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湖南汉族人群TNF-α基因-308G/A多态与原发性高血压相关性研究被引量：2: 2011年; 目的:研究TNF-α基因-308G/A多态与原发性高血压(EH)的相关性。方法:选择246例EH患者和208例正常对照组为研究对象,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法检测TNF-α基因启动子区-308G/A多态位点等位基因以及基因型频率分布特点,并分析其多态与EH遗传易感性的关系。结果:EH组患者TNF-α(-308G/A)位点GG、GA、AA三种基因型的频率分别为85.0%、11.8%、3.2%;G、A两种等位基因的频率分别为90.9%、9.1%。对照组TNF-α(-308G/A)位点GG、GA、AA三种基因型的频率分别为89.4%、10.6%、0;G、A两种等位基因的频率分别为94.7%、5.3%。EH组GA、AA基因型频率显著高于对照组(P=0.028);A等位基因的频率亦明显高于对照组,患高血压的危险性增加1.729倍,95%的可信区间为1.056～2.831,差异均有统计学意义(P=0.030)。结论:TNF-α基因-308G/A位点多态与湖南汉族人群EH可能相关,A等位基因可能是EH的遗传易感基因。; 彭翠英周翠兰贺庆芝; 关键词：肿瘤坏死因子原发性高血压遗传易感性

通过插入部分摇摆寡核苷酸检测基因突变耐受能力的方法: 本发明公开了一种通过插入部分摇摆寡核苷酸检测基因突变耐受能力的方法，包括如下步骤:采用合成的NNT和/或NNC串联核酸片段，在其末端加上限制性内切酶位点，直接连接经酶切处理后的载体片段，将载体导入宿主细胞，宿主细胞经表达...; 周翠兰徐惠芬张安迪李文张佳李凯; 文献传递

突变敏感性分子开关快速筛查肥厚性心肌病MYH7基因Ala26Val突变被引量：3: 2011年; 目的利用高保真聚合酶介导的突变敏感性分子开关联合琼脂糖凝胶电泳,建立对肥厚性心肌病MYH7基因Ala26Val突变进行快速筛查的技术平台。方法应用PCR反应扩增包含MYH7基因Ala26Val突变区域的基因序列,通过基因克隆技术与反向PCR体外定点突变技术,分别得到MYH7基因Ala26Val突变的野生模板与突变模板,并通过基因测序分析进行确证。设计与Ala26Val突变位点配对及三末端不配对的3′硫化修饰正向引物,在其下游设计一条反向引物,分别构成野生引物对与突变引物对,进行高保真DNA聚合酶介导的双向引物延伸反应,利用凝胶成像系统对其PCR结果进行分析。结果当突变引物对与突变模板配对时,引物被延伸,有PCR产物;与野生模板不配对时,引物却不能被延伸,无PCR产物。同样,野生引物对只有与野生模板匹配时得以延伸,而与突变模板不匹配时则不能延伸。结论高保真DNA聚合酶偶联硫化修饰引物构成的突变敏感性分子开关能够快速筛查肥厚性心肌病MYH7基因Ala26Val突变,达到非此即彼的二元化效果,该分子开关在肥厚性心肌病基因筛查中具有巨大的潜在应用价值。; 郭紫芬兰芬周翠兰李凯廖端芳

一种基因热点突变的检测方法: 发明名称一种基因热点突变的检测方法摘要本发明通过采用体外对野生序列进行限制性内切酶消化和将切口处末端进行不利于连接反应的处理，将体外扩增片段亚克隆，然后对克隆形成的菌落进行测序分析。本发明有利于突变基因形成菌落而对野生基...; 周翠兰张安迪彭翠英张佳郭紫芬肖莉李文刘璇李凯; 文献传递

多媒体网络互动系统在局部解剖学教学中的应用被引量：7: 2010年; 局部解剖学是一门从基础过渡到临床的桥梁学科,该课程具有较强的实践性和应用性,其教学内容多、概念抽象、认知立体感强。应用传统的教学模式,学生难以全面掌握,利用多媒体网络互动系统,融合目前解剖学研究前沿的数字化技术,以逼真的图像将复杂、抽象、费解的理论简化,同时穿插一部分实践操作,极大地激发了学生学习解剖学的兴趣,取得了事半功倍的教学效果,提高了教学质量,推动了教学改革发展。; 李素云万炜向宇燕何慧熊伟周翠兰杨咏梅; 关键词：局部解剖学实验教学数字化技术

稳定高效表达人血栓调节蛋白的CHO细胞株的建立: 2008年; 目的:构建稳定高效表达人血栓调节蛋白(human thrombomodulin,hTM)的CHO细胞株,以便于大量生产纯化hTM蛋白。方法:利用脂质体li-pofectamine 2000将包含hTM基因全长序列的重组表达质粒pThr402转染CHO细胞。转染后用G418的选择性培养液筛选、挑取抗性克隆。采用流式细胞术和Western blotting检测hTM在CHO细胞膜表面的表达情况,筛选建立稳定高效表达hTM的CHO细胞株并对其稳定性进行观察。结果:重组表达质粒pThr402转染CHO细胞后,流式细胞术证实hTM稳定高效表达于随机挑选的5个抗性克隆细胞株的细胞膜表面,但表达量有差异。Western blotting分析检测显示hTM表达量较高的CHO-TM1、CHO-TM4与CHO-TM5细胞株的细胞裂解液出现了与预期值相符的约105000的特异性条带。CHO-TM5已经经过冻存复苏前后各20次传代,且无论有无G418选择压力存在,hTM表达水平无明显差异。结论:成功构建了稳定高效表达hTM的CHO细胞株,可望获得大量蛋白,为进一步研究hTM的生物学功能以及制备和筛选抗hTM的单抗开辟新的途径。; 郭紫芬何淑雅周翠兰廖端芳; 关键词：CHO细胞稳定转染

单核苷酸多态性敏感分子开关在基因组单核苷酸多态性检测中的特异性分析被引量：1: 2005年; 目的探讨硫化修饰的碱基特异性引物与高保真DNA聚合酶所构成的对单核苷酸多态性敏感的分子开关系统在基因组单核苷酸多态性检测中的特异性。方法以人类基因组DNA为模板,采用3’末端配对及不配对的3’末端硫化修饰引物,进行不同保真度DNA聚合酶介导的引物延伸反应。结果Taq酶介导的碱基特异引物延伸反应扩增产物出现非特异性带,而单核苷酸多态性敏感分子开关介导的引物延伸反应未出现非特异性带。结论单核苷酸多态性敏感分子开关是一种特异性强,可靠性高的可用于基因组单核苷酸多态性分析的新方法,可在单碱基水平对遗传病相关基因进行特异性检测。; 彭翠英胡卫民周翠兰陈琳玲刘俊肖莉殷宇芳李凯廖端芳; 关键词：分子生物学单核苷酸多态性 DNA聚合酶特异性

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周翠兰