜启英陆晓虎义平陈丹赵丹军周峻余海王青青汤谷平
- 关键词：香菇多糖聚乙烯亚胺基因转移技术
