孙可芳 作品数:41 被引量:35 H指数:3 供职机构: 武汉生物制品研究所 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家科技攻关计划 “九五”国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
武汉(Wu)系列抗入T细胞及其亚群单抗 被引量:1 1989年 本文报告了Wu系列抗人T及其亚群单抗按国际第三次人白细胞分化抗原专题讨论会要求进行检定的结果。这是国内第一套较全的OKT样系列单抗,即WuT1(OKT1,CD5);WuT3(OKT3,CD3);WuT4(OKT4,CD4);WuT6(OKT6,CD1a):WuT8(OKT8,CD8);WuT9(OKT9,抗转铁蛋白受体,抗TfR);WuT10(OKT10,CD38);WuT11(OKT11,CD2)及Wu-Tac(Tac,CD25)。 史良如 陈善华 王中德 谭向阳 欧阳斌 徐辉 吴晓波 封江南 王志友 孙可芳 赵亚杰关键词:单抗 亚群 T细胞 人白细胞分化抗原 人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的表达和鉴定 被引量:4 2005年 目的对人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体A12进行可溶性表达及特异性和中和活性检测。方法表达人源单链抗体A12的菌株,经诱导后进行SDS-PAGE及Western blot检测,用流式细胞仪(FACS)检测表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染Vero细胞的能力,用快速荧光灶抑制实验(RFFIT)检测表达产物的中和活性。结果Western blot显示表达产物与抗C-myc抗体在相对分子质量约30 000处出现强阳性表达带。FACS表明A12与表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染的Vero细胞出现特异性反应。RFFIT表明,A12 ScFv在1∶27倍稀释时能完全中和病毒。结论已获得了A12可溶性表达,表达产物能与狂犬病毒G蛋白特异性结合,并对狂犬病毒具有一定的中和活性。 闭兰 张爱华 孙可芳 胡巧玲 祝玉桃 王志友 余模松关键词:单链抗体 基因表达 可溶性表达 治疗用鼠抗人单克隆抗体WuTac功能及药效学的研究 为证实WuTac单克隆抗体可阻断IL-2依赖的T细胞增殖作用,以及对IL-2受体的特异性结合作用,我们采用间接免疫荧光法,进行了阻断试验;同时为了研究WuTac对同种异体抗原刺激的T细胞(MLC)和PHA活化的T细胞增殖... 孙可芳 王志友 陈善华 贾卫关键词:单克隆抗体 白细胞介素-2 药效学 文献传递 荧光素标记抗CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制 目的:对本室用荧光素标记的抗CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。
方法:采用流式细胞术,利用其多参数的流式细胞分析技术,对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价。
结果: 荧... 孙可芳 闭兰 端义坤 赵亚杰 张涛 张爱华关键词:荧光标记 单克隆抗体 生物制品 文献传递 抗人T淋巴细胞CD4人-鼠嵌合抗体真核表达的研究 CD4属于Ig超家族,为细胞膜表面单链糖蛋白,是HIV的主要受体。CD4T细胞在大多数自身免疫病发病过程中起中心作用,通过与MHC-II类分子相互作用识别抗原。应用抗CD4抗体可以干扰抗原识别及其对T细胞的激活而抑制CD... 张雪 张爱华 闭兰 赵亚杰 孙可芳 方志正关键词:人-鼠嵌合抗体 CD4 真核表达 文献传递 精神分裂症外周血T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白测定 被引量:1 1990年 作者测定48例精神分裂症患者外周血 E 花环形成率 IgG、IgA、IgM 值,单克隆抗体检测 T 细胞及其亚群变化,并与健康对照组相比。各项结果均无明显差异,但 T_H/T_S 比值降低,表明 T 抑制细胞(T_S)功能相对亢进,不支持精神分裂症为自身免疫性疾病。此外,病程、家族史及是否用抗精神病药物,对上述各项指标均无明显影响。 臧德馨 王高华 肖家宏 赵厚王 孙可芳 封江南 陈善华 史良如关键词:精神分裂症 免疫球蛋白 淋巴细胞亚群 荧光染料R-藻红蛋白标记小鼠抗人CD4单克隆抗体 被引量:3 2006年 以R-藻红蛋白(R-PE)标记小鼠抗人CD4单克隆抗体,形成单色或和用其他荧光染料标记的CD系列单抗组成双色、多色的荧光试剂,应用于流式细胞仪检测分析。用异双功能交联试剂SPDP和SMCC分别活化R-PE和CD4单抗,用DTT使经SPDP活化后的R-PE巯基化,再与用SMCC活化的CD4单抗交联。使用NEM终止交联反应,经Sephacryl S-300柱在AKTA FPLC快速液相色谱系统(简称AKTA)监测下分离纯化。结果用R-PE标记的抗CD4单抗,检测正常人外周血淋巴细胞表面CD4抗原的表达,经流式细胞仪(简称FACS)分析表明,R-PE标记的CD4抗体特异性保持完好,荧光强度较高,还可与用FITC标记的其它CD系列单抗配伍成双标或多标试剂。使用SPDP,SMCC异双功能交联试剂和DTT还原剂,成功地偶联了R-藻红蛋白和CD4单克隆抗体,可应用于流式细胞仪检测分析。 赵亚杰 闭兰 孙可芳 端义坤 詹骞 金玉玲 吕兰君 张爱华关键词:R-藻红蛋白 注射用鼠抗人T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(WuT3) 本项目属于免疫学领域。WuT3(商品名:武生替善)是一种鼠抗人淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(单抗),是一种新型的免疫抑制剂,主要用于预防和治疗器官移植的急性排斥反应,还可用于骨髓移植中移植物抗宿主反应和再障的治疗等。 陈善华 史良如 王志友 张发芝 孙可芳 蒋轶敏 吴炳奎 乌义安 邱地久文献传递 抗人CD4嵌合抗体基因真核表达质粒的构建及其瞬时表达 被引量:2 2011年 目的构建抗人CD4嵌合抗体基因真核表达质粒,并在哺乳动物细胞中进行瞬时表达。方法采用RLM-RACE法克隆WuT4抗体可变区和信号肽序列,并采用基因拼接法构建嵌合抗体基因真核表达质粒。采用脂质体法瞬时转染HEK293T、CHO-DHFR-和COS-7 3种哺乳动物细胞,ELISA法检测转染细胞上清中嵌合抗体的浓度,流式细胞术、Western blot和Dotblot分析嵌合抗体的抗原结合活性,并对表达的嵌合抗体进行免疫荧光分析。结果成功克隆了WuT4抗体可变区和信号肽序列;抗人CD4嵌合抗体共表达质粒pOptiVEC-T4H和pcDNA3.3-T4L构建正确;表达的嵌合抗体保留了亲本抗体的抗原结合力,并能特异性识别人CD4分子;免疫荧光分析表明,表达的嵌合抗体含人抗体的重、轻链恒定区。结论 已成功构建了抗人CD4嵌合抗体基因真核表达质粒,并能在哺乳动物细胞中瞬时表达,为其进一步研究奠定了基础。 胡迪超 张爱华 潘勇兵 端义坤 孙可芳 张银川 杨晓明关键词:基因拼接 嵌合抗体 荧光标记CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制 被引量:1 2007年 目的对荧光素标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。方法采用多参数的流式细胞分析技术,对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价,并进行稳定性试验。结果荧光标记的单克隆抗体特异性保持完好;单色标记的抗体荧光强度均比进口对照低一个数量级;FITC-CD3/PE-CD4平均荧光强度与进口对照相差较大,FITC-CD3/PE-CD8和FITC-CD4/PE-CD8平均荧光强度与进口对照相差较小;FITC标记产物的F/P值控制在1~2之间;标记抗体于2~8℃放置18个月,稳定性良好。结论应用FITC、PE标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体可以采用流式细胞仪进行检测。 孙可芳 肖建 闭兰 端义坤 赵亚杰 张涛 张爱华关键词:流式细胞术 荧光素标记 单克隆抗体