周广和
- 作品数:125 被引量:648H指数:15
- 供职机构:中国农业科学院植物保护研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家攀登计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- 大麦黄矮病毒GAV株系编码的基因沉默抑制因子的鉴定
- <正>随着植物抗病毒基因工程研究的深入发现,几乎所有的由病毒RNA和mRNA介导的转基因都会引起植物对病毒的抗性,称为VIGS(Virus induced gene silencing),是PTGS的特殊形式,包含有RN...
- 吴蓓蕾王锡锋周广和
- 文献传递
- 大麦黄矮病毒运动蛋白原核表达产物抗血清的制备及体内检测
- <正> 植物病毒的运动蛋白(MP)参与病毒在体内的运转,研究运动蛋白在体内的定位和作用机制是植物病毒学研究的热点之一。在研究过程中,制备运动蛋白的抗血清是一种必要的研究手段。由于运动蛋白为功能蛋白,直接从病株体内提取难度...
- 晋治波王锡锋周广和
- 文献传递
- 大麦黄矮病毒GPV株系外壳蛋白基因在E.coli中的表达及抗血清制备被引量:1
- 1996年
- 病毒外壳蛋白基因经适当引物逆转录成cDNA后,应用聚合酶链反应(PCR)扩增,得到大麦黄矮病毒(BYDV)GPV株系的外壳蛋白(CP)基因。将此基因克隆至表达载体pMal,转化E.coliTB1,诱导表达了携带外壳蛋白的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的7%,此融合蛋白的分子量约为60kD,经亲和层析纯化后免疫家兔。
- 郝麟惠成卓敏周广和
- 关键词:大麦黄矮病毒外壳蛋白基因抗血清制备
- 地高辛标记的cDNA探针检测烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒及马铃薯Y病毒被引量:19
- 2004年
- 根据已发表的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计特异引物,分别以提取的TMV、CMV和PVY侵染的病叶总RNA为模板,反转录PCR进行体外扩增,分别得到长度为0.44、0.77、0.80 kb的目的片段,并克隆到pGEM-T easy质粒载体上,以构建的重组质粒为模板,用PCR方法合成了相应的地高辛标记的双链DNA探针。以合成的探针通过斑点杂交技术检测烟草病叶总RNA和烟草病叶汁液。TMV、CMV和PVY的3种地高辛探针检测各自感染的烟草病叶总RNA的稀释低限分别为1:1 000、1:10 000、1:320,检测各自侵染烟草病汁液的最大稀释倍数分别为1:100、1:100、1:10,而每种探针与健康烟草和其它2种病毒的反应均为阴性。
- 杜国英王锡锋周广和
- 关键词:地高辛标记CDNA探针花叶病毒黄瓜马铃薯Y病毒
- 玉米矮花叶病株种子质量对种子传毒的影响
- <正>玉米矮花叶病(Maize dwarf mosaic)是发生最普遍,危害最严重的玉米病毒病害之一。在自然情况下,病毒可经种子近距离或远距离传播为田间提供初侵染毒源,再由介体蚜虫非持久性传播引起大面积流行,目前生产上主...
- 李莉王锡锋周广和
- 文献传递
- 大麦黄矮病毒-GAV在燕麦植株体内运动规律的初步研究被引量:12
- 2009年
- 利用RT-PCR方法研究了大麦黄矮病毒-GAV在燕麦植株内的移动规律。先将介体麦二叉蚜(Schizaphis graminum)在BYDV-GAV新鲜病叶上饲毒,再将获毒蚜虫放置到二叶期的健康燕麦植株接种48h,随后分期提取接种植株的第1~6片叶和根组织的总RNA,利用特异引物扩增BYDV-GAV的外壳蛋白(CP)基因以检测病毒在燕麦植株内的复制和移动。结果表明,在接种5d后,接种叶片(第2片叶)呈现阳性,接种7d后,植株新生的第4片叶被侵染,接种9d后,部分的第3片叶呈现阳性,至接种16d,几乎所有的叶片均呈现阳性。仅在接种的第5、7和9d收集的根组织呈现阳性,而所有的第1片叶均为阴性,可能是由于这些组织内病毒含量太低所致。本研究初步揭示了BYDV-GAV长距离运动的规律并且发现该病毒在燕麦根部从接种到系统发病都没有进行大量增殖,为今后进一步研究病毒运动机制选取适当的植物材料提供了基本信息。
- 王亚南周锟王锡锋周广和
- 关键词:燕麦RT-PCR
- 大麦黄矮病毒GPV与GAV间异源装配现象的初步研究
- 以我国麦区的大麦黄矮病毒GPV、GAV为材料,利用它们的蚜传特异性, 将由禾谷缢管蚜传播的GPV和由麦长管蚜传播的GAV混合侵染到岸黑燕麦上, 并进行继代传毒。混合侵染后代蚜传表现型的变化初步表明存在异源装配现象,
- 刘艳王锡锋周广和
- 应用生物技术向小麦导入黄矮病抗性的研究被引量:104
- 1991年
- 小麦黄矮病是我国小麦的主要病害之一,迄今在普通小麦中还未发现抗性材料.经酶联免疫吸附分析,发现在小麦族中有13个种具不同程度抗性.中间偃麦草、小麦-中间偃麦草的八倍体衍生物无芒中4和TAF46及由TAF46育成的小麦附加系L_1均高抗黄矮病.以L_1为抗源,采用CSph突变体和组织培养诱导分别育成了抗病的易位系119880和119899.资料表明其抗性由一个显性基因所控制.筛选出pEleAcc3和pPJN8(E_1-T_1)两个互补DNA分子探针,可探测出在普通小麦遗传背景中的中间偃麦草DNA,在Southern杂交中,中间偃麦草及其衍生物的DNA清晰显示出小麦DNA所缺乏的一条特异带,通过比较其相对深浅程度可判断易位系所获的外源染色体片断的大小,作为黄矮病抗性的选择标志.
- 辛志勇徐惠君陈孝林志珊周广和钱幼亭成卓敏P.J.LarkinP.BanksR.AppelsB.ClarkeR.I.S.Brettell
- 关键词:小麦黄矮病中间偃麦草抗性
- 全文增补中
- RNAi介导的小麦抗BYDV转基因小麦研究
- <正>大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf viruses,BYDVs)是一类+ssRNA 病毒,分布广泛,是世界上危害最严重、流行最广泛的植物病毒之一。研究发现普通小麦种质资源中缺乏抗黄矮病基因。国内外...
- 吴蓓蕾王锡锋刘艳周广和
- 文献传递
- 三种麦蚜的RAPD鉴别
- 由于蚜虫体小、生活周期复杂,其形态受环境因素——如气候或寄主植物的生理状况影响很大,同一种类在同一时间、同一空间内可以有不同的生物型发生,使得在某些情况下蚜虫种类的鉴定很困难,更不用说种下生物型的分化了,这样鉴定同种蚜虫...
- 李莉周广和
- 关键词:麦蚜RAPD分析
- 文献传递